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田基黄的药理与质量控制研究进展

来源:用户上传      作者: 陈霞

  [摘要] 田基黄作为传统中药在临床上作为抗肝类药物使用已久,其具有广泛的药理作用,有待于更深入的研究和探讨,使田基黄能更多地应用于临床。本文通过查阅近半年来国内外相关文献,结合田基黄的药理及临床应用、含量测定,指纹图谱的研究概况进行归纳并综述。
  [关键词] 田基黄;药理作用;质量控制
  [中图分类号] R285 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2011)34-31-03
  
  The Progression of Pharmacological Effect and Quality Control of Hypericum Japonicum
  CHEN Xia
  Department of Pharmacy,Zhuji Red Cross Hospital in Zhejiang Province,Zhuji 311800,China
  
  [Abstract] Hypericum japonicum as traditional Chinese medicine having extensively pharmacological effect has been used in clinical practice for a long time and more researches are required to expand its clinical application. The pharmacology and clinical application,assaying and finger print of hypericum japonicum combined with the foreign and domestic literatures were reviewed and summarized.
  [Key words] Hypericum japonicum;Pharmacological effect;Quality control
  
  田基黄始载于我国清代何克谏所撰写的《生草药性备要》,民间别名有小元宝草、雀舌草、七层塔等,为藤黄科金丝桃属植物地耳草(Hypericum japonicum Thunb)的干燥全草。据《中国植物志》记载其原植物地耳草为一年生纤细草本,广泛分布于辽宁、山东至长江以南各省区,生田边、沟边、草地以及撩荒地上。其味甘、微苦、性凉,归肝、胆、大肠经,具有清热利湿,解毒、散瘀、消肿、止痛等功效,中医临床上常用于治疗肝炎、急性黄疸型肝炎、肠炎、急性肾炎、急性结膜炎以及毒蛇咬伤、跌打损伤等[1]。本文现对近年来田基黄的药理及临床应用、含量测定、指纹图谱的研究概况总结如下。
  
  1 药理作用
  1.1 保肝作用
  林久茂等[2]以四氯化碳(CCl4)制备小鼠急性肝损伤的模型,并以田基黄水煎剂灌胃,通过监测小鼠血清中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)活力以及一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6的含量,观察肝组织的病理损伤程度。结果表明不同浓度的田基黄能不同程度地降低CCl4所致异常升高的小鼠血清中的ALT、AST、NO、TNF-α和IL-6含量,升高SOD活性,并对细胞因子介导的免疫炎症反应性损伤具有保护作用,可保护和修复肝细胞病理学损伤。提示田基黄对CCl4所致小鼠肝损伤具有防治作用,其作用机制可能与降低转氨酶、提高抗氧化能力和抑制NO、TNF-α和IL-6过量生成等有关。
  1.2 抑癌作用
   肖大江等[3]应用SRB法检测田基黄对CNE22细胞生长的抑制作用,PI分析细胞周期的变化,AnnexinV检测细胞凋亡的发生。结果显示田基黄抑制CNE22细胞的生长,引起细胞死亡;田基黄诱导CNE22细胞发生凋亡和坏死;田基黄作用人鼻咽癌细胞后S期细胞的比例增加,G2/M期细胞的比例减少。因此,一定浓度的田基黄可明显抑制人鼻咽癌细胞CNE22生长,并诱导其凋亡,其机制可能与阻滞细胞停留在S期有关。
  1.3 抗病毒作用
  刘妮等[4]建立体内抗病毒实验,以甲3型流感病毒滴鼻感染小鼠,观察田基黄对肺指数、病毒致小鼠死亡率的影响。结果表明口服10g/(kg・d)田基黄可明显抑制甲3型流感病毒引起的小鼠肺组织炎性实变,降低甲3型流感病毒感染小鼠的死亡率。因此,田基黄是一种治疗流行性感冒的有效药物,并对病毒性感冒的病因治疗具有良好的前景,安全有效,值得进一步开发。许潘健等[5]将田基黄与等量的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)或乙型肝炎病毒核心抗原(HBeAg)阳性血清混匀,使混合后的浓度分别为6g/L、12g/L、24g/L、48g/L和96g/L,孵育8h、16h。然后采用ELISA法测定HBsAg或HBeAg的滴度,观察其对HBsAg或HBeAg的抑制作用。结果表明96g/L和48g/L浓度的田基黄在作用16h后对HBsAg或HBeAg具有明显的抑制作用(P<0.01),因此田基黄在体外也有较强的抗HBsAg和HBeAg作用。
  1.4 抗痛风作用
  夏隆江等[6]观察田基黄提取物对尿酸(MSU)所致大鼠足爪肿胀的影响、对MSU诱导家兔急性关节炎的影响、对次黄嘌呤所致小鼠高尿酸血症的影响、对小鼠扭体反应的影响及小鼠耳廓肿胀法观察田基黄提取物品抗炎、镇痛作用。结果表明田基黄对MSU所致大鼠足爪肿胀有较好的抑制作用,能减轻MSU所致家兔急性关节炎炎症,降低高尿酸血症模型小鼠血尿酸值,有一定的抗炎作用,但镇痛作用较弱。说明田基黄具有抗痛风作用,值得进一步研究开发。
  1.5 抗菌作用
  虞金宝等[7]采用液体稀释法,将田基黄浸膏及提取物与幽门螺杆菌共同培养,通过比较细菌生长情况而测定田基黄浸膏及提取物的MIC和MBC。结果发现田基黄浸膏及提取物对幽门螺杆菌具有明显抑杀作用。
  1.6 其他药理作用
  传统中药田基黄除作为保肝药物外,还有治疗高脂血症、肾炎的作用。陈厚平等[8]在研究以田基黄为主的复方田基黄茶治疗高脂血症的临床疗效时发现其具有治疗高血脂症的作用。他将96例高脂血症患者随机分为治疗组56例,其余40例采用脂必妥片对照治疗,共治疗8周,观察疗效。结果表明,治疗组的有效率为91%,与对照组有效率72.5%比较,差异有显著性意义(P<0.01)。王邦鼎[9]用自制地耳草汤(地耳草、鸭跖草、益母草、白茅根各30g,白僵蚕、蝉蜕各12g,石韦、车前草各15g)治疗急性肾炎62例,取得了良好的效果。
  
  2 质量控制
  2.1 含量测定
  随着对田基黄活性成分研究的不断深入,用于鉴别和测定其含量的方法也有了较大的提高。唐丹等[10]采用分光光度法测定田基黄中总黄酮的含量,他利用黄酮类化合物母核上的酚羟基能与铝离子络合而显色,采用分光光度法,以槲皮苷为对照品,以10%三氯化铝醇溶液为显色剂,在波长273nm处对样品中的总黄酮进行含量测定。结果表明总黄酮在(3.20~16.0)μg/mL范围内线性良好(r=0.9999),该法的平均加样回收率为98.25%,RSD为2.21%(n=9),该法稳定性较好,24.0h内吸光度基本无变化,RSD为0.40%(n=6)。实验证明该方法稳定、简便、快速,适用于田基黄药材中总黄酮的含量测定。Juan Su等[11]使用HPLC-DAD-ESI/MS法同时测定田基黄药材中的五种成分,分别为Taxfolin-7-O-α-l-rhamnoside、异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素-7-O-α-l-鼠李糖苷和槲皮素。此分析采用ZORBAX SB-C18色谱柱,流动相为乙腈:0.5%甲酸水溶液,其线性及回收率均符合规定,最低检测限为0.5~7.5ng,含量范围为(2.0~34.18)mg/L。王欣欣等[12]采用反相高效液相色谱法测定田基黄中槲皮素的含量,使用迪马(钻石)C18色谱柱,以甲醇-0.06%磷酸(52∶48)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为360nm。结果表明槲皮素的线性范围是(7~42)μg/mL(r=0.9999),槲皮素平均回收率为100.3%,RSD=2.1%。该方法简便、准确,可用于田基黄中槲皮素的含量测定。熊丽等[13]使用高效液相色谱法测定田基黄中槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷的含量,首次建立了田基黄中槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷的含量测定的HPLC法,并测定了16个不同购买地的田基黄中槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷的含量,平均回收率为99.1%,该方法简便、快速、精密度好,为田基黄药材质量控制和综合开发利用提供了科学依据。秦盛莹等[14]首次建立采用RP-HPLC测定田基黄中异巴西红厚壳素的含量的方法,本研究采用正交试验设计优化异巴西红厚壳素的提取方法,选择提取溶剂用量、提取次数、提取时间3个因素,每个因素3个水平,按L9(34)正交表安排试验,以异巴西红厚壳素的含量为考察指标对正交试验的结果进行直观和方差分析,最后选定最佳提取方法为12倍量提取溶剂,回流提取2次,1h/次。该分析线性范围为(5.01~80.2)μg/mL(r=0.9999),平均回收率为97.5%(n=9),该方法简便、快速、准确、重复性好,可以为田基黄药材的质量控制提供依据。而熊丽等[15]改进了异巴西红厚壳素的质量分析方法,并通过实验优选了提取方式:采用80%乙醇超声提取两次,并同时测定了十六个产地药材的含量,在其测定的不同产地中,以江苏南通购买的药材含量最高。在同时测定有效成分含量方面,熊丽等[16]还使用RP-HPLC同时测定田基黄药材中异槲皮苷、槲皮苷和槲皮素的含量。其采用梯度洗脱的方式进行测定,其中异槲皮苷、槲皮苷和槲皮素浓度分别在(9.90~330)μg/mL(r=0.9996,n=6)、(19.2~640)μg/mL(r=0.9998,n=6)和(2.16~72.0)μg/mL(r=0.9997,n=6)范围内与峰面积线性关系良好;平均加样回收率(n=9)分别为97.2%,99.1%,98.9%,为田基黄药材质量控制提供了方法。

  2.2 指纹图谱
  蔡泽凡等[17]利用高效液相色谱建立了田基黄的色谱指纹图谱。根据色谱指纹图谱各个谱峰的相对保留时间值α和相对面积Sr对色谱指纹图谱进行分析对比研究,建立了一个快速、简易鉴别田基黄样品的色谱指纹图谱分析方法。他们在实验中比较了田基黄与遍地金两种药材的指纹图谱差异,并通过相似度判定二者的区别,使之成为一种鉴别田基黄的行之有效的方法。王永刚等[18]收集了30多个不同产地的田基黄药材样品,经过色谱条件的选择和优化,构建了田基黄药材HPLC指纹图谱,获得了其指纹特征,利用指纹特征考察了不同来源的田基黄药材间的质量差异,并论证不同生长期的药材所含的次生代谢产物含量有差异,并在指纹图谱上有所反映。因此规定药材的长度可以间接地固定药材生长期。并建议在挑选田基黄注射液投料药材时,该药材指纹图谱与参照指纹图谱(或共有模式)的相似度大于0.92。李仕海等[19]用RP-HPLC法梯度洗脱,测定田基黄及其混伪品细叶金丝桃的指纹图谱,并作相似度比较分析。结果表明田基黄不同样品指纹图谱相似度较好,而田基黄与细叶金丝桃的指纹图谱具有一定差异。该HPLC指纹图谱具有重现性好、特征性强、方法简便等特点,可用于田基黄药材的鉴别。Wei-Na Gao等[20]采用HPLC-PAD-ESI-MS技术对十个不同产地的田基黄药材进行指纹图谱测定,并将色谱指纹图谱中的20个共有峰进行归纳鉴定,分别为黄酮类及其苷类、间苯三酚类、黄烷醇类、口山酮类、色酮等。该法将指纹图谱与质量分析相组合,为田基黄的质量控制提供了依据。
  
  3 结语与展望
  田基黄是我国传统中药,并作为抗肝炎药物使用已久,现有各种制剂生产,如田基黄注射液、田基黄软胶囊、田基黄颗粒等。近年来许多学者对其进行了各方面的研究,在对其药理作用的研究中,发现其除了具有传统的保肝作用,还具有抑癌、抗痛风、抗病毒、抗菌等多种药理作用,但对于具有这些药理活性的作用机理还未完全阐明。在含量分析方面,主要是以槲皮素为主的各式槲皮苷为含量测定的主要对象,鉴于目前2010版《中华人民共和国药典》中,没有收录田基黄含量测定内容,为使其质量标准更加完善,有必要为原药材建立含量测定指标。同时对于不同产地的田基黄质量评价有待于进一步研究。另外,在质量控制方面,能否运用新的技术和手段建立其较为完善的质量评价体系,也有待深入研究。
  
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  (收稿日期:2011-09-06)


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