?产地、采收期及干燥方式对连翘药用成分含量的影响

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　　摘 要：为了探明不同产地和不同采收期连翘中药用成分含量的差异，采集了河北、河南和山西连翘主产区的青翘和老翘样品，检测连翘苷和连翘酯苷A这2种药用成分的含量，并在河北涉县从5月下旬至9月下旬每隔10 d采集一次青翘样品，检测自然晾晒和汽蒸烘干的不同干燥处理方法下药用成分的含量变化。结果表明：不同产地连翘药用成分含量存在明显的差异，连翘的药用成分含量排序：河北>山西>河南;青翘中药用成分含量高于老翘;采后汽蒸烘干处理较自然晾晒能够更好地保存药用成分。
　　关键词：连翘;连翘苷;连翘酯苷;产地;采收期
　　中图分类号：S685.24 文献标识码：A 文章编号：1006-060X（2020）02-0076-03
　　Abstract： In order to find out the differences in the content of traditional Chinese medicine components of forsythia from different producing areas and different harvesting periods， the samples of green fructus forsythiae and grown fructus forsythiae from Hebei， Henan and Shanxi were harvested， and the contents of phillyrin and forsythiaside A were detected， and every 10 days from late May to late September in Shexian County， Hebei Province， the samples of green fructus forsythiae were harvested for one time， and the change of the content of medicinal components under two drying methods of natural drying and steam drying was detected. The results showed that there were obvious differences in the content of medicinal components of forsythia from different places. The order of the content of medicinal components of forsythia from high to low was Hebei， Shanxi， Henan; the content of medicinal components of green fructus forsythiae was higher than that of grown fructus forsythiae; the treatment of steaming and drying after harvest was better than that of natural drying， which can better preserve the medicinal ingredients.
　　Key words： forsythia; phillyrin; forsythiaside; producing area; harvesting period
　　藥用连翘为木犀科植物连翘（Forsythia suspense （Thunb.） Vahl）的干燥果实，秋季果实初熟尚带绿色时采收，除去杂质，蒸熟，晒干，习称“青翘”;果实熟透时采收，晒干，除去杂质，习称“老翘”[1]。连翘临床应用广泛，其主要化学成分是连翘苷和连翘酯苷A（2010版《中华人民共和国药典》规定连翘苷和连翘酯苷A的含量为连翘药材的质控指标），具有清热解毒、消肿散结、疏散风热的功效，主治疮痈肿毒，瘰疬痰核，风热外感，温病初起等病症[2-3]。现代药理研究表明，连翘具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗氧化、抗衰老、保护肝脏、调节免疫功能和增强抗应激能力等作用[4-5] 。连翘主产于中国河北、河南、山西、陕西和山东等地，不同产区由于其生态条件不同，导致连翘中药用成分的含量有着较为明显的差异，此外采收标准、采收时间不同也会导致其药用成分含量变化[6-8]。试验采用高效液相色谱的检测方法对不同产地和不同时期连翘中连翘苷和连翘酯苷A的含量进行了比较，以探究其含量变化及差异;并对同一产地的青翘进行不同干燥处理方式，以确定适宜的干燥方法，更好地指导当地连翘产业的生产实践。
　　1 材料与方法
　　1.1 材 料
　　1.1.1 试验材料与处理 不同地区连翘材料分别来源于河南卢氏县、山西垣曲县、山西闻喜县、河北涉县及正定县。选择成熟度一致的样品自然晾干，粉碎，过5号筛，待用。不同时期连翘材料来源于河北涉县以岭药业有限公司连翘基地，从2018年5月25日至9月25日每隔10 d取一次样品，分成2等份，分别采用晒干和汽蒸15 min然后烘干这2种干燥方式进行处理。
　　1.1.2 主要仪器与试剂 Waters e2695 高效液相色谱仪（广东科晓科技有限公司）;超声仪（KQ3200DE型数控超声波清洗器）;FA1004N型电子分析天平（上海精密仪器仪表有限公司）;连翘苷标准品（批号wkq18012210，CAS号487-41-2）;连翘酯苷A标准品（批号wkq18012502，CAS号79916-77-1）;甲醇（色谱纯，天津科密欧有限公司）;乙醇（分析纯，北京庆凯华丰科技开发有限公司）;乙腈（色谱纯，Fisher公司）。 　　1.2 试验方法
　　1.2.1 色谱条件 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱;柱温：室温;进样量10 μL;流速：1.0 mL/min;检测波长：连翘苷的检测波长为277 nm，连翘酯苷A的检测波长为330 nm;流动相及洗脱方式：连翘苷以及连翘酯苷A的流动相为乙腈-0.4%冰醋酸溶液（体积比为15∶85）。
　　1.2.2 对照品的制备 连翘苷：取连翘苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含0.2 mg的溶液。连翘酯苷A：取连翘酯苷A对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含0.1 mg的溶液，现用现配。
　　1.2.3 供试品的制备 （1）连翘苷供试品溶液的制备。精密称定该品粉末1 g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇15 mL，称定重量，浸渍过夜，超声处理（功率250 W，频率40 kHz）25 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 mL，蒸至近干，加中性氧化铝0.5 g拌匀，加在中性氧化铝柱（100～120目，1 g，内径为1～1.5 cm）上，用70%乙醇80 mL洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣用50%甲醇溶解，转移至5 mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。（2）连翘酯苷A供试品溶液的制备。精密称定该品粉末0.5 g，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇15 mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250 W，频率40 kHz）30 min，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。每个样品测定重复3次，以平均值为测定结果。
　　2 结果与分析
　　2.1 产地对连翘药用成分含量的影响
　　检测结果表明，不同地域采集的连翘样本中药用成分含量存在明显的差异，河北产地的连翘药用成分含量较高，以涉县连翘药用成分含量最高，连翘苷含量达0.793%，连翘酯苷A含量达17.57%，其次是山西产地，较差的是河南产地;同一省份不同县域间也存在差异;青翘的总含量相差可达4.2倍，老翘的总含量相差可达7.4倍（表1）。
　　由表1可知，青翘样品中连翘苷和连翘酯苷A含量均高于2015版《中华人民共和国药典》标准（≥0.25%），老翘连翘苷含量均低于2015版《中华人民共和国药典》标准（≥0.15%）。青翘中这2种药用成分含量明显高于老翘，同一批样品中青翘的连翘苷含量比老翘最多高出12.4倍，青翘中连翘酯苷A含量比老翘最多高出41.7倍（山西垣曲县）。
　　2.2 采收期对连翘药用成分含量的影响
　　整个生长期内（5月25日—9月25日）连翘苷和连翘酯苷A含量均呈现波浪式下降趋势（图1和图2），连翘酯苷A含量在整个采摘期内均超过药典标准（≥0.25%），含量最高值出现在6月上中旬，是药典规定含量的55倍。连翘苷含量在生长后期低于药典规定含量（≥0.15%）。
　　2.3 干燥方式对连翘药用成分含量的影响
　　自然晾晒和汽蒸后烘干的干燥处理方法相比较，汽蒸处理的样品中连翘苷和连翘酯苷A的含量明显高于自然晾晒的处理方法（图1和图2），6月中旬采用汽蒸处理的样品中连翘苷含量是自然晾晒方式的13.8倍，连翘酯苷A含量是自然晾晒方式的5.9倍。说明连翘采后汽蒸烘干处理较自然晾晒处理能够更好的保存药用成分。
　　3 结论与讨论
　　（1）试验结果表明，不同产地连翘中连翘苷和连翘酯苷A含量差异较大，其含量的排序为：河北>山西>河南，分析其可能原因与地理位置、生态环境、采收时间、产地加工等条件有關[9-10]。《中华人民共和国药典》（2015年）中规定连翘干燥品连翘酯苷A含量不得少于0.25%、连翘苷含量不得少于0.15%，研究结果发现，青翘中连翘苷和连翘酯苷A含量均高于《中华人民共和国药典》标准，老翘中连翘酯苷A含量均达到药典规定，但连翘苷含量在采集时间范围内均低于药典标准，该试验结果与已有的报道[10-11]相一致，表明连翘苷含量不能单独作为连翘的一个质控指标，需要结合其他成分含量如连翘酯苷等综合评价，建立多指标成分协同效益评价体系。
　　（2）试验结果显示，青翘中的连翘酯苷A和连翘苷的含量明显高于老翘，该研究结果与曹冉冉等[11]、闫瑞等[12]多个文献结果均相似，这与传统意义上老翘的药用价值更高、临床医学应用更为广泛有所不符。因此，笔者认为有必要开展不同采收期青翘的药理学试验，探求这些活性物质所发挥的药理作用。目前连翘成分和功效之间的关系尚不很明确，仅凭药用成分含量的高低尚不能判定青翘与老翘的药用价值，还需结合相应的药效学试验进行更深入的研究，才能更科学地评价青翘的质量。
　　（3）试验比较了不同干燥方式对连翘中药用成分含量的影响，结果表明汽蒸烘干处理优于自然晾晒，该结果与马梅芳等[13]的研究结果一致，采后汽蒸处理具有杀酶保苷的作用[14]，能够更好的保存药用成分，同时更好地保存连翘的色泽和外观;自然晾晒由于所需时间较长，内含酶活性较强，降解了连翘中的有效成分，使得连翘苷和连翘酯苷A的含量低于汽蒸烘干处理，从而影响了连翘质量。
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　　（责任编辑：肖彦资）
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