林芝市两区县藏猪流行性腹泻血清学调查
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摘要：为了解西藏市猪流行性腹泻（PED）流行病学情况，采用双抗原夹心酶联免疫法（ELISA）对采集的林芝市巴宜区和米林县364份藏猪血清进行检测。结果表明：藏猪的PEDV抗体平均阳性率为39.56%，其中公猪血清抗体阳性率为40.63%，母猪血清抗体阳性率为38.37%。从性别上公猪和母猪的抗体阳性率无显著性差异（P>0.05），但巴宜区（26.37%）和米林县（52.74%）PEDV抗体阳性率存在显著性差异（P<0.05）。说明林芝部分地区藏猪流行性腹泻感染普遍，应注意防止该病的发生。
关键词：藏猪;猪流行性腹泻（PED）;ELISA
中图分类号：S858.28 文献标识码：A 文章编号：1007-273X（2019）05-0031-02
猪流行性腹泻（PED）是由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起的猪肠道发生病变的一种高度接触性传染病，可导致育肥猪和架子猪群发生急性腹泻，又被称为“流行性病毒性腹泻”。我国1980年报道过该病。目前，我国很多省（市）都发现了该病的存在，对我国的养猪业造成了极大的威胁[1，2]。藏猪是我国的特有猪种之一，更是青藏高原上独有的特色猪种，有着重要的经济价值，藏猪产业也是西藏重点发展的高原特色畜牧业之一。藏猪目前养殖方式主要是放养，但规模化养殖正在迅速扩大，导致内地生猪的主要传染病有在藏猪中流行的趋势。有关当地猪流行性腹泻流行病学还未见相关报道[3-7]。因此，本次试验对林芝市巴宜区和米林县藏猪流行性腹泻情况进行了调查，旨在为该市藏猪流行性腹泻的防控提供技术支撑。
1 材料与方法
病料采集：在2016年12月至2018年1月，在林芝市巴宜区和米林县藏猪养殖户、中小规模养殖场选取只进行过常规免疫、并未接种过流行性腹泻疫苗的藏猪，采集全血364份，编号，分离血清，置于-20 ℃冰箱，待后续使用并进一步分析。
采用商用ELISA试剂盒（厦门汇佳生物科技有限公司，201603），按厂家说明书检测PED的血清阳性率。试验有效性：阳性对照孔平均OD值≥1.00;阴性对照孔平均OD值≤0.10。临界值计算：临界值=阴性对照孔平均OD值+0.15。阴性判定：样品OD值<临界值者为猪流行性腹泻抗体（PEDV-Ab）阴性;样品OD值≥临界值者为猪流行性腹泻抗体（PEDV-Ab）阳性。
本次试验中检测结果采用SPSS 16.0对不同地区和性别流行性腹泻抗体阳性率的差异性进行统计分析，分析不同地理位置、年龄、性别PEDV的血清效价差异。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果与分析
检测结果见表1。由表1可见，该地区藏猪PEDV的抗体阳性率平均为39.56%，其中公猪抗体阳性率为40.63%，母猪抗体阳性率为38.37%，两者无显著性差异（P>0.05），表明在PEDV流行过程中性别因素的影响不大。从地区上看，巴宜区PEDV抗体阳性率为26.37%，低于平均水平，而米林县PEDV抗体阳性率则达到了52.75%，两地区间存在显著性差异（P<0.05）。
3 小结与讨论
PED是PEDV感染猪之后引起其肠道发生病变的高度接触性传染病[8]。自从该病被人们发现以来，已在我国造成了很大的影响[4]。田小艳等[9]对在广东采集的95份样本进行检测，PEDV的抗体阳性率为33.7%;杜堅等[3]对广西4个猪场中11 090头猪进行PEDV检测，发病4 658头，平均发病率为42%（4 658/11 090），死亡265头，病死率为5.69%（265/4 658），其中有些猪场发病较为严重，发病率高达72%，而发病率较低的猪场也有37.85%;张志等[10]对29个省份的7 021个猪场进行检测，在其中的4 060个猪场发现了PEDV感染，场阳性率为57.83%，并且在对从屠宰场采集的675份组织样品进行检测时发现也存在PEDV感染，其阳性率为12.75%。
本次试验中检测到林芝市巴宜区和米林县PEDV整体抗体阳性率达到了39.56%，与大多数省份相比，该地区的PEDV感染处于一个较高的水平[11-14]。其主要原因可能是基于西藏地理位置因素，地处高原，海拔高，气温低，氧含量少。夏季气候更是复杂多变。牧区经济落后，交通不便，家畜疫病防控大多由基层兽医或牧民进行简单培训来进行。此外，由于农牧民对该病的认识不足，在饲养管理中缺乏有效的措施，从而造成疾病传播，影响当地藏猪业的发展。本次试验是利用双抗原夹心酶联免疫法（ELISA）检测样品中猪流行性腹泻病毒抗体（PEDV-Ab），以期为西藏林芝市猪流行性腹泻的检测及科学、规范、合理地选用药物防治提供方法和依据，减少其对藏猪养殖的危害。
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