红花继木组织培养
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摘 要：研究了1-萘乙酸（NAA）, 6-苄基腺嘌呤（BA）两种激素的质量浓度组合对红花继木组织培养的影响， 结果表明2.0BA+0.1NAA, 2.0BA+0.2NAA, 2.0BA+0.3NAA 的配比对诱导红花继木愈伤组织均有较好的效果；2.0BA+0.3NAA是诱导红花继木产生愈伤组织分化的最佳激素配比；同时还发现了以红花继木第三节或第四节作为外植体最为合适；用0.2%升汞处理红花继木外植体10分钟的方法比较适宜的的消毒灭菌方法结论。
关键词：红花继木；组织培养；质量浓度
红花继木为金缕梅科常绿灌木或小乔木。嫩枝被暗红色星状毛。叶互生，革质，卵形，全缘，嫩枝淡红色，越冬老叶暗红色。花4～8朵簇生于总状花梗上，呈顶生头状或短穗状花序，花瓣4枚，淡紫红色，带状线形。蒴果木质，倒卵圆形；种子长卵形，黑色，光亮。花期4～5月，果期9～10月。[1]
红花继木一般采用播种或嫁接繁殖。采用组织培养的方法培养红花继木可以保持亲本的优良性状，且能在短期内大量繁殖，还可以培育优良的新品种[2]。植物培养中常用的激素是生长素和细胞分裂素， 他们协调调控植物组织的生长。本文就1-萘乙酸（NAA）, 6-苄基腺嘌呤（BA）两种激素对红花继木组织培养的影响展开研究， 得出了一些对红花继木组织培养的生产有一定指导意义的结论。
1 材料与方法
1.1 材料 红花继木材料采自校园内生长为旺盛无病害植株. 剪取带腋芽的茎段
1.2方法
1.2.1 外植体的选取
取红花继木新枝从上向下1-5节,分别在接种于MS培养基上.
1.2.2 外植体的处理及消毒
剪取生长健壮无病害的红花继木幼枝→将枝条剪成带节的小段( 每段带1个节) →用洗衣粉溶液浸泡30分钟→自来水冲洗5分钟→75%乙醇消毒30秒( 期间不断摇动) →无菌水浸泡2分钟( 期间不断摇动) →采用0.1%升汞和0.2%升汞的不同消毒时间进行消毒→用无菌滤纸吸干表面水分备用。
1.2.3 培养条件
基本培养基均为MS 培养基. 诱导培养基的激素配比质量浓度(单位:mg/ L) 为:
(1)0.2BA+0.1NAA, 0.2+0.2NAA, 0.2BA+0.3NAA
(2)0.5BA+0.1NAA , 0.5BA+0.2NAA, 0.5+0.3NAA
(3)1.0BA+0.1NAA , 1.0BA +0.2NAA, 1.0BA +0.3NAA
(4)2.0BA+0.1NAA, 2.0BA+0.2NAA, 2.0BA+0.3NAA
(5)3.0BA +0.1NAA,3.0BA+0.2NAA,3.0BA+0.3NAA
培养条件为温度( 25 ±1) ℃、光强2000lx 、每天光照12 h. 培养60 d 统计愈伤组织诱导率和生长状态.
2 结果与分析
2.1 不同来源外植体对红花继木组织培养的影响
从表1可以看出,不同节位的外植体经过培养,其产生愈伤组织的时间及愈伤组织的数量有明显的差异, 以第三节或第四节作为外植体最为合适.
2.2 不同消毒处理方法对外植体污染率的影响
将不同消毒方法处理后的材料正向接种于MS培养基2周后, 外植体材料被霉菌或细菌污染及成活的情况统计如表2所示。从表2可以看出, 由于消毒处理方法的不同,外植体材料污染率在6.7%～93.3%。污染率最低的消毒灭菌方法是用0.2%升汞处理10分钟, 污染率仅6.7% 。因此, 在本实验中, 我们得出用0.2%升汞处理10分钟的方法是红花继木外植体较适宜的消毒灭菌方法, 可为下一步诱导培养等奠定良好的基础。
2.3不同激素质量浓度配比对红花继木愈伤组织诱导的影响
从表3及表4中,我们可以看出,2.0BA+0.3NAA是诱导红花继木产生愈伤组织的最佳激素配比,也是愈伤组织分化的最佳激素配比
3.结论
本实验研究了不同节位的红花继木产生愈伤组织的时间及数量、不同消毒处理方法对外植体污染率的影响、不同激素质量浓度配比对红花继木愈伤组织诱导的影响及不同激素质量浓度配比对红花继木愈伤组织分化的影响，结果发现以第三节或第四节作为外植体最为合适；用0.2%升汞处理红花继木外植体10分钟的方法比较适宜的消毒灭菌方法；2.0BA+0.1NAA, 2.0BA+0.2NAA, 2.0BA+0.3NAA 的配比对诱导红花继木愈伤组织均有较好的效果；2.0BA+0.3NAA是诱导红花继木产生愈伤组织分化的最佳激素配比。
参考文献
[1].陈有民. 园林树木学[M].北京. 中国林业出版社 2003:393-397
[2]. 王家福.花卉组织培养与快繁技术[M]北京.中国农业出版社。2006：23-30
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