盐碱胁迫对4个平菇菌丝生长的影响

来源:用户上传      作者: 訾惠君 周永斌 刘连强 张志军 王文治 魏雪生

　　摘 要：采用平板培养法，以不同浓度NaCl和pH值对4个平菇菌株进行耐盐碱胁迫试验。结果显示，各菌株对盐碱胁迫的敏感性不同。低盐和低pH值条件下，菌丝生长受影响不显著，当培养基的NaCl浓度大于1%、pH值大于9时，菌丝生长均受到严重抑制，且随着盐浓度和pH值的增加而增大，并呈极显著的负相关。 在4个平菇菌株中澳白的耐盐碱能力最强。
　　关键词：盐碱胁迫；平菇；菌丝；抗盐碱
　　中图分类号：S646.1+4 文献标识码：A DOI编码：10.3969/j.issn.1006－6500.2011.06.004
　　
　　Effect of Saline Alkali Stress on the Mycelia Growth of Four Pleurotus ostreatus Strains
　　ZI Hui-jun, ZHOU Yong-bin, LIU Lian-qiang, ZHANG Zhi-jun,WANG Wen-zhi，WEI Xue-sheng
　　（Tianjin Research Institute of Forestry and Pomology,Tianjin 300384,China）
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ: The saline-alkali stress testing of 4 Pleurotus ostreatus strains cultivated on PDA culture media was conducted. The results showed that the sensitivity to saline and alkali treatment of the 4 strains were different. The influences of salt stress and alkali stress on the mycelia growth were not significant at low NaCl concentration and low pH. When the concentration of NaCl was above 1% and pH above 9, the mycelia growth was seriously repressed，and the inhibition power was gradually increased with the higher pH and NaCl concentration. There was significant negative relationship between them. Among four strains the Aobai had the highest tolerance to salt and alkaline.
　　Key words: saline alkali stress；Pleurotus ostreatus；mycelium；salinity and alkalinity resistance
　　
　　天津地处海河流域最下游，东临渤海，大部分地区属于海积冲积平原，地下水位高，矿化度大，因而盐碱地广泛分布[1]。天津市共有盐渍化土壤831 km[2]，占全市土地总面积的42.3% [3]，因土壤中可溶性盐分含量过高，极大地影响了农、林、牧业生产[4]。因此,培育抗盐耐盐作物品种,提高作物本身的耐盐能力,是改良利用盐碱地经济而有效的方法，对盐渍化土壤的开发利用具有重要的意义[5]。
　　平菇属于担子菌纲、伞菌目、侧耳科、侧耳属，肉厚质嫩、味道鲜美、营养丰富，被誉为“安全健康食品”[6]，是天津市栽培最为广泛的食用菌，深受市场青睐。但是平菇耐盐碱菌株的选育研究在国内外还未见报道。由于中国沿海地区土壤盐渍化的盐分构成以氯化盐为主[6]，因此，本试验在不同浓度NaCl和pH值的条件下培养4个平菇菌株，观测其菌丝生长情况，以期为平菇耐盐碱菌株选育和利用盐碱地生产提供理论依据。
　　1 材料和方法
　　1.1 供试菌株
　　天达300、春秋抗王购于江都天达食用菌研究所，pL165来源于天津市林业果树研究所，澳白购于湖北华中农业大学。
　　1.2 供试培养基及试剂
　　PDA固体培养基[7]；供试 NaCl、NaOH、HCl为分析纯。
　　1.3 试验方法
　　1.3.1 培养基的配制 试验以马铃薯综合培养基（PDA）为基础培养基。设NaCl浓度分别为0(对照)，0.25%，0.5%，1%，1.5%，2%，2.5%共7个处理；另设pH值分别为5，6，7，8，9，10，11共7个处理，使用10％HCl或10％NaOH调pH值，用pH值试纸进行测试。每个处理均设3次重复。
　　1.3.2 菌丝体活化及接种 将供试菌种分别接种于无菌的PDA斜面培养基上，25 ℃恒温培养，待菌丝长满斜面时使用。接种时将斜面菌种切块0.5 cm2，转入制备好的各处理平板中央，置于25 ℃的培养箱中避光培养，同时接种PDA培养基作为对照。
　　1.3.3 菌丝生长状态观察及数据记录 接种后每24 h观察记录菌丝生长情况，并标记测量菌丝生长长度，计算菌丝生长速度，至其中1种处理菌丝长满培养皿后停止数据测量。计算不同浓度NaCl对菌丝生长的抑制率。抑制率公式为：
　　P=（v1-v2）/ v1×100%
　　式中：v1为对照菌丝生长率；v2为不同浓度NaCl处理菌丝生长率[8]。
　　2 结果与分析
　　2.1 不同浓度NaCl处理对平菇菌丝生长的影响
　　由表1可以看出，与对照相比，6个NaCl浓度处理对4个平菇菌丝的生长作用不同。在相同浓度 NaCl 处理组，不同菌株菌丝生长速度和长势差异明显，说明不同平菇菌株对盐胁迫的敏感性不同。
　　天达300对NaCl最为敏感，低浓度NaCl（0.25%）即能抑制菌丝生长，与其他菌株相比，差异极显著（P<0.01）。另外3个菌株对NaCl有不同程度的耐受性，在低浓度NaCl（0.25%）处理下，菌丝生长速度还稍大于对照组。当NaCl浓度超过0.5%后，春秋抗王耐受性较弱，菌丝生长受到抑制。而菌株pL165和澳白则显示出较强的耐盐能力，菌丝洁白浓密，生长势强，与对照组相比差别不显著（P<0.01）。相比较, 4个菌株在同一胁迫条件下耐盐性由强到弱的排序为：澳白＞pL165＞春秋抗王＞天达300。
　　各NaCl处理浓度对菌株产生的作用也不相同，NaCl 胁迫浓度较低的时候（0.25%，0.5%）较为耐盐的菌株生长未受到明显抑制，相反pL165和澳白菌丝生长受到刺激，长速高于对照组。当NaCl浓度大于1%，4个菌株的菌丝生长受到严重抑制，且随着盐浓度的增加而增大，呈极显著的负相关 。表现为菌丝长势呈减弱趋势，菌丝稀疏、细弱，长速缓慢，菌落直径较小。由此可见，高浓度NaCl对菌丝生长会有较大抑制作用，在采用菌丝生长速度作为评价平菇的耐盐性时，建议NaCl浓度应在1%左右。
　　2.2 不同pH值处理对平菇菌丝生长的影响
　　平菇喜欢偏酸性环境，最适合pH值为5.5～6.5[7]。由表2可见，4个菌株长速在同一pH值处理之间无差异（P=0.471＞0.05）。当培养基pH值在5～8时，处理组和对照组菌丝生长无显著差异，菌丝浓白，边缘整齐。当pH值＞9时，菌株生长受到严重抑制（图1），且各pH值梯度间差异极为显著（P<0.01），表现为接种后菌种块萌发延迟，萌发后的菌丝生长随着pH值升高受抑制率从40%（pH值为10）升至77%（pH值为11），菌落灰白色，菌丝纤细、长势稀疏。

　　在碱胁迫条件下，天达300长势好于其他菌株。4个菌株耐碱能力由强到弱的排序为天达300＞澳白＞春秋抗王＞pL165，表明平菇生长不耐碱性环境，菌株分别对盐和碱的敏感程度不同，综合分析，平菇澳白的耐盐碱性最强。
　　
　　3 讨 论
　　(1) 本试验结果表明，不同平菇菌株对盐胁迫的敏感程度有差别，在低浓度NaCl条件下天达300菌株受到影响，而澳白和pL165的菌丝长速分别较对照有所增加。但当NaCl浓度超过1%，各菌株生长均受不同程度抑制，随浓度增加而增长。
　　菌株对pH值处理表现基本相同， pH值为5～8时菌丝不受影响，pH值＞9时则呈明显抑制，抑制程度和pH值呈负相关。
　　（2）梯度浓度筛选是指利用不同浓度的氯化钠溶液作培养基,利用逐级提高氯化钠浓度的培养基对同一批材料进行诱变筛选,最终选出耐盐株系的方法[11]。试验结果显示，使用氯化钠进行平菇耐盐菌株筛选时，氯化钠浓度应在1%以上，低于0.5%时筛选作用不明显。
　　
　　参考文献：
　　[1] 蒋德勤，天津市土壤普查办公室，天津市土肥所，等.天津土种志[M].天津:天津科学技术出版社，1990：52-67.
　　[2] 王宝春，白冬梅，王雁，等.盐胁迫条件下不同草种耐盐碱表现[J].天津农业科学，2006，12（3）:44-46.
　　[3] 吴学东，冯学良，潘学东.天津林业生态工程[M].天津:天津科学技术出版社，2004：10-21.
　　[4] 尹建道，吴春森，杨进军，等.天津市盐碱地近30年研究历程的分析与思考[J].天津农业科学，2005,11（4）：1-4.
　　[5] 赵可夫,范海,江行玉.盐生植物在盐渍土壤改良中的作用[J].应用与环境生物学报,2002,8(1):31-35.
　　[6] 孙世海,张卫华,孟繁斌，等.NaCl胁迫下韭菜芽苗期耐盐性研究[J].湖北农业科学，2011，50(2):301-304.
　　[7] 唐玉琴,李长田,赵义涛.食用菌生产技术[M].北京:化学工业出版社，2008：114-115.
　　[8] 黄毅.食用菌栽培[M].北京:高等教育出版社，2008：50.
　　[9] 张国广,王丽霞,占凌云，等.杏鲍菇菌糠提取液对4种食用菌菌丝生长影响[J].中国食用菌,2009,28（5）:19-20,23.
　　[10] 刘莉君,姚源松,王芳.陆地棉品种抗盐细胞系筛选研究[J].新疆农业科学,2003（4）:247-249.
　　[11] 徐恒戬.作物耐盐诱变育种研究进展[J].种子，2008，27（1）:51-54.

转载注明来源:https://www.xzbu.com/8/view-51040.htm