乳胶增强透射比浊法和速率散射比浊法检测C―反应蛋白相关性分析

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　　摘要：目的 乳胶透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法检测C-反应蛋白结果的相关性分析；方法 随机收集239例住院患者，采用两种检测方法测定C-反应蛋白浓度，并比较其检测结果相关性；结果 当C-反应蛋白浓度>20mg/L（r=0.944）时乳胶透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法相关性较C-反应蛋白浓度<20mg/L好。结论 不同的方法检测CRP结果有一定的差异，需要早日完善其检测的标准化，当CRP低浓度表达时采用速率散射免疫比浊法检测更为敏感和准确。
　　关键词：C反应蛋白；相关性分析
　　C-反应蛋白（C-reaction protein，CRP）是一种急性时相反应蛋白，在发生时相反应时其变化显著、迅速，在感染疾病、动脉粥样硬化以及肿瘤等疾病中均有所表达[1]。近年来，C反应蛋白在临床预测和评估疾病的进展中得以广泛应用[2]，故CRP检测方法及其检测结果的准确性也受到越来越多的重视。目前CRP检测方法主要有单向免疫扩散法、乳胶增强透射免疫比浊法、乳胶凝集试验、速率散射法、免疫沉淀法、免疫浊度法和免疫标记测定法等。其中，乳胶增强透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法是目前认为检测有效率较高的两种方法[3]。本文就此两种检测方法作对比，探讨不同方法检测CRP的相关性。
　　1资料与方法
　　1.1一般资料 随机选取住院患者239例，其中男134例，女105例；年龄16～65岁，平均42岁。收集所有入选者清晨空腹肘静脉血分别于肝素钠抗凝管和EDTA抗凝试管中，前者分离血浆之后与EDTA抗凝全血保存于4℃冰箱，进行统一检测。
　　1.2仪器与试剂 日立7600全自动生化检测仪（日本），Radim公司delta全自动全血超敏CRP检测仪（中国上海）。乳胶增强透射比浊法检测试剂盒由上海德赛诊断系统有限公司提供，最低检测值为0.3mg/L，线性范围为0.3～350mg/L，按照配套标准品使用要求，用9g/l氯化钠溶液为空白，5个不同水平的校准液经过测定，仪器拟合标准曲线；速率散射比浊法检测试剂盒由Radim公司提供，最低检测值为0.6mg/L，高值自动稀释（稀释倍数1：1-1：64000倍），刷入每批试剂的标准曲线于仪器内，每天用质控血浆同标本一起检测，均在限值范围内。
　　1.3检测方法 按照血浆检测结果，将所有标本分为低值组（<5mg/L）85例，中值组（5-20mg/L）68例，高值组（>20mg/L）86例进行统计分析。
　　1.4统计方法 计量资料用x±s表示，采用SPSS19.0对数据进行统计分析。
　　2结果
　　两种方法对不同浓度的CRP检测比较，由表1可见，在低、中值时，全血CRP与血浆CRP相关性不如高值相关性好，相关系数分别为r=0.786、0.822、0.944。具有统计学意义，见表1。
　　表1可得：不同的方法检测CRP结果有一定的差异，需要早日完善其检测的标准化，当CRP低浓度表达时采用速率散射免疫比浊法检测更为敏感和准确，可认为两种检测方法测定CRP结果有差异。
　　3讨论
　　CRP是由肝脏细胞合成和分泌的非特异性炎症反应因子。IL-6、IL-1、TNF-a等能够调节其生成。CRP的高低与急性冠脉综合征病情的严重程度存在一定的相关性，可作为监测病情、预测冠心病严重性的常规指标之一，对观察疗效、判断预后也具有重要意义[4]，同时，血浆CRP水平与青年脑梗死患者病情的发展、预后也密切相关，是青年脑梗死的危险因素，检测其含量可判断患者脑梗死的严重程度及预后[5]。
　　乳胶增强透射免疫比浊法基本原理是将抗体吸附于乳胶颗粒上，当抗原抗体结合时，乳胶随之发生凝集反应，形成不同大小的乳胶颗粒，从而阻断光线的透射，通过透射光线的减弱程度判断乳胶凝集的程度。其具有快速、准确和简便的特点[6]。速率散射免疫比浊法是以一定波长的光沿水平轴照射，当碰到免疫复合物后将可导致光线的散射，抗原抗体复合物的形成速率与光的散射强度成正比，还能动态测定抗原抗体结合反应效率。
　　在本研究中发现，当CRP浓度小于20mg/l时，乳胶增强透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法检测C-反应蛋白相关性低，P<0.05，具有统计学意义，两种方法检测CRP结果具有显著差异。当CRP浓度大于20mg/l时，二者检测方法相关系数为0.944，说明这两种检测方法的检测效率有所提高。根据以往的文献报道及本实验室经验，我们认为当CRP低浓度表达时，乳胶增强透射免疫比浊法由于抗原抗体结合较少，乳胶凝集物形成较小，对光线的阻断能力较弱，而速率散射免疫比浊法可以通过检测抗原抗体结合速率，而不依赖于凝集物的大小来评估CRP的浓度，这也与本实验中随着CRP浓度的升高，两种检测方法的相关系数增大相吻合，所以我们认为低浓度的CRP表达，速率散射免疫比浊法较乳胶增强透射免疫比浊法更敏感和准确。
　　目前，临床应用的测定CRP方法较多，但不同检测方法之间，不同测定仪之间存在着差异，这不利于临床对该指标的有效应用。此外，实验室诊断某个体是否处于健康状态，其判断依据是指标的临界值。然而，不同的检测体系中参考值的范围不一致，这也会给临床诊断造成困难。因此，CRP测定方法标准化问题有待于医学工作者进一步的研究和探讨。美国CAP室间质评也将引入hs-CRP作为一个独立的分析调查项目，美国CDC目前正在进行hs-CRP免疫测定的标准化工作，WHO已有CRP免疫测定的国际参考标准85/506，IFCC/ BCR/ CAP已有次级标准-血浆蛋白CRM 470（CRP是其中14种项目之一，美国Dade Behring公司生产），这些都为国内外开展hs-CRP测定的标准化工作提供了条件。
　　参考文献：
　　[1]Yeh ET，Anderson HV，Pasceri V，et al.C-reactive protein：linking inflammatiom to cardiovascular complications[J].circulation，2001，104（9）：974-975.
　　[2]黄小兵，冯丽春，谭志坚.血浆CRP作为感染性标志物的临床应用与研究[J].右江民族医学院学，2002，24（2）：271-272.
　　[3]陈晓玲，兰庆平.散射比浊法与乳胶凝集法检测血浆C-反应蛋白的评价[J].上海医学检验杂志，2002，17（3）：141-145.
　　[4]周建华.老年冠心病患者与健康老年人血浆中C-反应蛋白的比较[J].分子诊断与治疗杂志，2009，1（2）：118-119.
　　[5]朱海生，王振贤，段香芬，等.超敏C-反应蛋白与青年脑梗死患者关系的探讨[J].西部医学，2012，24（2）：87-89.
　　[6]袁斌，许荣.两种定标方法检测C-反应蛋白及快速C-反应蛋白检测结果的对比和评价[J].检验医学，2005，20（4）：382-384.编辑/申磊
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