浅析鸭坦布苏病毒病及其防制

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　　2010年4月我国首次暴发鸭坦布苏病毒病，并在短短数月内迅速蔓延至江苏、浙江、福建等多个东南沿海省份及北方部分地区。病鸭感染后主要表现为采食骤降、产蛋减少乃至停产，精神沉郁、共济失调、严重者可导致死亡。该病传播迅速，已成为危害水禽养殖的重要传染病之一，因此在生产实际中做好鸭坦布苏病毒病的防控就显得尤为重要。
　　一、病原学
　　鸭坦布苏病毒属于黄病毒科、黄病毒属、恩塔亚病毒病群，病毒粒子呈球形，直径约为45-50nm，具有囊膜结构。该病毒不耐热，不耐酸，对去氧胆酸盐、乙醚敏感，常规条件下病毒无血凝性。鸭坦布苏病毒易于鸭胚增殖，且经尿囊腔接种可在鸡胚上增殖;鸭坦布苏病毒为单股正链RNA病毒，具有典型黄病毒基因组结构，病毒RNA全长10990nt，编码3个结构蛋白和7个非结构蛋白，其中结构蛋白E蛋白是病毒囊膜上的主要抗原蛋白，与病毒的吸附、入侵、膜融合及成熟等相关。
　　二、流行病学
　　国外于1955年，在马来西亚吉隆坡的库蚊样品中首次分离到坦布苏病毒，随后相继在马来西亚沙捞越及泰国地区的蚊虫样本中检出。2000年，kono等从马来西亚霹雳州4周龄肉鸡体内分离到Sitiawan病毒，该病毒与坦布苏病毒遗传学关系密切，感染鸡群表现为生长缓慢、共济失调等临床症状，同时并发有神经性脑炎。我国于2010年4月首次从福建、浙江、安徽等养鸭场密集区域爆发坦布苏病毒感染，并迅速蔓延至东南沿海省份及北方部分地区。坦布苏病毒感染宿主十分广泛，能感染樱桃谷鸭、番鸭、绍兴鸭、麻鸭、康贝尔鸭等多个品种的家养鸭，此外还能感染鸡、鹅、肉鸽等，其中鸭与鹅高度易感，鸡次之;动物的易感性除品种外还与日龄相关，5日龄至2周龄的樱桃谷鸭易感，5周龄后易感性下降。
　　黄病毒属病毒的传播媒介通常为蚊虫、蜱虫等节肢动物，作为黄病毒属成员的坦布苏病毒的传播媒介为库蚊，蚊子也是其潜在的传播媒介。目前坦布苏病毒主要以水平传播为主，但有研究表明坦布苏病毒可通过种鸭、种蛋的方式进行垂直传播。
　　三、临床症状
　　病鸭在临床上主要表现为采食量突然下降、产蛋率骤减，甚至停产。部分感染鸭出现明显的排绿色稀便现象，并伴有精神沉郁、喜卧等表现。感染初期病鸭通常采食量明显减少，缩脖、一段时间后可出现角弓反张、腿瘫、身体震颤等神经症状;感染后4-7日为死亡高峰期，一般与感染13天后逐步恢复采食，但会出现生长缓慢，产蛋率低下的情况。
　　四、诊断
　　目前通常根据感染动物的临床特征及剖检病变作出初步诊断，再依据试验室检测确诊，实验室确诊通常包括病原的分离、分子生物学鉴定及免疫学检测等技术手段。
　　1、病毒分离鉴定
　　利用灭菌生理盐水将病鸭的脑、脾脏、卵巢等组织研磨完全，离心取上清过滤，经尿囊腔接种9-12日龄SPF鸭胚，连续盲传3代后感染的死亡鸭胚可见有明顯胚体有明显的水肿、出血现象，部分胚体可见坏死灶。
　　2、血清学检测
　　血清学检测可通过免疫沉淀、免疫凝聚反应、免疫双扩散等方法检测，此外免疫荧光、免疫电镜等方法有较高灵敏度，但其价格昂贵，不适于大规模应用;目前利用最广泛的为酶联免疫测定技术，该方法具有特异、灵敏、简单、稳定、快速等优点。其中间接免疫荧光与免疫组化可检测感染细胞与组织中的病毒，实现病原的定位，是目前检测鸭坦布苏病毒的主要方法之一。
　　3、分子生物学方法
　　分子生物学诊断技术包括RT-PCR、套式PCR、实时荧光定量PCR、巢式PCR及RT-LAMP等，具有快速、灵敏度高及特异性强等特点，是实验室常用的病原检测手段。其中RT-PCR应用较为广泛，该方法将采集的病料提取病毒RNA后经过反转录为rDNA，再根据DTMUV的NS5基因或E基因设计并合成引物进行特异性扩增基因序列，具有敏感性好、特异性强等优势。黄欣梅等建立的坦布苏套式RT-PCR检测方法经过2次PCR扩增，该方法快速、敏感、特异，适用于流行病学调查和临床诊断。
　　五、鸭坦布苏病毒病的防制
　　1、疫苗预防
　　蔡丝丝等将坦布苏病毒尿囊液浓缩经0.3%甲醛灭活后间隔14天三次免疫产蛋鸡后，收集到的高免鸡蛋制备的冻干卵黄抗体能有效预防坦布苏病毒的感染。胡紫霞等采用硫酸铵盐析法及氯仿抽提法提纯的卵黄抗体对感染AF-F10毒株坦布苏的产蛋鸭具有明显的治疗效果。传统灭活疫苗免疫效果好、制备容易、保护率高、安全性好、能有效激活体液免疫，但灭活疫苗不能激发细胞免疫，常需加强免疫以达到理想的抗体水平，所以传统疫苗仍旧存在不足之处。除了应用较为广泛的传统灭活疫苗外，基因工程疫苗作为当今的研究热点其原理是通过基因重组技术，将遗传物质定向插入细菌、哺乳动物细胞或酵母菌中，表达后的产物经纯化后制备成疫苗。基因工程疫苗具有不带独立相关基因的特点，还可制备出能预防多种疾病的多价苗，也具有可观的应用前景。
　　2、生物安全措施
　　当前我国水禽养殖主要为开放式饲养，可采取的生物安全措施受到较大限制，且鸭坦布苏病毒主要通过库蚊进行传播，所以在夏季蚊蝇易滋生的季节尤其需要注意做好驱蚊、灭蚊工作，经常对周围环境进行清理消毒，及时彻底地清理污水、粪便等。合理优化选择养殖场地址，远离公路和活禽交易市场、屠宰场、畜禽产品加工厂等地区;引种时严禁从疫区引种。
　　3、药物治疗
　　目前尚无针对该病的有效治疗措施，发病初期可采用复方白龙散、清瘟败毒散、双黄连、黄芪多糖等进行对症治疗。在饲料中添加出复合维生素以外的仙人掌、白术、白花蛇草等可减轻病鸭的临床症状。与此同时环丙沙星等采用抗生素可有效防止继发感染，但一般不建议对病鸭进行药物治疗，对疑似病鸭要及时隔离，死亡鸭要进行焚烧等无害化处理，防止大面积流行。
　　4、综合防治措施
　　目前针对该病尚无高效的免疫疗法，生产中主要通过预防为主、综合防治来减少养殖过程中因感染该病导致的经济损失。在鸭坦布苏病毒流行地区或受威胁区可以通过以下几点来实现较好的防控：
　　（1）全价料饲养，日常可添加多种氨基酸和维生素，同时保持鸭舍内温度和湿度的适宜性，避免鸭群在免疫过程中出现过多的应激。
　　（2）做好经常性的环境消毒工作，尤其是针对运输车辆及设备，完善各项消毒设施，人员进出必须更换工作服等经严格消毒，同时应尽量减少人员及车辆的流动。
　　（3）定期对员工展开专业培训，提高员工专业素质和生物安全意识。
　　（作者单位：1.561000贵州省安顺市西秀区农业农村局动物疫病预防控制中心;2.561000贵州省安顺市西秀区农业农村局畜禽品种改良站）
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