黑果腺肋花楸组培育苗技术

来源:用户上传      作者:

　　摘要    本文对黑果腺肋花楸组培育苗关键技术进行了介绍，包括所需仪器设备及试剂耗材、培养环境及培养基配方、外植体灭菌及诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗、移栽和栽后管理等方面内容，以期为黑果腺肋花楸组培工厂化育苗提供技术参考。
　　关键词    黑果腺肋花楸;组培;工厂化育苗
　　中图分类号    S793        文献标识码    B
　　文章编号   1007-5739（2020）04-0132-02                                                                                     开放科学（资源服务）标识码（OSID）
　　黑果腺肋花楸（Aronia melanocarpa Michx Ell.）是蔷薇科腺肋花楸属的一种多年生落叶灌木，北美、欧洲均有分布，我国于20世纪90年代初开始引进。黑果腺肋花楸果实中含有大量的多酚类物质以及多种矿质元素等，具抗氧化、抗衰老等特殊应用价值，果实深加工产品对高血压及心脑血管疾病都具有特殊疗效。秋季黑果腺肋花楸的枝叶变为紫红色，极具观赏价值。因此，黑果腺肋花楸是集食用、药用、观赏于一身的经济林树种[1]。2012年，建平县杨树岭乡林业站自辽宁省干旱地区造林研究所引种该树种，通过多年研究，已经成功建立起稳定的组培工厂化育苗技术体系，现介绍如下。
　　1    所需材料及设备
　　所需仪器设备：电子天平（0.01 mg、0.001 mg）、酸度计、移液器、冰箱、高压灭菌锅、超净工作台、紫外灭菌灯、照度计、镊子、手术刀、酒精灯、培养架、程控器及照明灯管等[2]。
　　所需化学试剂及耗材：升汞、酒精（75%、95%）、MS培养基原液、6-BA、NAA、IBA、白糖、琼脂、盐酸、氢氧化钠、医用乳胶手套、烧杯、量筒、容量瓶。
　　2    培养条件
　　在培养室内进行外植体的腋芽诱导、增殖培养和生根培养。诱导培养基配方为MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.2 mg/L+琼脂8 g/L+蔗糖35 g/L。增殖培养基配方为MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+琼脂8 g/L+蔗糖35 g/L，增殖倍数最高可达到5.56倍。生根培养基配方为1/2MS+IBA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+琼脂8 g/L+蔗糖35 g/L，平均生根率可达95%。
　　上述所有培养基pH值均为5.6～5.7，培养室环境温度设定为（26±1）℃，培养架上光照度控制在1 600～2 200 lx之间，光照时间一般设定为15～16 h/d。
　　3    培养过程
　　3.1    外植体诱导培养
　　选择晴天的午后，剪取健康的一年生新梢，在室内剪去叶片后用洗涤灵水轻轻刷洗枝条表面，然后切成3 cm左右的带腋芽小段，再用流水冲洗约8 h，然后在无菌室的超净工作台上用75%酒精浸泡20 s，无菌水冲洗2遍，再用0.1%升汞溶液浸泡6 min，最后用无菌水冲洗干净[3]。从消毒处理后的茎段上，用手术刀小心地切下腋芽接种在诱导培养基上，一般2周后开始萌发，30 d后芽长到2～4 cm高时即可转接到增殖培养基上。
　　3.2    增殖培养
　　挑选无污染、无玻璃化及褐化、苗高超过2 cm的健康无菌苗，如果是丛生苗则从基部切开，分成单株苗接种到增殖培养基上，培养30～40 d后，即可长出2～4 cm高的丛生芽3～7个。此后重复前述步骤循环增殖培养，组培苗将以几何级数递增。增殖培养期间要注意观察，如发现组培苗有玻璃化现象，则应降低培养温度、增加光照时间和强度，也可增加培养基中琼脂浓度。如发现褐化现象，可考虑缩短培养周期，在培养基中添加抗坏血酸或活性炭处理。
　　3.3    生根培养
　　选择2 cm以上的丛生芽，切下健康单株转到生根培养基上，培养15 d左右即有新根长出，30～40 d后每株苗可生根2～4条，根长超过2 cm，苗高超过3 cm即可出苗移栽。需注意生根培养阶段时间不可太长，否则根系过长，移栽时容易扯断或窝根，导致移栽成活率下降。
　　3.4    移栽炼苗
　　3.4.1    设施条件。根据辽西地区气候特点，炼苗一般于6月中旬至7月中旬进行。组培瓶苗首先在塑料大棚中日光鍛炼7～10 d，然后在塑料大棚内搭建塑料拱棚（高50 cm、宽1.2 m），将组培苗移栽到塑料拱棚内的营养钵上。塑料大棚上盖双层50%透光率的遮荫网用于控制光照强度，在小拱棚外不定时喷雾降温。营养钵内先装基质，先用草炭土、尾矿砂、熟表土按4∶54∶1的比例搅拌混匀，搅拌过程中喷洒0.2%杀毒矾水溶液消毒，搅拌完成后覆膜堆沤，3 d后即可装营养钵。营养钵规格为7 cm×11 cm，过小影响组培苗后期生长，过大则浪费空间[4-5]。
　　3.4.2    组培苗日光锻炼。在塑料大棚的地面上均匀摆放组培瓶苗，为利于透光，瓶与瓶之间留出空隙。利用遮荫网控制棚内光照强度，初期双层遮荫网，后期逐步过渡到单层遮荫网，按照循序渐进原则逐渐增加自然光照。经过7 d左右的开瓶炼苗，苗上部叶片变厚，下部2～3片叶脱落或萎缩，叶表面近革质，茎变为红褐色，韧性增强。 　　3.4.3    移栽。移栽對确保成活率有重要意义。先用塑料镊子将组培苗从培养瓶中取出，小心洗净培养基，清洗过程中注意不要折断根系，然后在0.1%多菌灵溶液中浸泡3～5 s，最后用镊子夹着组培苗栽入营养钵中，注意不要折损幼苗。为防止组培苗基部漏风，应注意压实基质。苗床栽好后，需尽快喷水并搭好小拱棚，防止组培苗失水萎蔫[6]。
　　3.4.4    养护管理。移栽完成后，每隔3 d用0.1%多菌灵水溶液或0.1%甲基托布津交替喷施1次，防止立枯病等病害。移栽7 d后，小苗根系已经开始生长，此时可逐渐打开小拱棚放风。一般开始放风时，首先在傍晚日落前到早晨日出前放风，白天光照强烈时关闭，降低苗木水分蒸腾速率，维持体内水分平衡。随着放风口的逐日加大，逐渐降低塑料小拱棚内的温度和湿度，使组培苗逐渐适应干燥环境。移栽15 d后，有1～2片新叶长出，此时可完全撤掉塑料小拱棚。移栽20 d后，组培苗已完全适应了棚内环境，此时可逐步撤除遮阳网，叶面喷施0.1%磷酸二氢钾溶液或叶面肥稀溶液，促进根系生长。移栽30 d后，可在营养钵中施少量磷酸二铵。9月中旬开始撤掉大棚塑料，以降低湿度、增加光照强度，促进组培苗木质化。辽西地区在11月封冻前进行冬灌，然后就地压3～5 cm的防寒土越冬。统计表明，经过上述管护，当年苗高可达15～20 cm，根系发达，平均成活率可达90%以上。
　　4    参考文献
　　[1] 王占龙，李然，姜镇荣，等.黑果腺肋花楸试管苗移栽技术[J].林业科技开发，2003，17（4）：34-35.
　　[2] 曹孜义，刘国民.实用植物组织培养技术教程[M].兰州：甘肃科学技术出版社，1999.
　　[3] 朱广廉.植物组织培养中的外植体灭菌[J].植物生理学通讯，1996，32（6）：444-449.
　　[4] 高晔华.黑果腺肋花楸组培快繁体系的研究[D].延边：延边大学，2013.
　　[5] 李根柱，张自川.黑果腺肋花楸苗木扦插繁殖研究[J].北方园艺，2016（17）：37-39.
　　[6] 张成霞，孙燕，蔡灿，等.基质对黑果腺肋花楸幼苗生长的影响[J].草业科学，2018，35（3）：574-580.
转载注明来源:https://www.xzbu.com/8/view-15150295.htm