33157例患者血型不规则抗体筛查的结果分析

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　　【摘 要】目的：通過对本院住院患者血清不规则抗体筛查结果的分析，探讨血型不规则抗体筛查在临床输血中的意义。方法：应用微柱凝胶免疫检测技术对本院2015年8月至2016年7月33157名住院患者进行不规则抗体筛查，并将阳性结果复查后再采用谱细胞分析，确定不规则抗体的特异性。结果：1）在33157名患者中共查出不规则抗体阳性101例，占0.30%，其中女性患者阳性率为0.420%，高于男性患者（0.181%），差异有统计学意义（P<0.01）。2）61例患者接受了抗体类型鉴定，其中检出特异性抗体42例（68.85%），包括Rh系统患者31例（50.82%），MNS系统患者8例（13.11%），Lewis系统患者2例（3.28%），抗Ec合并抗Mur患者1例（1.64%）;非特异性抗体患者15例（24.59%），包括自身抗体7例（11.48%），冷抗体3例（4.92%），自身抗体合并同种抗体5例（8.20%）;性质不明抗体4例（6.56%）。3）按临床科室划分，不规则抗体检出率以风湿免疫科患者最多，占4.67%，其次为血液科患者，占1.71%，内科患者占0.49%，产科患者占0.33%。结论：输血前血型不规则抗体的筛查与种类鉴定非常必要，及早发现有临床意义的不规则抗体，减少溶血性输血反应，保证患者输血安全。
　　【关键词】 不规则抗体;筛查;输血安全
　　Analysis of irregular antibody screening results in 33157 hospitalized patients
　　Liu Chan， Li Ping， Wang Shuya， Liu Tingting
　　Department of Transfusion， Affiliated Hospital of Medical School of Nanjing University， Nanjing， Jiangsu 210000
　　[Abstract] Objective： Red blood cell irregular antibodies were analyzed in hospitalized patients to ensure safty of blood transfusion. The type of antibodies and distribution were investigated to explore the significance in clinical transfusion. Methods： Irregular antibodies screening was performed with microcolumn gel method in 33157 hospitalized patients between August 2015 and July 2016. The positive results were reviewed and further analyzed to identifiy the specificity of irregular antibodies. Results： 1） 101 cases of irregular antibodies were detected accounting for 0.30% with 72 females （0.402%） and 29 males （0.180%） Female patients had a significantly high positive rate compared with male（P<0.05）. 2） Of 61 positive samples for further antibody specificity， 42 cases were identified as specific antibodies， including 31 cases of Rh group （50.82%）， 8 cases of MNS group （13.11 %）， 2 cases of Lewis group （3.28%）， and 1 case of antiEc combined with antiMur， while 15 cases as nonspecific antibodies， including 7 cases of auto antibodies， 3 cases of cold antibodies， 5 cases of autoantibodies combined with specific antibodies and 4 cases of others. 3） The distribution of positive irregular antibodies in different clinical departments： rheumatology department with a highest rate at 4.67%， followed by hematology department （1.71%）， internal medicine department （0.49%） and obstetrical department （0.33%）. Conclusion： It is essential to perform irregular antibodies screening and identification for patients before transfusion， which is of great significance for ensuring blood transfusion safety and reducing adverse transfusion reaction. 　　[Key words]Irregular antibody;Screening;Blood transfusion safety
　　 输血前检测是保证临床用血安全的重要手段。随着输血技术的发展和完善，ABO和RhD血型鉴定作为常规检测手段极大地减少了临床输血不良反应的发生，而因红细胞不规则抗体导致临床输血产生的溶血反应还时有发生[12]。红细胞血型不规则抗体是指ABO血型系统以外的其他血型系统抗体，如Rh、MNS、Lewis等血型系统的抗体。不规则抗体是导致临床溶血性输血不良反应、新生儿溶血症及红细胞输注无效以及实验室疑难交叉配型的主要原因[36]。近年来，人们对血型系统的认识逐渐加深，不规则抗体筛查已经成为输血前相容性检测的常规项目。尤其对于有输血史和妊娠史的患者，避免了由于免疫性抗体引起的迟发型溶血等输血不良反应。不规则抗体的类型在不同国家和地区分布有差异，对本地区人群不规则抗体的分布特征和频率进行考察，是临床输血安全和优化用血管理的保证。为了解不规则抗体在本院住院患者中的分布特点，选取本院33157名患者进行筛查和分析，现将结果报道如下。
　　1 资料与方法
　　1.1 一般资料
　　选取本院2015年8月至2016年7月收治的住院患者共33157例，其中男性16016例，女性17141例，年龄分布为1～100岁。EDTAK2抗凝血2mL，分离血浆，检测。
　　1.2 仪器与试剂
　　抗体筛选红细胞、微柱凝胶检测卡及仪器由长春博讯生物技术有限公司提供，专用孵育器、离心机由长春博研科学仪器有限责任公司提供，抗体鉴定谱细胞由上海血液生物医药有限公司提供。以上试剂均批检合格并在有效期内使用。
　　1.3 方法
　　1.3.1 不规则抗体筛选的方法 分别取50μL 0.8%的I、II、III号筛选细胞与50μL患者血清，加入微柱凝胶卡反应孔中，置于37℃专用孵育器孵育15min后，放入专用离心机900r/min离心2min，1500r/min离心3min。结果判读：离心后，若红细胞凝聚在凝胶表面或者中间为抗体阳性，沉于反应孔底部则为阴性。抗体初步筛查为阳性的标本进行复检以排除人为因素和（或）操作失误。复查结果仍为阳性的标本进一步用抗体鉴定谱细胞进行抗体特异性分析。
　　1.3.2 不规则抗体鉴定 通过盐水法、抗人球蛋白法或聚凝胺法对不规则抗体进行特异性鉴定。根据受检血浆与谱细胞反应格局以及相应抗原测定判读抗体特异性。当受检血浆与所有谱细胞和自身细胞的凝集强度一致时，判断为非特异性自身抗体[7]。
　　1.3.3 冷抗体检测 将患者自身红细胞与血清在4℃进行冷抗体吸收试验，重复吸收3次，将充分吸收后的血清与谱细胞在37℃反应。若无凝集、无溶血，则排除同种抗体的存在，确定为单一冷抗体;冷抗体特异性鉴定通过患者血清与成人OI细胞、脐血Oi细胞及自身细胞的反应格局进行判断[8]。
　　1.3.4 自身抗体检测 将患者红细胞放散后与患者血清进行自身抗体吸收试验，将吸收后的患者血清与谱细胞进行反应，根据反应格局确定抗体类型，若无凝集、无溶血，则排除同种抗体的存在。将患者红细胞放散液与谱细胞及自身细胞进行反应，若阳性反应强度一致，则判断为单一非特异性自身抗体[9]。
　　1.4 统计学处理
　　应用SPSS 22.0软件对数据进行统计分析，计数资料采用例数或百分率（%）表述，组间比较采用χ2检验，P<0.05表示差异具有统计学意义。
　　2 结果
　　2.1 血型不规则抗体的阳性率
　　33157例患者样本中检出不规则抗体阳性101例，阳性率为0.30%，其中女性72例，阳性率为0.420%，男性29例阳性率为0.181%。女性患者不规则抗体的阳性率明显高于男性，差异具有统计学意义（P<0.01）。具体结果见表1。101例抗体筛查阳性患者中无输血史且无妊娠史的29例，占28.71%，而有输血史或妊娠史的为72例，占71.29%，明显高于无输血史无妊娠史患者。结果见表2。
　　2.2 血型不规则抗体的鉴定
　　对101例不规则抗体阳性样本中的61例进行不规则抗体的鉴定（其余40例拒绝送检）。根据鉴定结果，特异性抗体42例（68.85%）：包括Rh血型系统31例（50.82%），MNS系统8例（13.11%），Lewis系統2例（3.28%），抗Ec合并抗Mur 1例（1.64%）;非特异性抗体15例（24.59%）：包括自身抗体7例（11.48%），冷抗体3例（4.92%），自身抗体合并同种抗体5例（8.20%），以及性质不明抗体4例（6.56%）。数据分析结果见表3和表4。
　　2.3 不同临床科室患者不规则抗体阳性率比较
　　不同临床科室患者不规则抗体阳性率不同，差异有统计学意义（P<0.01），风湿免疫科检出率最高，血液病患者、产期疾病患者不规则抗体阳性率明显高于外科、其他患者。见表5。
　　3 讨论
　　本次对本院33157例住院患者进行了血型抗体筛查，共检测出不规则抗体阳性101例，阳性检出率为0.30%，接近文献报道的阳性率（0.32%）[1012]。101例不规则抗体阳性患者中，女性阳性检出率（0.420%）明显高于男性（0.181%），差异有统计学意义（P<0.01）。输血和妊娠是导致患者产生不规则抗体的两大因素，而女性同时存在着输血和妊娠双重被动免疫机会，使得女性的不规则抗体阳性检出率远高于男性。
　　本次经鉴定的61例不规则抗体中，Rh系统抗体31例，占50.82%，其次为MNS系统（13.11%），Lewis系统（3.28%）。Rh系统抗体在血型免疫抗体中所占比例较高，也是引起免疫性溶血反应最常见的不规则抗体[13]。Rh系统的抗体多为IgG抗体。这类抗体能与输入患者体内的、表面具有相应抗原的红细胞结合，产生抗原抗体反应，破坏输入体内的红细胞，产生溶血性输血反应。此外，IgG类抗体能通过胎盘进入胎儿血液循环。如果母婴Rh血型不合，母亲体内因此产生的不规则抗体进入胎儿血液循环，即导致较严重的新生儿溶血病。Rh系统抗体又以抗E为主（25例，40.98%）。我国汉族人群E抗原的分布频率为47%，接近一半。在临床输血中，未对献血者及受血者的E抗原作检测，随机输血使得产生抗E的机会明显增多。有研究表明，抗原阳性与阴性的百分率越接近，产生抗体的机会就越多[14]。已有不少文献报道由抗E引起的迟发型溶血反应和新生儿溶血反应。目前，一些医院已将E抗原作为血型检测常规，需高度重视。与此相反，我国汉族人群的D抗原的分布频率高达99.6%，同时国内实验室普遍进行RhD抗原的检测，并建立了RhD阴性献血源的信息系统，保证RhD阴性血制品的供应。本次还检出1例Rh血型系统联合其他稀有血型系统抗体，还有7例自身抗体及5例自身抗体合并同种抗体，对需要输血的不规则抗体阳性患者均进行了交叉配血，选择对应抗原阴性或相合的血液进行输注，未发生输血不良反应。 　　从不规则抗体阳性患者的科室分布来看，风湿免疫科不规则抗体的检出频率最高，其次为血液科，内科和产科。风湿免疫科患者多存在自身免疫功能的改变，体内循环免疫复合物增多，且反复输注血制品。血液科、内科患者一般要长期反复输血。有研究表明，慢性病患者反复输血时，每输1单位红细胞、血浆，被动免疫的风险增加1%～2%，多次输血后机体内所产生同种抗体概率上升至15%～20%[15]。产科患者则由于妊娠等原因产生不规则抗体的机会较高。这种分布特征也从侧面表明了反复输注血液制品和妊娠是产生不规则抗体的主要原因。
　　综上所述，输血前进行不规则抗体筛查是十分必要的，对于有反复输血史以及妊娠史的患者更应该提高重视，及早发现有临床意义的不规则抗体，选择抗体对应抗原阴性的同型血进行输注，以减少因此产生不规则抗体而导致的输血不良反应。同时，庞大而复杂的血型系统对处在输血检验日常的工作人员也提出了更高的要求：提高检测技能，配备符合本地抗体分布特点的谱细胞，避免误判漏检，确保临床用血安全。
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