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纳豆激酶的研究综述

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  【摘 要】纳豆激酶具有非常好的溶血栓作用,具有半衰期长、血液中半衰期长等优点,来源于传统食品纳豆,安全可靠,是一种潜在的安全有效的绿色抗血栓药物,高活性纳豆激酶产品技术的研发有利于民生健康。源于传统食品纳豆的纳豆激酶,可由细菌发酵生产,成本低、安全性好,并且作用迅速,是一种理想的预防和治疗血栓的天然药物,具有极为诱人的广阔前景。
中国论文网 /8/view-13079413.htm
  【关键词】抗血栓药物;纳豆激酶;研究概况
  中图分类号: TQ464.8 文献标识码: A 文章编号: 2095-2457(2018)12-0110-002
  DOI:10.19694/j.cnki.issn2095-2457.2018.12.047
  A Review of Nattokinase Research
  WANG Ai-ping LIN Yan-fei WANG Zan TAO Zhi-wen
  (Sichuan Health Vocational College,Sichuan,Zigong,643000)
  【Abstract】Nattokinase has a very good thrombolytic effect,has a long half-life, long half-life in the blood and other advantages, from traditional food natto, safe and reliable,is a potential safe and effective green antithrombotic drugs, high activity The research and development of bean kinase product technology is beneficial to the health of people's livelihood.Nattokinase derived from traditional food natto can be fermented by bacteria. Nattokinase has low cost, good safety,and rapid action.Which is an ideal natural drug for preventing and treating thrombosis,and also has a very attractive prospect.
  【Key words】Antithrombotic Drugs;Nattokinase;Research Overview
  1 纳豆激酶的作用及研究意义
  纳豆激酶是纳豆菌发酵分泌到细胞外的一种具有溶纤维蛋白活性的蛋白质,由学者须见洋行于1987年在日本传统食品纳豆中发现[1],经研究证明纳豆激酶具有显著的溶解血栓的能力。其溶解血凝块的能力为血纤溶酶的4倍,它不但能直接作用于纤维蛋白,而且还可以诱导肝脏或血管内皮细胞产生纤溶酶原激活剂,使生物体自身纤溶系统活化[2];纳豆激酶的半衰期长,经研究其作用时间可长达8小时,因其来源于传统食品纳豆,安全无毒副作用,所以能够温和持续的提高血液的纤溶活性。
  目前研究早已证明,血栓的形成是由血液中纤维蛋白与相关血细胞粘在一起导致,而增大的血凝块会阻塞血液循环进而引起组织供血不足。这是引起各种心血管病的重要原因。由于�w维蛋白是血栓中的骨架成分,所以分解血栓中的纤维蛋白成分是溶栓工作中的关键。正常生理情况下,机体血液循环系统处于凝血过程和溶栓过程的动态平衡中,随着个体年龄的增加,机体合成纤维蛋白的功能减退而使凝血过程加重,凝血和溶栓之间的平衡被打破,这就是老年人更容易出现心血管疾病的原因[3]。
  心血管疾病已经成为威胁国民健康需要的重要原因,据权威组织调查数据显示,在全世界范围内,因心血管疾病而死亡的人数高达1700万,明显超过呼吸系统疾病、肿瘤和传染病。到2020年,死于心血管疾病的人数可能会超过2000万。而中国作为占世界人口数量六分之一的人口大国,加之现在又进入了老龄化阶段,所以对于心血管疾病的治疗和研究已成为摆在国人面前的一项重大课题,急须加大研究。据有关文献报道,在中国,每年死于心血管疾病的人数高达260万人。这种病不但致残率和死亡率高,而且很难根治,对人类的健康带来了严重的威胁[4]。
  目前临床应用的溶栓药物, 如尿激酶、链激酶、重组型纤溶酶原激活剂等,存在半衰期短、用药量大、对蛋白纤维的溶解不具有选择性,用药量控制不好易导致内出血,或易引起超敏反应等副作用[5],所以很难成为面向广泛的大众化药品。而来源于传统食品纳豆的纳豆激酶,可由细菌发酵生产,成本低、安全性好,并且作用迅速,是一种理想的预防和治疗血栓的天然药物,具有极为诱人的广阔前景。
  2 纳豆激酶(NK)的溶栓作用原理
  如下图1所示,纳豆激酶主要从四个方面:通过溶解纤维蛋白的形式直接溶解血栓;通过刺激tPA的产生而溶解血栓;通过改变尿激酶原空间结构使其激活为尿激酶溶解血栓;通过降解和失活纤维酶原激活剂的抑制剂API-1,从而直接或间接的发挥溶解血栓的作用。
  3 纳豆激酶的研究现状
  鉴于纳豆激酶本身的特点及其作用,近几年来不可避免的成为国内外溶栓药物的研究热点。从查阅的文献和百度搜索的结果来看,国外的研究主要集中在纳豆激酶的活性和分离纯化等方面,并且已经达到分离纯化并分子克隆的水平,同时对纳豆激酶的生理功效和作用机理也研究的比较彻底。
  国内对于纳豆激酶的研究开展的相对较晚,上个世纪九十年代起才开始,主要集中在优良菌种选育、培养条件的优化、分离纯化方法的选择、体内外溶栓动物实验等方面,但都处于摸索阶段,至今还未见有将纳豆激酶开发成溶栓药物的报道。   近几年,在网上也看到有一些纳豆产品相继问世,但是在大众中的认知度较低。对效果的认可度也不是很理想,所以应亟需加大对纳豆激酶生产的基础性研究,这对防治心血管疾病、保障国民健康具有重要的社会效益与经济价值。
  4 纳豆激酶酶活性测定方法
  在研究NK的过程中,酶活性的测定是研究过程中不可缺少的环节,从目前报道的文献看来,纳豆激酶活性的测定主要有以下四种,其优缺点分析如下:
  4.1 纤维蛋白平板法
  该方法操作简单,成本低,并且可同时测定多个样品,近年来对此方法的改进使该方法的测定精确度有较大的提升,其缺点是溶解圈直径完全是表观值,分辨率低,不同的观测者所测数据有差异,并且溶解圈面积受孵育时间的影响较大。
  4.2 血清平板法
  血清平板法是在纤维蛋白平板法的基础上改进的,其原理是,纤维形成时在655nm处对光有最大吸收值,随着纳豆激酶作用时间的延长,吸光度值减小,实验中每半小时测定一次吸光度值,然后画出吸光度减少同纳豆激酶浓度之间的曲线,此法优点是简单、快捷、成本低、可信度高,该方法优点是操作简单,效率高,成本低,样品消耗小,有较高的可信度,缺点是血栓的制备对吸光值有一定的影响,实验误差较大。
  4.3 Flion-酚法
  �方法简便迅速,成本较低,可同时测定多个样品,但对纳豆激酶的溶栓时间要求严格,实验误差较大。
  4.4 四肽底物法
  该方法简便迅速,成本较低,缺点是有其它酶的干扰,因此测定值偏低,不能完全反应纳豆激酶的纤溶活性。
  5 结论
  纳豆激酶源于传统食品纳豆,由细菌发酵生产,成本低、安全性好,并且作用迅速,具有较好的溶血栓作用,半衰期长、等优点,是一种潜在的安全有效的绿色抗血栓药物,可以起到预防和治疗血栓的作用且无副作用,具有广阔前景的应用前景。
  【参考文献】
  [1]Sumi H,Hamada H,Tsushima H,et al.A novel fibrinolytie enzyme(nattokinase)in the vegetable cheese natto atypical and popular soybean food in the Japanese diet[J].Experientia,1987,43:1110-1111.
  [2]刘野,苏杭,宋焕绿等.基于纳豆激酶活性的纳豆加工条件的优化研究[J].食品工业科技,2016(7):170-175.
  [3]王乐,王君高.纳豆激酶的研究进展[J].中国酿造.2008(10):1-4.
  [4]赵洪,何执中.溶栓药物研究进展[J].中国生化药物杂志,2003(1):51-53.
  [5]杜冰,姚汝华.血栓溶酶研究进展.广东药学院学报,2000,16(4):291-294.

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