木瓜活性成分提取工艺研究进展

来源:用户上传      作者: 肖硕,丁卓伶

　　摘要：木瓜为中国道地药材，内含黄酮、鞣质、多糖等药理成分，药效多样，然而其成分复杂、理化性质不稳定，导致药理成分的提取工艺不易掌握，就其活性成分的提取工艺研究进展展开综述，为后续的研究及应用提供参考。
　　关键词：木瓜；道地药材；活性成分；提取工艺
　　中图分类号：ＴＱ９１４ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）05－0877-02
　　
　　Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ on ｔｈｅ Ｅｘａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｐａｐａｙａ Ａｃｔｉｖｅ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ
　　
　　ＸＩＡＯ Ｓｈｕｏ，ＤＩＮＧ Ｚｈｕｏ－ｌｉｎｇ
　　（Ｔｈｅ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｊｉｎｇｚｈｏｕ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｔｏｎｇｊｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｈｏｏｌ，Ｈｕａｚｈｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｊｉｎｇｚｈｏｕ ４３４０２０，Ｈｕｂｅｉ，Ｃｈｉｎａ）
　　
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｐａｐａｙａ ｉｓ a ｇｅｎｕｉｎｅ Chinese ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｃｏｎｔａｉｎing ｆｌａｖｏｎｅ， ｔａｎｎｉｎ， ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｅｆｆｉｃａｃｉｅｓ． However， ｔｈｅ ｅｘａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ waｓ ｎｏｔ ｅａｓｙ ｔｏ ｍａｓｔｅｒ ｂｅｃａｕｓｅ ｉｔｓ ｃｏｍｐｌｅｘ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｕｎｓｔａｂｌｅ ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｙ． Ｔｈｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｆ papaya ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ was summarized to provide reference for further ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ．
　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｐａｐａｙａ； ｇｅｎｕｉｎｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ； ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ； ｅｘａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ
　　
　　木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠［Ｃｈａｅｎｏｍｅｌｅｓ ｓｐｅｃｉｏｓａ（Ｓｗｅｅｔ）Ｎａｋａｉ］的干燥近成熟果实，２００３年就被国家卫生部首批认定为药食同源品种之一［１］，其中皱皮木瓜是药用木瓜的正品，主产于安徽、湖北、浙江、四川等地。木瓜作为一种常用中药，味酸、温，归肝、脾经，有平肝舒筋、和胃化湿之功效，临床常用于湿痹拘挛、腰膝关节酸重疼痛、吐泻转筋、脚气水肿等病症的治疗［２］。木瓜中含有多种有效药理成分，主要有黄酮类、鞣质、三萜皂苷类、有机酸类、多糖、过氧化物酶等，不仅其水提物可用于临床治疗，有效成分如黄酮（总黄酮）、三萜皂苷（总皂苷）、鞣质、有机酸等更作为多种药物的复方制剂成分之一［３］。为了更好地研究木瓜中各种有效成分的合理应用，对木瓜中有效成分的最佳提取工艺进行研究是相当必要的，其对后续的含量测定、作用机制及药理作用的研究等都有重要意义。本研究对木瓜中包括总黄酮、鞣质、皂苷等有效成分的多种提取工艺展开综述，以期为后续的工作奠定基础。
　　１ 木瓜中黄酮提取工艺的研究
　　黄酮是木瓜中有效药物成分之一，黄酮类化合物具有多种生物活性，有抗溃疡、抗过敏、抗菌、抗炎、抗氧化、抗衰老、降血脂、治疗心脑血管疾病、活血化瘀等功能［４］。随着研究方法的不断更新和提高，新的黄酮类化合物不断被发现，出现了许多新的应用，尤其在抗自由基和抗癌、防癌上的应用意义重大。
　　传统的木瓜总黄酮提取工艺有回流提取、超声提取［５］、微波提取３种常用方法。回流提取将原料用８０％的乙醇或乙酸乙酯［６］在９０ ℃回流２ ｈ后，将提取液在旋转蒸发仪上浓缩，加５％亚硝酸钠放置６ ｍｉｎ，再加４％的氢氧化钠，最后定容于容量瓶中。超声提取则用９５％的乙醇在９０ ℃超声回流３０ ｍｉｎ，提取液在旋转蒸发仪上浓缩，加５％亚硝酸钠放置６ ｍｉｎ，再加１０％硝酸铝放置６ ｍｉｎ，最后加４％氢氧化钠后定容。微波提取步骤是：将原料加入８０％乙醇，１２０ ℃提取２０ ｍｉｎ，在旋转蒸发仪上浓缩后加５％亚硫酸钠放置６ ｍｉｎ再加入１０％硝酸铝，放置６ ｍｉｎ后加入４％氢氧化钠，最后加水定容。３种方法提取木瓜中总黄酮的回收率均可超过９5％，且杂质都较少，研究者可根据自身实验及试剂条件选择有效的提取方法［７］。宋亚玲等［８］将木瓜果实先粉碎，９５％乙醇回流提取后，将提取液减压浓缩成浸膏，加水悬浮后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取，减压浓缩得各部分提取物，经过分离得到总黄酮的各种有效成分；严睿文等［９］分别用乙醇回流、超声提取与微波提取后，测定回收率发现，用微波提取法处理２０ ｍｉｎ回收率最高，可达到９７．７％，平均水平在９５．０％～９８．０％，其原理可能是因为微波能直接辐射能量到反应物上，使其分子产生旋转和碰撞，迅速提高温度，且无温度梯度加热，促进试剂与样品更有效地接触，因此为最好的处理样品法，且处理时间２０ ｍｉｎ比较适宜。
　　２ 木瓜中鞣质的提取工艺研究
　　人们对木瓜中鞣质的研究取得重大进展，除发现其有抗菌、抗炎、止血等药理活性外，还有抗突变、抗脂质过氧化、清除自由基、抗肿瘤与抗艾滋病等多种药理活性，甚至在抗肿瘤治疗中显示出了诱人的前景。木瓜中所含鞣质为缩合鞣质，含有较多的邻位酚羟基结构，具有很强的还原性，在生物体内表现出清除自由基、抗炎、抗变态反应等作用，极易被氧化、脱水，缩合为不溶于水的“鞣酐”沉淀。因此，在制备提取鞣质有效成分时应避免光照、高温处理，从而保证其稳定性。目前，公认的提取木瓜中鞣质的最佳方法是超声提取法［１０］。将木瓜粉末精密称定后置于棕色容量瓶中，加水放置过夜后用超声处理１０ ｍｉｎ左右，放冷，水稀释至刻度，均匀混合，静置使其沉淀，过滤，弃初滤液，精密量取滤液后至新的棕色容量瓶中水稀释至刻度摇匀即可。也有研究根据木瓜鞣质溶于水不溶于乙醚的理化特性，将木瓜粉末首先加石油乙醚超声后弃去石油醚液，再加乙醇超声，过滤，蒸干滤液后用水溶解残渣，用乙酸乙酯萃取２次后合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇溶解后离心即得上清液为提取物［１１］。以上２种方法的应用均比较多，研究者将上述提取物做含量测定发现提取率都较高。
　　３ 木瓜中三萜皂苷类的提取工艺研究
　　木瓜中的三萜皂苷以齐墩果酸、熊果酸等为主，现代药理学研究证明其中齐墩果酸具有护肝降酶、抗炎、促免疫等多重功效；熊果酸有美容护肤、抗炎等多重功效，二者已成功地被分离、鉴定出来。早期，郭学敏等［１２］采用乙醇提取，硅胶Ｈ柱色谱法，从木瓜中分离得到齐墩果酸（Ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ）１７３、乙酰熊果酸（３－Ｏ－ａcｅｔｙｌ ｕｒｓｏｌｉｃ ａｃｉｄ）、３－Ｏ－乙酰坡模醇酸（３－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ ｐｏｍｏｌｉｃ ａｃｉｄ）和桦木酸（Ｂｅｔｕｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）。近年来的提取工艺更为完善，可以得到并分离出纯度更高的齐墩果酸与熊果酸，研究多根据它们的理化特性采用最优的方法提取，木瓜总皂苷可溶于水和乙醇，然而木瓜中所含多糖类成分较丰富，故不宜采用水与低浓度乙醇为提取剂，因此二者的提取多用７０％左右的乙醇为宜，然而冯华等［１３］提取熊果酸时用１００％的乙醇２５ ｍL提取３０ ｍｉｎ后，用ＨＰＬＣ法测定熊果酸含量为０．３２４％，以此确定该方法为最佳提取熊果酸的方法，也为木瓜中熊果酸的提取和利用提供了科学依据。

　　一般用正交法对木瓜的提取工艺进行研究，在单因素实验基础上采用Ｌ９（３４）正交试验考察包括提取时间、温度、料液比、原料粒度对提取率的影响，最后用ＨＰＬＣ法测定了二者的含量，以确定最优提取工艺。其中，齐墩果酸的最佳提取工艺参数如下：９５％乙醇、温度为６０ ℃、时间３ ｈ、料液比为１∶８，原料粒度为４０目，提取２次；熊果酸的提取工艺参数如下：９５％乙醇、温度为６０ ℃、时间３ ｈ、料液比为１∶６，原料粒度为６０目，提取２次［１４］。
　　４ 讨论与展望
　　木瓜作为传统的中药材与新型的美容佳品，其药用与食用价值的发掘日趋完善。然而，作为药用植物，选择适当的药理成分尤其重要。怎样选择最佳提取工艺提取特定的靶点成分一直是药学研究者们研究的重点之一。本研究仅就近年来木瓜中几种主要药理成分的提取工艺做了简单的阐述，随着分子生物学和生物技术的快速发展，更好、更先进的技术正用于传统中药材的研究中，更优化的提取工艺还有待研究，对后续的药学研究工作将产生重要作用。
　　参考文献：
　　［１］ 何银生，廖朝林，郭汉玖，等．皱皮木瓜前景美好［Ｊ］．中国现代中药，２００８，１０（９）：４６－４７．
　　［２］ 陈小刚．常用中草药临床新用［Ｍ］．广州：广东科技出版社，２００５． ６９．
　　［３］ 韩立敏．木瓜有效成分的研究［Ｊ］．安徽农业科学，２００９，３７（２３）：１０９６９－１０９７０．
　　［４］ ＳＵＮ Ｌ Ａ， ＨＯＮＧ Ｙ Ｆ． Ｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ ｏｆ Ｃｈａｅｎｏｍｅｌｅｓ ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｔｈｏｕｉｎ）Ｋｏｅｈｎｅ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０００，９（１）：６－９．
　　［５］ 黄锁义，刘海花，黎海妮，等． 超声波提取木瓜叶总黄酮及其鉴别［Ｊ］．时珍国医国药，２００６，1７（1０）：Ｉ０００１－Ｉ０００２．
　　［６］ 常楚瑞．乙酸乙酯回流法提取木瓜总黄酮及含量测定［Ｊ］．贵阳医学院学报，２００１，２６（４）：３２６－３２７．
　　［７］ 薛 梅，黄国强，陈宏伟．木瓜中总黄酮的提取及含量测定［Ｊ］．淮海医药，２００４．２２（２）：１５６－１５６．
　　［８］ 宋亚玲，封智兵，程永现，等．木瓜化学成分的研究［Ｊ］．西北植物学报，２００７，２７（４）：８３１－８３３．
　　［９］ 严睿文，丁 毅．宣木瓜中黄酮的提取分离及含量的测定［Ｊ］．生物学杂志，２００８，２５（３）：６２－６４．
　　［１０］ 吴 冰，王成永．木瓜中鞣质的含量测定［Ｊ］．中医药临床杂志，２００８，２０（２）：１９０－１９１．
　　［１１］ 江茶龙，谢晓梅，张 玲，等．木瓜中有机酸和鞣质类成分的薄层色谱鉴别［Ｊ］．安徽中医学院学报，２０１０，２９（１）：５８－６０．
　　［１２］ 郭学敏．章 玲，全山丛，等． 皱皮木瓜中三萜化合物的分离鉴定［Ｊ］．中国中药杂志，１９９８，２３（９）：５４６－５４７．
　　［１３］ 冯 华，令狐昌敏，王祥培，等．木瓜中熊果酸提取工艺的优化及含量测定［Ｊ］．安徽农业科学，２０１１，３９（１０）：５７６３－５７６４．
　　［１４］ 王志芳，汪芳安，彭光华，等．木瓜中齐墩果酸和熊果酸提取工艺的研究［Ｊ］．食品科技，２００６，３１（７）：１３４－１３７．

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