彩叶新品种‘黄金甲’及其组培繁育技术

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　　摘要：以‘黄金甲’带芽茎段作为外植体，用WPM固体培养基添加不同种类、浓度的激素，经过初代培养、继代培养I、继代培养Ⅱ、生根培养、炼苗，约6个月时间，使每个单芽成苗10～15个完整植株，并能在自然环境下生长。
　　关键词：‘黄金甲’;WPM培养基;激素;组培
　　‘黄金甲’为卫矛属北海道黄杨（Euonymus japoni-CUS“Cuzhi”）的变异品种，已获得国家林业局植物新品-种权，叶片中间翠绿，四周金黄。‘黄金甲’株型紧凑，色泽鲜亮，抗寒性与北海道黄杨基本一致，可耐23.9°C低温，在北方寒冷地区有很大市场潜力。目前，‘黄金甲’主要靠嫁接进行繁殖，费时费力且繁殖系数较低，其原种北海道黄杨的组培快繁技术已有所突破，因此，研究‘黄金甲’组培繁育技术，以实现‘黄金甲’的快速繁殖。
　　1材料选择
　　春夏季选用‘黄金甲’幼嫩带芽茎段作为外植体，秋冬季选用饱满冬芽作为外植体。
　　2培养条件
　　培养基采用WPM固体培养基，琼脂质量浓度7g/L，蔗糖质量浓度30g/L，pH值为5.8，光照时间12h/d，光照强度2500～3500Lx，培养温度为24～26℃，相对湿度45%～50%。
　　3消毒处理
　　材料采集后，去掉叶片，保留部分叶柄，然后用纱布包好放自来水下流水冲洗2h，后用软毛刷蘸取含有0.1%NaCIO的溶液清洗外植体，消毒液中加入5～6滴吐温80。
　　外植体为带芽茎段，完成清洗步骤后，在超净工作台内依次用75%酒精消毒20s、0.1%HgCl消毒4min，再用灭菌水清洗5～6次，每次不少于2min。然后切成有一对芽长0.5～I.0cm小段，进行接种。
　　外植体为越冬芽，需在超净工作台内剥去芽外部数层芽鳞，再进行消毒处理，才可接种。
　　4生长与分化情况
　　4.1初代培养
　　在WPM培养基中，添加KT 1.0mg/L、6-BA0.5mg/L、NAA 0.2mg/L，将切好的外植体接到上述培养基中，每瓶接2个外植体，接120瓶。接种10d后，芽眼萌动，30d后，叶片展开，大部分长出3～5片嫩叶，开始转入继代培养I。
　　4.2继代培养I
　　继代培养I培养基配方：WPM+KT 1.0mg/L+TDZ0.05mg/L+NAA 0.1mg/L，从初代培养中选择生长较好的外植体，每瓶接2个，接90瓶。接种30d后，从原芽体位置逐渐长出大量丛生芽，60d后芽眼分化完成，不再增多也不再长大，开始转入继代培养Ⅱ。
　　4.3继代培养Ⅱ
　　继代培养Ⅱ培养基配方：WPM+KT0.5mg/L+GA30.1mg/L+NAA0.1mg/L，每瓶接2个外植体，接90瓶。接种30d后，丛生芽显著长大，节间伸长。
　　4.4生根培养
　　生根培养基配方：WPM+NAA 0.1mg/L，选取包含2对以上侧芽，长3～4cm的丛生芽，将其剪下，插入生根培养基中，30d后无根枝条茎段下部长出大量不定根。
　　4.5炼苗
　　选取生长健壮、根系发达的组培苗，先打开瓶盖通风2d，使小苗逐渐适应外界环境，再小心取出，不要伤到根系，清水冲洗干净根部附着的培养基，晾干水分后，栽植至灭过菌的培养土内，培养土按泥炭：珍珠岩：蛭石=1：1：1的比例进行配制。栽植后喷施适量浓度多菌灵和代森锰锌混合液，放置背光处，覆膜保湿，保持温度在15～20℃之间，约20d后，新根长出，芽眼开始抽出新叶，说明炼苗已经成活，可将苗挪至向阳处，并逐渐去掉覆膜，使苗适应外界环境，1个月后即可转入正常养护。如果发生烂苗或者真菌蔓延，则要及时挖掉死苗及周圍土壤，然后喷施高浓度多菌灵进行防治，以免影响其它幼苗成活。
　　5结论
　　‘黄金甲’从接种到成苗大约需要半年时间，平均1个单芽可成苗10～15个，而传统嫁接繁殖单芽成苗平均0.8～0.9个，组培的增殖系数是传统嫁接技术的10多倍。可见，组培将是‘黄金甲’最快扩繁方式。
　　6意义与进展
　　‘黄金甲’是北海道黄杨的彩叶变种，属于叶绿素变异形成的新品种，本研究中的组培繁殖技术，没有形成愈伤组织，就不会出现返祖或是黄化苗现象。这种技术由丛生芽到生根，长成完整植株，保持‘黄金甲’的优良性状，还提高增殖系数，繁殖周期约6个月，为‘黄金甲’的产业化生产提供了更加有效的途径。此种组培繁育技术的应用，也为其他彩叶植物的快繁提供借鉴。
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