索骨丹提取工艺及抗氧化活性研究进展

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　　【摘 要】索骨丹具有岩白菜素、蒽醌、黄酮、儿茶素等多种药理活性成分，对止血、抗病毒、抗炎、甲状腺肿、抗氧化等均有较好的药理作用，具有较高的临床意义。本文主要以相关研究的中外文献为基础，对索骨丹的岩白菜素、总蒽醌、脂肪酸、酚类的提取工艺和抗氧化活性进行总结，为相关的研究人员提供一定的参照。
　　【关键词】索骨丹;提取工艺;抗氧化活性
　　中图分类号： TQ461 文献标识码： A 文章编号： 2095-2457（2019）10-0188-002
　　DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457.2019.10.081
　　Research Progress on Extraction Process and Anti-oxidation Activity of Rodgersia aesculifolia
　　DENG Pei-ying ZHANG Yun* YANG Qian-qian ZHOU Dan WANG Xi-yu LIU Fei
　　（School of Pharmacy，Xi’an Medical University，Xi’an Shaanxi 710021，China）
　　【Abstract】Rodgersia aesculifolia has a variety of pharmacological active components，such as bergenin，anthraquinone， flavonoids，catechin and so on.It has good pharmacological effects on hemostasis，antivirus，anti-inflammation，goiter，anti-oxidation.and has high clinical significance.In this paper，the extraction technology and antioxidant activity of bergenin， total anthraquinone，fatty acid and phenols were summarized on the basis of related literatures at China and foreign countries，so as to provide some references for related researchers.
　　【Key words】Rodgersia aesculifolia;Extraction;Anti-oxidation
　　1 索骨丹简介
　　索骨丹为虎耳草科鬼灯檗属多年生草本植物，又名慕荷，鬼灯檗，黄药子（陕西）等，现分布于陕西、甘肃、宁夏、四川等多省区。其根莖粗壮，横生，通常以其根茎入药。性平，味苦涩，具有凉血止血，消肿解毒以及广谱抗病毒的功能。临床上在治疗甲状腺，咽喉肿痛，外伤出血，子宫脱垂，腹泻，痢疾等病症均有较好的疗效[1]。其化学成分有岩白菜素、蒽醌、脂肪酸、酚类、黄酮、儿茶素等[2]，目前，现研究报道多是针对索骨丹的抗炎活性及其化学成分，而关于索骨丹的抗氧化活性研究相对较少，故本文主要针对索骨丹的提取纯化工艺和抗氧化活性进行如下综述。
　　2 索骨丹的提取工艺
　　2.1 岩白菜素的提取工艺
　　2.1.1 高效液相色谱法
　　胥道宝等[3]通过高效液相色谱法来测定索骨丹根中岩白菜素的含量，色谱柱：Kromasil ODS C18柱（250×4.6mm，5μm），流动相为甲醇：水（20：80），流速1.0mL/min，检测波长为275nm，柱温为室温。在此色谱条件下，岩白菜素的分离效果较好，回收率达98.4%。沈舒文等[4]同样也建立HPLC法来测定索骨丹胶囊中岩白菜素的含量，但其色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱色谱柱（5μm，4.6×150mm），流动相甲醇：水=17：83，实验结果显示岩白菜素在0.48～2.88μg时，与所呈现的峰面积具有良好的线性关系，使得平均回收率达到98.4%。前者在实验中提取溶剂采用80%甲醇，提取较为完全且杂峰较少，使得实验更加可靠准确。而后者具有操作简单，稳定性良好，重现性较高，空白阴性无干扰等特点。
　　2.1.2 超声法（辅助乙醇）
　　王晓梅等[5]利用超声对索骨丹中岩白菜素进行提取，考虑乙醇浓度，提取时间，温度和料液比4个因素对岩白菜素提取率的影响，其中以提取温度对岩白菜素提取产率影响最为显著，最佳提取条件为50%乙醇，提取温度60℃，料液比1：14（g/mL），提取时间50min，提取率为12.78mg/g。
　　2.2 总蒽醌的提取工艺
　　王晓梅等[6]利用超声波辅助法来提取索骨丹中的总蒽醌，乙醇溶液作为提取溶剂，并对乙醇浓度，提取温度，时间，料液比进行探究，得到较佳提取工艺：60%乙醇，温度40℃，提取时间20min，料液比1：16，提取2次，总蒽醌得率1.85mg/g。在研究索骨丹总蒽醌和鞣质对细胞因子的影响[7]时，利用超声波辅助法对总蒽醌和鞣质分别进行提取，以80%乙醇，温度45℃，提取时间30min，料液比1：10的条件提取两次得到总蒽醌，以95%乙醇，温度50℃，提取时间40min，料液比1：20的条件提取两次得鞣质。
　　2.3 脂肪酸的提取工艺
　　张辰露等[8]采用乙醚索氏抽提法，以10g索骨丹原材料在索氏提取器中利用无水乙醚，回流萃取6h，并浓缩干燥至恒重，从中药材索骨丹中得到脂肪油0.1686g，得出索骨丹中脂肪酸含量为1.686%。
　　2.4 酚类的提取工艺
　　孙婷等[9]利用微波提取法对索骨丹中的总酚进行提取，探讨乙醇提取浓度，超声波提取功率，料液比和提取时间对索骨丹总酚提取率的影响，得到最佳提取工艺为提取功率600W、乙醇50%、提取时间6min、料液比 1∶30，提取率为8.61%。闵红等[10]在单因素实验的基础上用正交试验进行多酚类化合物提取工艺的优选，从而得到较佳的提取工艺：60%甲醇中性溶液，料液比1：10，连续回流提取3次，每次30min。经研究表明，该条件下提取率最高，总多酚含量可达28.32%，提取率可达98%以上。 　　3 抗氧化活性研究
　　闫梦茹等[12]通过DPPH自由基清除实验发现，索骨丹乙醇提取物的石油醚相粗提物、乙酸乙酯相粗提物及甲醇相粗提物均表现出一定的抗氧化活性。与阳性对照Vc相比，乙酸乙酯相和甲醇相表现的抗氧化作用较明显。经结构鉴定表明具有抗氧化活性的化合物为没食子酸、儿茶素、异槲皮素苷。通过测试不同浓度没食子酸、儿茶素、和异槲皮素苷三种化合物对DPPH自由基的清除率，结合IC50值来判断其抗氧化活性，3个化合物的抗氧化强度分别为：没食子酸>儿茶素>异槲皮素苷。
　　王晓梅等[13]通过索骨丹还原力的测定实验得出索骨丹三种溶剂的提取物均具有较强的还原能力，还原力均随着浓度的增加而增强，其中醋酸乙酯提取物的还原力最强，水提取物次之，乙醇提取物最弱;通过索骨丹提取物对亚铁离子的螯合能力测定，得出醋酸乙酯提取物和水提物螯合能力接近，乙醇提取物在浓度大于1.2mg/ml后，随浓度的增大螯合能力迅速增强。当浓度为1.8mg/ml时，螯合率达75%。通过探讨索骨丹提取物的抗氧化作用及体外对乳腺癌细胞生长的影响[14]、自氧化方法测定索骨丹提取物对超氧阴离子的清除能力以及用MTT法测定索骨丹对乳腺癌细胞的影响系列实验得出结论：索骨丹水提取物、索骨丹鞣质及蔥醌在浓度0.5～3.0mg/mL范围内对超氧阴离子的抑制作用随浓度的增加而增强;索骨丹乙酸乙酯提取物对乳腺癌细胞的生长在经过48h和72h作用后最大抑制率可达57.9%和67.7%。结果表明，索骨丹提取物具有强的抗氧化活性并对乳腺癌细胞的生长繁殖有较强的抑制作用。
　　4 结语
　　索骨丹是我国传统中药，其化学成分岩白菜素、蒽醌、没食子酸、黄酮、儿茶素等，有较强的抗氧化活性，毒性反应少，药用价值高，具有广泛的开发前景。虽黄酮类，儿茶素具有多种生物活性，临床上已用于治疗多种疾病，但仍需优化提取工艺，提高提取速率。由于体内氧化活性的研究还尚不够深入，值得科研人员和医药工作者对其进行更加合理的开采和深入的探究，为能在临床上进一步发挥作用提供强有力的理论基础，使未来索骨丹可以更加广泛地应用于疾病的治疗。
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