黄色花浸制标本保存的新方法
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摘要：目的：研究更优质的黄色花类浸制标本保存方法。方法：配制了由亚硫酸、乙醇、亚硫酸氢钠混合组成的新型黄色花类药用植物标本保存液。结果：浸制标本保存液中亚硫酸氢钠的加入对黄色花的颜色、形态有很好的固定作用，标本色泽自然、无腐烂变质、形态逼真、立体感良好，明显优于传统保存液保存的效果。结论：黄色花类浸制标本保存方法的研究成果可以普遍推广用于其他黄色花类浸制标本的保存，在教学、科研、标本的陈列和展示以及艺术观赏等领域都发挥了重要的作用。
关键词：黄色花;药用植物;浸制标本;保色;保存
中图分类号：G642.0 文献标志码：A 文章编号：1674-9324（2019）22-0059-02
一、前言
浸制标本形态逼真，可以较好地保持组织器官的基本特征，因此在形态学科教学和科研实践中起到了重要作用。花色色素分布在花瓣的表皮或者接近表皮的几层细胞之中，黄色花由类胡萝卜素和类黄酮两种色素呈现，类胡萝卜素主要以结晶及沉淀存在于细胞质体内，较难溶于水;而类黄酮易溶于水，是黄色花保存成功与否的关键，但传统保存液保存的黄色花类浸制标本容易使植物腐烂，且具有刺激性，长期使用威胁人类健康。
前期的实验结果表明：在传统保存液中加入亚硫酸氢钠后，花类浸制标本的防腐效果提升，效果优于福尔马林和亚硫酸保存液，虽然红色花颜色会有所消退，但对黄色萱草花的保色效果好。亚硫酸氢钠是否普遍适用于黄色花的保存还尚不可知，本实验在前期研究的基础上，对药用植物黄色花类浸制标本的保存方法进行了进一步的研究与改进，发现亚硫酸氢钠的加入可以使黄色花类标本颜色和形态更加逼真，无腐烂变质，立体感良好，可以普遍适用于黄色花的保存。
二、材料
1.主要试剂。亚硫酸为分析纯，天津市河东区红岩试剂厂生产;乙醇为分析纯，天津市永大化学试剂开发中心生产;亚硫酸氢钠为分析纯，天津市塘沽新华化工厂生产;无菌蒸馏水，自制;凡士林，山东利尔康医疗科技股份有限公司。
2.主要仪器。电子天平（上海天美天平仪器有限公司生产）。
3.器具。棉线、剪刀、玻璃塞、磨口标本瓶、药勺、称量纸、烧杯、玻璃棒、量筒、镊子。
4.植物材料。连翘花、迎春花、大滨菊、金娃娃萱草、大花金鸡菊、黄色月季花、蒲公英花、菊芋花、向日葵、棣棠花。植物花均采于河北医科大学校园和药用植物园。
三、方法
1.花类标本的采集与处理。采集颜色相似、开放程度相同的植物花标本，修剪除去破损、腐烂的枝叶。标本瓶洗净、消毒、烘干，将新型保存液倒入标本瓶，用棉线将玻璃塞系于花柄上，将花完全浸入保存液中。用凡士林密封，再放到干燥避光处进行永久保存。注意不定时观察标本的保存情况。
2.花类浸制标本保存液的改良优化。（1）不同浓度亚硫酸氢钠保存液的作用。为了探究亚硫酸氢钠对药用植物黄色花类的保存是否有效，并确定其有效浓度，我们在黄色花传统保存液（5%亚硫酸和5%乙醇的混合溶液）的基础上加入不同浓度的亚硫酸氢钠，使亚硫酸氢钠的浓度呈浓度梯度的增加，即最終保存液中亚硫酸氢钠的浓度依次为0%、1.25%、2.5%、5%、10%，所用标本为连翘和迎春两种药用植物的黄色花，观察时间为半年，分别从植株颜色和形态两方面判断保存液对花的保存效果，结果见表1。（2）几种保存液效果比较。亚硫酸和亚硫酸氢钠在水中均主要以亚硫酸氢根离子和亚硫酸离子形式存在，所以我们根据水溶液中亚硫酸氢根和亚硫酸离子浓度总量的变化设计四种保存方法进行实验研究。我们采集大滨菊、金娃娃萱草、大花金鸡菊、黄色月季花、蒲公英花、菊芋花、向日葵、棣棠花在四种保存液中分别试验。方法一：传统保存液（5%亚硫酸）：亚硫酸25ml，乙醇25ml，加水使溶液总量为500ml;方法二：新型保存液（5%亚硫酸+10%亚硫酸氢钠）：亚硫酸25ml，亚硫酸氢钠50g，乙醇25ml，加水使溶液总量为500ml;方法三：15%亚硫酸：亚硫酸75ml，乙醇25ml，加水使溶液总量为500ml;方法四：15%亚硫酸氢钠：亚硫酸氢钠75g，乙醇25ml，加入水中使溶液总量为500ml。方法一是黄色花的传统保存液;方法二是经过改良的新型保存液;方法三是增加亚硫酸浓度，使其溶液中亚硫酸氢根离子和亚硫酸离子总和的相对浓度与方法二相同;方法四是将亚硫酸完全用亚硫酸氢钠替换，就其形态颜色进行观察，观察时间为两年，结果见表2。
四、结果
表1结果：经两种花实验得出，亚硫酸氢钠的加入，使花的形态、颜色保持得更逼真持久。随着亚硫酸氢钠浓度的增加，两种黄色花的保存效果逐渐优化，当亚硫酸氢钠浓度为10%时效果最佳。表2结果：方法一低浓度的亚硫酸和方法三高浓度亚硫酸保存液不仅使花的颜色退去，而且花的形态的立体效果较差，有萎缩变形的现象;方法四单独加入亚硫酸氢钠后，花瓣和花蕊颜色加深，从黄色变成了橙红色;方法二新型保存液在颜色和形态上对花的保存效果最佳，形象逼真，保持了花原有的颜色和形态。
五、讨论
我们应用亚硫酸氢钠研制出一种花类浸制标本保存的新方法。黄色花中的类黄酮是水溶性细胞色素，其中主要是花青素，随酸碱性不同颜色会发生变化，类黄酮是酸性越强黄色越淡，随碱性增强溶液颜色加深变蓝。我们不难看出，亚硫酸氢钠在对花类保存上有很大作用，尤其是对黄色花的保存最为明显，相比于传统保存液，亚硫酸氢钠的加入不仅可以使植物花的颜色保存的更原始、更持久，而且保证了花在溶液中仍以原始状态绽放，这一新方法安全、有效、廉价，希望可以为花类浸制标本制作提供思路和方向。
在实验过程中，仍然遇到了一些没有克服的问题，虽然在传统保存液中加入亚硫酸氢钠可以保持花的颜色和形态，但对于绿色的花梗、花托、花萼、枝条部分出现了发黄的现象，失去了真实颜色。王荣祥等发现标本在硫酸铜或醋酸铜溶液中放置一天后取出，对于绿色保存有效，因此我们将标本放置于新型保存液中之前先用5%的硫酸铜浸制标本24小时，但标本出现腐烂情况，对于标本中绿色部分的保存还需要进一步实验研究。
参考文献：
[1]刘秀娟.药用植物浸制标本制作难点——花的保色[J].中国中医药现代远程教育，2017，15（14）：146-149.
[2]孙健，史利国.中药原植物浸制标本的保色保存方法研究进展[J].山东畜牧兽医，2013，（6）：65-66.
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