中药传统技能大赛显微鉴别项目培训体会

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　　[摘           要]  通过对近两年参加全国职业院校中药传统技能大赛选手中药显微鉴别项目的培训，对培训过程中遇到的问题进行总结和反思，围绕中药粉末和选手培训两方面，从粉末的准备过程、选手不同培训阶段应注意的事项等方面进行了分析总结，以期为职业院校日常的中药显微鉴别教学和相关的参赛院校提供一定的参考和借鉴作用。
　　[关    键   词]  技能大赛;中药;显微鉴别
　　[中图分类号]  R282                   [文献标志码]  A                      [文章编号]  2096-0603（2019）11-0192-02
　　 全国职业院校中药传统技能大赛自2012年起至今已举办了6届，这项大赛主要由中药性状鉴别、中药真伪鉴别、中药调剂（含审方）、中药炮制四个赛项组成，分值比例分别占总分值的20%，20%，30%，30%，属于个人赛。自2017年起，性状鉴别和真伪鉴别合并为一项，占总分值的20%，同时新增了中药显微鉴别赛项，占总分值的20%。显微鉴别是利用显微镜对药材（饮片）切片、粉末、解离组织或表面制片及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特征进行微观分析，以确定品种和质量的一种方法[1]。显微鉴别作为一项比较成熟的现代分析枝术，在中药真伪鉴别中显示了强大的生命力[2]。2015版《中国药典》中应用显微鉴别方法的中药材和中成药特别多。新增的显微鉴别赛项规程要求参赛选手在45分钟内能正确使用生物显微镜，按要求正确的将混合粉末制成装片观察，根据观察结果绘出显微特征图，并对显微特征进行正确描述，最后分析判断中药混合药粉的组成。这一赛项操作符合目前中药检验岗位显微常规操作过程和方法。因此，大赛显微鉴别赛项的增加也是考虑到了这项技术在生产实践中的应用，突出了对参赛选手综合实践能力的考核，既体现了中药技能的传承与发展理念，也符合现代医药行业对中药类专业人才岗位技能的要求。这一赛项的增加同时也对参赛选手提出了更高的要求，选手也将面临更大挑战。笔者这两年主要负责对我院参赛选手中药显微鉴别赛项的培训，现对培训过程中遇到的问题进行总结和反思，主要从注意事项和培训方法上对中药粉末、选手培训两方面进行阐述，希望通过技能大赛培训的总结与反思，能够对医药高职院校中药鉴定技术这门课程的日常显微教学提供一定的参考或借鉴作用。
　　 一、关于中药粉末
　　 （一）确保中药材基源的准确
　　 要保证显微鉴定结果的准确性，首先要保证原药材基源的正确性。现在中药市场上出现了很多与正品相似的混淆品或伪品，如水半夏冒充半夏、欧当归充当归、大黃中混有土大黄等，由于这些药外形相似，不易分辨，很容易在商品交易市场中把混淆品当成正品或混在正品中出售，如果把这类药材做培训材料，将产生误导作用。例如，正品当归在显微中会看到韧皮薄壁细胞、导管和油室、木栓细胞、淀粉粒以及偶可见的木纤维，而伪品欧当归粉末中除了有上述特征外，还可见草酸钙方晶[3]。伪品的这一特征会增加判断的难度。另外还需注意区分栽培药材和野生药材，由于生长环境和生长年限不同，往往导致药材显微特征发生改变。例如，金银花粉末中的鉴别特征之一是花粉粒具有3孔沟，但是采用多倍体育种技术培育出的四倍体金银花新品种—九丰一号，其花粉粒具有4个萌发孔[2]。
　　 （二）保证中药材粉碎前的纯度
　　 在中药材打粉之前，必须要进行净选，以保证中药材纯度。中药材在采收过程中，不可避免地会带入一些杂质，比如果实类的补骨脂中往往易混入果梗，需要挑出此类非药用部位;又如牡丹皮用的是根皮，但现在市场上的牡丹皮往往带有大量的木心（木质部），如果不除去此类非药用部位，可能就会在显微镜下观察到不属于牡丹皮显微特征的导管而引起误判。
　　 （三）保证正确的中药打粉方法
　　 按2015版《中国药典》四部通则2001显微鉴别法规定，用于显微鉴别的中药粉末须过四号筛（筛孔内径250μm±9.9μm）或五号筛（筛孔内径180μm±7.6μm）[1]。因此，为了尽量保证中药粉末显微特征的完整性和观察适宜性，在选择利用台式高速粉碎机打粉时要注意粉碎时间和强度的把握以及筛号的选择。通常质地轻的花叶类和干燥的果实种子类药材打粉时间宜设定的短些;而质地坚硬的根类和纤维性多的药材，打粉设定时间宜稍长些。如番泻叶和金银花粉末的一个突出显微特征是单细胞的非腺毛，如果把粉碎时间设定稍长，粉末会被打得很细，将长达90～350μm的非腺毛打碎，实际观察时很难发现完整的非腺毛，这对结果的顺利判断显然不利，所以设定时间宜短，且需要及时倾倒出来过四号筛，而当归、五味子含油脂丰富的药材不易打碎成均匀的粉末，宜多次设定打粉时间并反复过筛，直至全部粉碎成规定的细度。
　　 （四）确保打粉机的干净
　　 中药打粉除了以上注意事项外，还要注意每打完一味药后，打粉机必须清洗干净，包括螺丝夹缝中都要用不绣钢针剔除干净，如果不注意这些细节，很可能上一味残留的药粉就混串到了下一味药粉中从而影响实际观察和判断。另外，打好的中药粉末装在瓶子里，不仅要在瓶身上贴好药名标签，而且连瓶盖上也要贴上药名标签才行。因为这样做可以防止在开盖取粉制片后发生“张冠李戴”的情况，有效避免药粉互混的风险。
　　 二、关于选手培训
　　 （一）培训初期
　　 在培训初期，指导老师先要按照国家技能竞赛显微赛项的规程将30味中药粉末的显微资料编辑成册发给选手，让选手提前熟悉并背诵相应的内容。对选手进行必要理论知识的讲解、示教并指导显微镜的操作方法、粉末临时装片的制作方法（包括水装片、水合氯醛加热透化片和水合氯醛不加热片），之后对30味竞赛范围内的中药粉末进行逐一的显微观察，指导参赛选手寻找并认识显微镜下每味药的显微特征。培训初期，一定要对选手进行严格要求，按规范的程序进行操作，不能触碰任何赛项规程上的扣分点，比如显微镜低倍镜和高倍镜的正确使用和切换、制作水合氯醛透化片时注意不要烤焦烧糊、显微镜下寻找目标物时以“之”字走向进行玻片的移动观察、显微观察结束后要及时清场、整理桌面等，以此培养选手良好的习惯，养成按赛项规程进行操作的好习惯。最后，在制作每味药的显微装片之前，要让选手多观其颜色、闻其气味，加深对每味中药的熟悉与理解程度。这一阶段是选手最困难也是指导老师最辛苦的阶段，需要多花时间和精力进行培训指导。 　　 （二）培训中期
　　 在经过初期的培训学习后，选手对每味药的显微特征和显微镜下各味药的组织、细胞及内含物已经有了一定的认识，因此培训中期可以模拟竞赛时的两两混合粉末来进行观察并在模拟试卷上作答，指导老师认真评阅试卷，对学生的显微描述和绘图给予评价与指导。这一阶段对不同中药粉末中所具有的相同的组织特征进行归纳对比是非常重要的。例如，石细胞类，黄连、黄芩、白术、天花粉、肉桂、厚朴、黄柏、五味子、槟榔等均含有石细胞，但各有特点，所以需要从颜色、形态、壁的特征以及排列集散程度等方面综合比较，再结合其他特征来加以判断。比如，黄连、黄芩、黄柏的石细胞是鲜黄色或淡黄色的;肉桂的石细胞是三面增厚，一面菲薄的;厚朴的石细胞则多呈分枝状;五味子的石细胞则多密集成群。再比如，花粉粒类，丁香、洋金花、金银花、红花都含有花粉粒，然而丁香花粉粒极面观三角形;洋金花花粉粒类球形、表面有条状雕纹;金银花花粉粒类圆形、表面具细密的短刺;红花花粉粒类圆形，具有3个萌发孔，外壁有齿状突起等。所以在显微绘图时，一定要注意将这些区别于其他药的突出特征绘出来，避免在绘图准确性上丢分。
　　 经过这一阶段的培训学习，选手已具备一定的理论知识和操作技能了，但对显微绘图其实仍处于“知其然而不知其所以然”的状态，只是按照资料图片进行“依葫芦画瓢式”的显微绘制，因而画出来的显微图会感觉牵强附会，比较别扭，但是如果此时指导老师再把相应的一些细胞、组织、内含物的形成演化过程给选手讲一讲，在捋清结构的来龙去脉后，选手不仅容易记住特征，而且绘出来的图也更能精准地体现粉末的本质特征。比如石细胞，在给选手讲解了纹孔和纹孔沟的形成过程后，选手明白了为什么要在石细胞的胞腔中间绘上小圆点。因此，这一阶段的理论学习将明显有助于选手绘图水平的迅速提高。
　　 （三）培训后期
　　 经过前期的基础培训、中期的提高培训后，选手们对每味中药粉末基本上可以说是相当熟悉了。因此，这一阶段主要是选手对显微内容的进一步巩固和查漏补缺阶段了，选手可根据自身掌握情况，自由安排显微培训内容。或重点攻克一般很难观察到而又具有专属性的具有鉴别意义的显微特征，或加强对显微绘图技巧的训练，如绘图线条的粗细、绘图整体的流畅性与美观性，尤其是不同中药粉末中相同组织特征的绘图区别点。比如人参和大黄粉末中均含有草酸钙簇晶，但二者的晶形有差异，人参簇晶直径20～68μm，棱角锐尖;大黄簇晶直径20～160μm，有的达190μm，棱角大多短钝。那么在绘图时就要注意体现这两种簇晶在大小和晶形上的区别，人参的簇晶宜绘的小些且棱角尖锐些，而大黄的簇晶宜绘的大些且棱角要短钝些。
　　 三、其他方面
　　 技能竞赛不仅考核选手对知识技能的掌握能力，同时也是对学生心理素质和临场应变能力的挑战。因此培训过程中也需要适当给予选手心理素质方面的锻炼。如在中期训练一段时间后可进行仿真的模拟考核，多安排几位老师当裁判在现场进行监考;平常训练时可偶尔有一两次在混合粉末中再掺入一味非竞赛范围内的中药粉末作为干扰，以此来训练选手对正式赛场的适应能力和对超出常规情况时的即时处理能力。另外也要提醒选手注意劳逸结合，不要长时间对着显微镜的目镜观察，否则，很容易导致双眼干涩疲劳而引发不适。另外还有一个要注意的是竞赛范围内的两味全草类中药：薄荷与穿心莲。按《中国药典》规定这两种药材都是在茎叶茂盛时期采收地上部分，并且规定了含叶不得少于30%。但现在市场上的薄荷和穿心莲药材基本上都是用的地上部分的茎，含叶很少，而这两味药的显微特征又是以叶作为主要观察对象进行描述的，显微镜下很难观察到腺鳞或小腺毛等这类具有鉴别意义的特征。因此，对于这两味中药在打粉前除了要剔除外来杂质外，还需要尽量挑选出带有叶的茎和叶作为粉碎对象，这样才能保证显微镜下可观察到两味药应有的专属性鉴别特征。
　　 總之，全国的中药技能大赛不仅是检验全国中医药职业院校专业建设和教学改革的成果，同时也是引领和促进职业院校进行中药专业教学改革，促进中药技能的传承与创新。因此，在显微项目培训过程中，需要指导老师多观察、多思考、勤总结，真正发挥职业院校技能大赛以赛促教，以教促学，达到共同学习、交流、提高的目的。
　　 参考文献：
　　 [1]毛雯雯，万晓婧，刘惠娟，等.显微鉴定在中药质量标准中的应用及进展[J].世界科学技术（中医药现代化），2014，16（03）：538-542.
　　 [2]国家药典委员会.中华人民共和国药典2015版一部[S].北京：中国医药科技出版社，2015.
　　 [3]阎文玟.中药材真伪鉴定[M].北京：人民卫生出版社.1994.
　　编辑 赵瑞峰
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