GC―MS测定白酒中3种邻苯二甲酸酯
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摘要：建立了白酒中3种邻苯二甲酸酯类的GC-MS分析方法，通过比较不同的前处理方法，确定白酒的提取方法，同时确定质谱条件。试验表明：方法检出限0.05 mg/kg，相关系数大于0.998，线性范围为0.05～5mg/kg，高中低浓度添加回收率为84-115%。该方法前处理过程简单、净化效果好，可用于白酒样品中3种邻苯二甲酸酯类增塑剂的测定。
关键词：白酒 邻苯二甲酸酯 气质联用仪
中图分类号：TS262.3 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2015）02-0014-02
邻苯二甲酸酯（Phthalic Acid Esters，PAEs），是邻苯二甲酸形成的酯的统称，俗名叫“增塑剂”。它是一种环境荷尔蒙，广泛分布于各种食物内，其毒性超过三聚氰胺20倍。塑化剂DEHP的作用类似于人工荷尔蒙，其生物毒性主要属雌激素与抗雄激素活性，对人体的健康危害极大。目前其测定方法主要有薄层扫描法、傅里叶变换红外光谱法、气相色谱法、液相色谱法、液相色谱质谱联用法和GC-MS法，GC-MS方法能进行选择性离子进行定性定量，抗干扰能力较强[1-3]。因此，本文拟采用GC-MS法对白酒中邻苯二甲酸酯类化合物进行测定，以提高测定精度。
塑化剂包括邻苯二甲酸二异丁酯（DIBP）和邻苯二甲酸二丁酯（DBP）以及邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）等17种，本实验主要以DIBP，DBP，DEHP为分析目标物，建立白酒中PEAs的GC-MS测定方法。
1 实验部分
（1）仪器与试剂。Agilent7890A-5975C气相色谱-质谱联用仪（GC-MS），超声波发生器，正己烷（色谱纯），乙腈（色谱纯），丙酮（色谱纯），无水硫酸钠（分析纯，200℃烘3h后备用），无水乙醇（色谱纯），氯化钠（色谱纯），3种邻苯二甲酸酯标准品（纯度均在95%以上）。
（2）试验所用玻璃器皿。所有试验用玻璃器皿均用丙酮浸泡12h后200℃烘烤2h。
（3）原料。白酒。
（4）标准溶液的制备。准确称取DIBP、DBP、DEHP标准品各0.05g，分别用正己烷稀释定容至50mL，配制成1000mg/L的单标储备液于棕色容量瓶中。分别移取上述3种单标储备液各1mL，用正己烷定容至10mL，配制成100mg/L的混合标准储备液，置于4℃冰箱中保存备用。
（5）标准曲线绘制。取100mg/L储备溶液，60%乙醇溶液稀释成0.5、1、2、5、10mg/L工作液，以DIBP、DBP、DEHP含量为横坐标，峰面积为纵坐标制作标准曲线。
（6）样品处理。准确移取5ml白酒样品至25mL具塞试管中，85℃水浴30min（期间振荡混匀数次），从而蒸发乙醇。加入5ml正己烷，涡旋振荡1min，加入1g氯化钠30min后静置分层，取上层进样分析，过滤膜供气相色谱-质谱检测[3-4]。
2 色谱条件
色谱柱：HP-5MS 30m×0.25mm×0.25μm，载气为高纯氦气（纯度为99.99%），恒流模式，柱流速1mL/min，进样口温度250℃，不分流进样，进样量为1μL。升温程序：柱温60℃保持1min，以20℃/min升温至220℃，保持1min，再以5℃/min升温至280℃，保持4min。
MS条件：EI离子源，电子能源70eV，离子源温度230℃，四极杆温度150℃，连接线温度为280℃。电子倍增器电压2300V，GC-MS接口温度280℃，分析结果运用NIST标准谱库进行检索，列出匹配度大于90%的结果，并结合图谱进行定性分析，利用外标法计算已定性物质的含量。
3 结果与分析
3.1 提取溶剂及体积的选择
以不含塑化剂的空白酒样为基质，在5ml酒样品加入1ml浓度为 3mg/L的标准溶液，分别以正己烷、甲醇、三氯甲烷为提取溶剂，按照（6）同法处理。结果见表1。提取结果表明甲醇、三氯甲烷超声提取的效果不及正己烷。因此，实验选择以正己烷作为提取溶剂（见表1）。
在5ml酒样品加入1ml浓度为 3mg/L的标准溶液，分别以正己烷、甲醇、三氯甲烷为提取溶剂，按照（6）同法处理。结果表明选择2ml正己烷的提取效率较好（见表2）。
3.2 提取时间的选择
分别采用正己烷平行测定3组，震摇后超声振荡每组分为10min，20min，30min，60min。实验表明30min时可得到最佳回收率。
3.3 除水试剂的选择
分别采用氯化钠、无水硫酸钠、一水合碳酸钠、氢氧化钠。其中氯化钠的吸水性较好（142g吸180g的水），选择其作为除水试剂。根据上述中提取试剂选用2ml正己烷，且酒样品中一般含水量为60%，可选用1g左右的氯化钠。
3.4 特征离子的选择
对样品进行SCAN扫描，确定3种邻苯二甲酸酯类的定量碎片离子（表3）。进行SIM模式，只对分析物某些特征离子进行选择性检测，因而分析物的色谱峰强度增大，同时消除了样品基体中其他共存组分产生的影响，提高了分析方法的选择性和灵敏度[5-7]。
将3种目标物的混合标准溶液通过SIM模式得到TIC离子流图（图1）。
3.5 方法的线性关系与检出限
将三种标准溶液按上述实验方法和仪器色谱质谱条件进行测定，以邻苯二甲酸酯的浓度X（mg/L）为纵坐标，峰面积Y为横坐标进行线性回归。各邻苯二甲酸酯的质量浓度在范围内具有良好的线性关系，线性回归方程为：Y=217974X+56，相关系数r为0.998。以信噪比S/N=3，计算出检出限，当取样量为1.0g时，检出限为0.05mg/L。
3.6 方法的回收率与精密度 取浓度为2.0mg/L的标准工作溶液，进样1μL进行仪器分析，重复测定6次，峰面积RSD为2.19%。取酒样加入（0.05mL，0.1mL，1mL，2mL） 1mg/L的标准溶液，按上述方法进行样品前处理和测定，计算该方法回收率为84%～115%。
3.7 样品的测定
测定了某白酒的含量，其中DIBP和DBP含量分别为0.13和0.23mg/kg。实际样品TIC图见图2。
3.8 空白试验
为了降低白酒中PAEs本底的干扰，经试验证明试验过程中的试剂，器皿及其塑料用绳，对实验有干扰（图3），故实验过程中应注意如下几点：
（1）试剂：选用纯度较高的色谱纯试剂，以降低试剂空白；无硫酸钠装于塑料瓶中是造成空白值高的主要原因之一，未被200℃烘烤的玻璃器皿采用1ml正己烷超声提取后DEHP的含量为0.07mg/kg，且基线较不稳。该试验所用无水硫酸钠均于200℃烘烤3h后在干燥器中保存。
（2）试验用水：新制纯水，减少实验室空气及盛水容器对试验空白值的影响。
（3）器皿：称取塑料用绳（1g），1ml正己烷超声提取后DEHP的含量为0.15mg/kg.所有玻璃器皿经12h浸泡、洗净、200℃烘干的，瓶子上的绳子应采用棉绳，防止塑料绳带入的影响。
（4）人员操作时带入的影响，如手套等。称取手套（1g），1ml正己烷超声提取后DEHP的含量为0.04mg/kg。
（5）仪器应保持最佳状态，样品测定前应考察仪器系统中残留的PEAS本底值，本底值偏高时应可采取措施：高温烘烤离子源，多次进空白样品。
参考文献
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