四君子汤对赛鸽抗氧化机能的影响

来源:用户上传      作者: 弓素梅 郭红斌 刘占民

　　摘要：将７２只４５日龄赛鸽随机分成４组，Ⅰ组为对照组，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组为试验组。饲养至５２日龄时试验组灌服四君子汤（剂量分别为0.125、0.250、0.500 ｇ／Ｌ），每天２次，每次１ ｍＬ，对照组灌服等量生理盐水，连喂７ ｄ。并分别于５２、５９、６６日龄心脏采血分离血清，测定血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性及丙二醛（ＭＤＡ）活性。结果显示，四君子汤可以提高赛鸽血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性，降低血清中丙二醛（ＭＤＡ）含量，尤其以高剂量组作用较明显。证明四君子汤能够提高赛鸽抗氧化功能。
　　关键词：赛鸽；四君子汤；抗氧化机能
　　中图分类号：Ｑ５５４；Ｒ２８５．５ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）07－1410-03
　　
　　Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｓｉｊｕｎｚｉ Ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ ｏｎ Ａｎｔｉｏｘｙｇｅｎｉｃ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ ｉｎ Ｒａｃｅ Ｐｉｇｅｏｎｓ
　　
　　ＧＯＮＧ Ｓｕ－ｍｅｉ１，ＧＵＯ Ｈｏｎｇ－ｂｉｎ１，ＬＩＵ Ｚｈａｎ－ｍｉｎ２
　　（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｈｅｂｅｉ， Ｄｉｎｇｚｈｏｕ ０７３０００，Hebei，China；
　　２．Ｏｃｅａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｈｅｂｅｉ，Ｑｉｎｈｕａｎｇｄａｏ ０６６０００，Hebei，China）
　　
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： ７２ ｒａｃｅ ｐｉｇｅｏｎｓ ａｔ ａｇｅ ｏｆ 45 ｄａｙｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｅｓｉｇｎｅｄ inｔｏ ｆｏｕｒ ｇｒｏｕｐｓ． ＧｒｏｕｐⅠｗａｓ the ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ， ａｎｄ ｇｒｏｕｐⅡ－Ⅳ ｗｅｒｅ the treatment ｇｒｏｕｐｓ． Ｔｈｅ treatment ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｓｕｐｐｌｉｅｄ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ Ｓｉｊｕｎｚｉ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ ｓｕｃｈ ａｓ ｍｉｄｄｌｅ ｄｏｓａｇｅ（０．２５0 ｇ／ｍＬ）， ｌｏｗ ｄｏｓａｇｅ（０．１２５ ｇ／ｍＬ） ａｎｄ ｈｉｇｈ ｄｏｓａｇｅ（０．５00 ｇ／ｍＬ） ｗｈｅｎ ａｔ ５２ ｄａｙｓ ｏｌｄ ａｎｄ ｔｗｉｃｅ ａ ｄａｙ ｗｉｔｈ １ｍｌ ｆｏｒ ７ ｄａｙｓ． Ｃａｒｄｉａｃ ｂｌｏｏｄ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｔａｋｅｎ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ａｔ ｔｈｅ ａｇｅ ｏｆ ５２， ５９ ａｎｄ ６６． Ａｎｄ ｔｈｅｎ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ（ＳＯＤ）， ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＧＳＨ－Ｐｘ）， ｃａｔａｌａｓｅ（ＣＡＴ） ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ（ＭＤＡ） ｉｎ ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ Ｓｉｊｕｎｚｉ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ ｃｏｕｌｄ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ（ＳＯＤ）， ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＧＳＨ－Ｐｘ） ａｎｄ ｃａｔａｌａｓｅ（ＣＡＴ）， ａｎｄ ｄｅｃｒｅａｓｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ（ＭＤＡ）ｉｎ ｓｅｒｕｍ， ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｄｉｓｔｉｎｃｔｉｖｅｌｙ ｉｎ ｈｉｇｈ ｄｏｓａｇｅ treatment ｇｒｏｕｐ． Ｉｔ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ Ｓｉｊｕｎｚｉ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ ｃｏｕｌｄ ｅｎｈａｎｃｅ ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｙｇｅｎｉｃ ｐｒｏｐｅｒｔｙ ｏｆ ｒａｃｅ ｐｉｇｅｏｎ．
　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｒａｃｅ ｐｉｇｅｏｎ； Ｓｉｊｕｎｚｉ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ； ａｎｔｉｏｘｙｇｅｎｉｃ ｐｒｏｐｅｒｔｙ
　　
　　俗话说“三分治疗七分养”，中兽医在畜禽疾病的防制中应该重视以防为主［１］。中医理论的平衡调节作用，能够维持机体的健康状态，实际上说的就是中兽医“治未病”的宗旨，也是预防保健的原则。四君子汤出自宋代太医局编著的《太平惠民和剂局方》，由人参（可用党参代替）、白术、茯苓、炙甘草四味中药组成，是中兽医调补正气的基础方，临床运用范围较广［２］。据报道，四君子汤能够提高机体免疫功能，促进肝细胞内非核酸物质的储存，有利于发挥细胞的正常功能［３］。赛鸽属阳性之体，体温高，代谢率高，所以在选用饲料添加剂的时候，宜选用一些平补消导之类的药物，而不宜用大温大寒药物［４］。党参偏温，多补脾胃、补气，而人参大补元气，偏热性［５］，所以四君子汤作为赛鸽饲料添加剂应以党参代替人参。本试验对赛鸽饲喂四君子汤，通过测定其对血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、丙二醛（ＭＤＡ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）的影响，探讨其对机体抗氧化机能的影响。旨在开发利用能够预防和增强机体抗病能力的中草药饲料添加剂。
　　１ 材料与方法
　　１．１ 材料
　　１．１．１ 中药方剂 四君子汤，由党参、白术（麸炒）、茯苓、炙甘草四味中药组成，质量比为２∶２∶２∶１；上述中药材均购于安国市药材中药经销部。
　　１．１．２ 主要试剂 超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、丙二醛（ＭＤＡ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）试剂盒购自南京建成生物工程研究所。
　　１．２ 方法
　　１．２．１ 中药方剂的制备 将党参、茯苓、白术（麸炒）、炙甘草四味中药按照质量比２∶２∶２∶１的比例称取，于容器内加水煎煮２５～３０ ｍｉｎ，过滤取汁。按上述方法煎煮２次，将２次药液混合浓缩，使每１ ｍＬ含生药１ ｇ，高压灭菌后于４ ℃冰箱中保存备用。
　　１．２．２ 试验动物分组及处理 石家庄同翔赛鸽公棚赠送的４５日龄赛鸽７２只， 饲养至５２日龄，随机分成４组，每组１８只。Ⅰ组为对照组，灌服生理盐水；Ⅱ组为四君子汤０．１２５ ｇ／ｍＬ低剂量组；Ⅲ组为四君子汤０．２５０ ｇ／ｍＬ中剂量组； Ⅳ组为四君子汤０．５００ ｇ／ｍＬ高剂量组。以上各组从５２日龄开始灌服药物，每天早晚各１次，每次１ ｍＬ，连喂７ ｄ。
　　１．２．３ 血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、丙二醛（ＭＤＡ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）检测 分别在５２、５９、６６日龄时，每组随机抽取６只赛鸽，心脏采血分离血清，－２０ ℃保存，按试剂盒说明测定。ＳＯＤ活性的检测：黄嘌呤氧化酶法；ＭＤＡ含量的检测：硫代巴比妥酸法；ＧＳＨ－Ｐｘ活性的检测：ＤＴＮＢ显色法；ＣＡＴ活性的检测：可见光分光光度法。
　　１．３ 数据处理及统计分析
　　用Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌ和ＳＰＳＳ．Ｖ１３．０软件处理，数据均以“平均数±标准误”表示，用Ｏｎｅ－Ｗａｙ ＡＮＯＶＡ进行方差分析，差异显著性用Ｄｕｎｃａｎ进行多重比较。

　　２ 结果与分析
　　２．１ 血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量测定结果
　　由表１可以看出，在５２日龄时各组赛鸽血清ＳＯＤ含量差异不显著（Ｐ＞０．０５），５９日龄和６６日龄时，不同浓度四君子汤组赛鸽血清ＳＯＤ含量逐渐升高。５９日龄时不同浓度四君子汤组赛鸽血清ＳＯＤ含量与对照组相比均差异显著（Ｐ＜０．０５），低、中、高剂量四君子汤组间差异显著（Ｐ＜０．０５）；６６日龄时不同浓度四君子汤组赛鸽血清ＳＯＤ含量与对照组相比差异均极显著（Ｐ＜０．０１），低、中、高剂量四君子汤组间差异极显著（Ｐ＜０．０１）。由此可见，随着赛鸽日龄的增长，低、中、高剂量四君子汤均可以提高赛鸽血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量，加强ＳＯＤ清除Ｏ２－・的能力，从而保护机体细胞免受损伤。
　　２．２ 血清中丙二醛（ＭＤＡ）含量测定结果
　　由表２可以看出，在５２日龄时各组赛鸽血清MDA含量差异不显著（Ｐ＞０．０５），５９和６６日龄时不同浓度四君子汤组赛鸽血清ＭＤＡ含量逐渐下降。５９日龄时，低剂量组和中剂量组赛鸽血清MDA含量与对照组相比差异显著（Ｐ＜０．０５），高剂量组与对照组相比差异极显著（Ｐ＜０．０１），低、中、高剂量组间差异显著（Ｐ＜０．０５）；６６日龄时，低剂量组赛鸽血清MDA含量与对照组相比差异显著（Ｐ＜０．０５），中、高剂量组与对照组相比差异极显著（Ｐ＜０．０１），低、中、高剂量组间差异极显著（Ｐ＜０．０１）。由此可见，随着赛鸽日龄的增长，高剂量四君子汤可以显著降低其血清中丙二醛（ＭＤＡ）含量，从而降低机体脂质过氧化作用形成的脂质过氧化物，提高机体的抗氧化能力。
　　
　　２．３ 血清中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）含量测定结果
　　由表３可以看出，在５２日龄时各组赛鸽血清GSH-Px含量差异不显著（Ｐ＞０．０５），５９日龄和６６日龄时，不同浓度四君子汤组赛鸽血清ＧＳＨ－Ｐｘ含量逐渐升高。５９日龄时，低剂量组赛鸽血清ＧＳＨ－Ｐｘ含量与对照组相比差异不显著（Ｐ＞０．０５），中剂量组与对照组相比差异显著（Ｐ＜０．０５），高剂量组与对照组相比差异极显著（Ｐ＜０．０１）；６６日龄时，低剂量组赛鸽血清ＧＳＨ－Ｐｘ含量与对照组相比差异不显著（Ｐ＞０．０５），高、中剂量组与对照组相比差异极显著（Ｐ＜０．０１），高、中、低剂量组间差异极显著（Ｐ＜０．０１）。由此可见，随着赛鸽日龄的增长，中、高剂量四君子汤可以明显提高其血清中ＧＳＨ－Ｐｘ含量，从而提高机体的抗氧化能力。
　　
　　
　　２．４ 血清中过氧化氢酶（ＣＡＴ）含量测定结果
　　由表４可以看出，在５２日龄时，各组赛鸽血清ＣＡＴ含量差异不显著（Ｐ＞０．０５）；在５９日龄和６６日龄时，不同浓度四君子汤组赛鸽血清ＣＡＴ含量逐渐升高。５９日龄时，不同浓度四君子汤组赛鸽血清ＣＡＴ含量与对照组相比均差异显著（Ｐ＜０．０５），高、中、低剂量组间差异显著（Ｐ＜０．０５）；６６日龄时不同浓度的四君子汤组赛鸽血清ＣＡＴ含量与对照组相比差异均极显著（Ｐ＜０．０１），高、中、低剂量组间差异极显著（Ｐ＜０．０１）。由此可见，随着赛鸽日龄的增长，低、中、高剂量四君子汤均可明显提高其血清中ＣＡＴ含量，从而清除细胞内过多的过氧化氢，提高机体的抗氧化能力。
　　
　　３ 小结与讨论
　　赛鸽在３０日龄至性成熟称为童鸽，这个阶段应该精心地喂养管理。童鸽生理特点与成年鸽有所不同，身体各部分发育未成熟，抵抗力较差，疾病的发生和传播比成年鸽严重［６］。所以，在这个阶段做好疾病的预防可以保证其健康生长发育。
　　机体防御体系的抗氧化能力与机体的健康程度存在着密切联系，机体抗氧化能力降低，常常导致各种疾病的产生［７］。保护机体免受过氧化损伤的抗氧化酶防御系统有ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＧＳＨ－Ｐｘ等，其中ＳＯＤ可将超氧阴离子自由基转换为过氧化氢（Ｈ２Ｏ２），过氧化氢是一种代谢过程中产生的废物，它能够对机体造成损害。为了避免这种损害，过氧化氢必须被快速地转化为其他无害或毒性较小的物质。ＧＳＨ－Ｐｘ和ＣＡＴ可以将Ｈ２Ｏ２转化为水，从而使有毒性的Ｏ２－・和Ｈ２Ｏ２均被转化为无害的水分子，起到保护细胞膜结构和功能的作用。ＭＤＡ是自由基攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化作用形成的脂质过氧化物，因而其含量的高低常可反映机体脂质过氧化的程度，由此可判断机体细胞受自由基攻击的损伤程度［８］。
　　试验中，四君子汤对赛鸽血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）的值均有不同程度的提高，且提高的程度与四君子汤的浓度成正比。同时，四君子汤可降低赛鸽血清中丙二醛（ＭＤＡ）含量。超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）值的提高显示了赛鸽体内抗氧化酶防御系统能力的增强，正是抗氧化能力的增强，使得机体清除自由基的能力加强，由过多的自由基攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸而产生的ＭＤＡ的含量也得到了控制，避免了对机体的氧化损伤，保证了赛鸽的健康。因此，本研究表明四君子汤可以增加赛鸽机体抗氧化能力，为四君子汤保障赛鸽的健康成长提供了依据。
　　试验通过饲喂赛鸽不同浓度的四君子汤，验证了其能够增强机体的抗氧化能力，可以将四君子汤作为童鸽保健及预防疾病的饲料添加剂，为开发绿色、安全、低或无药物残留的中草药饲料添加剂提供了依据［９，１０］。
　　参考文献：
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　　［３］ 杨 斌．四君子汤加味在兽医临床上的应用［Ｊ］．兽药与饲料添加剂，２００７，１２（５）：３７－３８．
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