某院血流感染病原菌分布及耐药性分析

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　　摘要：目的  对血培养中病原菌的分布情况及其对主要抗菌药物的耐药性进行研究。方法  对2016年1月～2019年8月我院住院患者送检的7905例血培养标本，用BacT/ALERT 3D 血培养仪进行血培养，从培养结果阳性的培养瓶中分离出的菌株在VITEK-Compact Ⅱ微生物全自动分析仪中鉴定病原菌的种类，并进行药敏试验，从而对血培养阳性标本中病原菌的分布及耐药性进行分析。结果  血培养中共检出768株菌株，其中革兰氏阴性菌共421株（54.82%），革兰氏阳性菌共337株（43.88%），真菌10株（1.30%）。分离出的前5位菌株为：大肠埃希菌（152株）、肺炎克雷伯菌（96株）、人葡萄球菌人亚种（79株）、马耳他布魯菌（64株）及表皮葡萄球菌（50株）。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对氨苄西林的耐药率最高，分别为73.20%和97.06%;对头孢替坦、阿米卡星、美罗培南及亚胺培南较敏感。人葡萄球菌人亚、表皮葡萄球菌及金黄色葡萄球菌对苄青霉素的耐药率最高，分别为88.57%、93.94%及73.68%;对呋喃妥因、利奈唑胺和替加环素敏感性较高。结论  血培养中分离出的病原菌种类复杂，以革兰氏阴性菌居多，大肠埃希菌仍为主要致病菌。药敏结果显示病原菌耐药情况较严重，需加强对病原菌的监测工作，以指导临床合理使用抗菌药物。
　　关键词：血流感染;血培养;耐药率
　　Abstract：Objective  To study the distribution of pathogenic bacteria in blood culture and its resistance to major antibacterial drugs.Methods  From January 2016 to August 2019， 7905 blood culture specimens from our hospital patients were examined by BacT / ALERT 3D blood culture instrument.The strains isolated from the culture bottles with positive culture results were used to identify the types of pathogenic bacteria in the VITEK-Compact Ⅱ microbial automatic analyzer， and to conduct drug sensitivity tests， so as to analyze the distribution and drug resistance of the pathogenic bacteria in blood culture positive specimen.Results  A total of 768 strains were detected in blood culture， including 421 Gram-negative bacteria （54.82%）， Gram-positive bacteria 337 （43.88%）， and 10 fungi （1.30%）. The top 5 isolates were： Escherichia coli （152 strains）， Klebsiella pneumoniae （96 strains）， Staphylococcus human subspecies （79 strains）， Brucella malta （64 strains） and epidermis grapes Cocci （50 strains）. The resistance rates of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae to ampicillin were the highest， 73.20% and 97.06% respectively; they were sensitive to cefotetan， amikacin， meropenem and imipenem. Staphylococcus aureus， Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus aureus have the highest resistance rates to benzylpenicillin， 88.57%， 93.94% and 73.68% respectively;they are more sensitive to nitrofurantoin， linezolid and tigecycline.Conclusion  The types of pathogenic bacteria isolated from blood culture are complex， and most are Gram-negative bacteria. Escherichia coli is still the main pathogenic bacteria. The results of drug susceptibility show that the resistance of pathogenic bacteria is serious， and it is necessary to strengthen the monitoring of pathogenic bacteria to guide the rational use of antibacterial drugs in clinic. 　　Key words：Bloodstream infection;Blood culture;Drug resistance rate
　　血流感染是影响所有年龄段人群发病率和死亡率的主要原因[1]，在全球范围内影响约3000万人的健康，致约600万病人死亡[2]，其特征是细菌或真菌入侵血流并引起机体炎症反应，致菌血症或败血症，严重者可出现休克，多器官功能衰竭、DIC等[3]。近年来由于广谱抗菌药及有创诊疗广泛使用，致血流感染发生率不断增加，病原菌种类和耐药性也随时间进展而有所变化，给临床经验用药带来困难。因此，有必要对医院的病原菌分布和耐药性进行监测，以有效指导临床合理使用抗菌药物。本研究分析我院2016年1月～2019年8月送检的血培养标本，并对检出的病原菌进行了菌群分布和耐药性分析。
　　1材料和方法
　　1.1 标本来源  收集2016年1月～2019年8月天津市第二人民医院住院患者送检血培养标本7905例。
　　1.2 仪器与试剂  全自动血培养仪BacT/ALERT 3D和配套的培养瓶，微生物全自动分析仪VITEK-Compact Ⅱ和配套的细菌鉴定卡及药敏卡均来自法国生物梅里埃公司。血琼脂平板，麦康凯平板，念珠菌显色平板来自天津金章科技发展公司。
　　1.3 标本采集  采集有血流感染症状者在使用抗菌药物前的全血标本，成人8～10 ml，儿童1～3 ml，分别注入需氧培养瓶和厌氧培养瓶中，采集过程中严格无菌操作，标本采集完成后立即常温送检。
　　1.4 细菌培养及鉴定  收集到的血培养瓶立即放入BacT/ALERT 3D全自动血液培养仪中进行培养。当仪器报警有阳性标本时，立即将阳性标本转种到血琼脂平板和麦康凯平板中，有必要时应加种念珠菌显色平板，同时进行革兰氏染色镜检，电话通知临床初步鉴定结果。分离培养18～24 h后，挑取单个可疑菌落，通过VITEK-Compact Ⅱ进行细菌鉴定和药敏分析。药敏结果判定根据美国临床实验室标准化协会（CLSI）最新标准判读。
　　1.5 质量控制  质控菌株：大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌ATCC27853、 粪肠球菌 ATCC29212、肺炎克雷伯菌ATCC700603。
　　1.6 统计学方法  采用WHONET5.4 进行统计分析，数据使用（n，%）进行描述。
　　2 结果
　　2.1病原菌分布  共分离出768株菌株，前5位为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌，人葡萄球菌人亚种，马耳他布鲁菌，表皮葡萄球菌，见表1。
　　2.2主要革兰氏阳性菌对常用抗菌药物的耐药情况  分离出的革兰氏阳性菌中以人葡萄球菌人亚种最多，其次为表皮葡萄球菌。人葡萄球菌人亚种、表皮葡萄球菌及金黄色葡萄球菌对苄青霉素的耐药率最高，溶血葡萄球菌对苄青霉素和苯唑西林的耐药率最高，这4种革兰氏阳性球菌对克雷霉素和红霉素的耐药率均>50%。4种革兰氏阳性球菌中未发现对利奈唑胺、替加环素的耐药菌株，对呋喃妥因的敏感性较高，见表2。
　　2.3主要革兰氏阴性菌对常用抗菌药物的耐药率  革兰氏阴性菌中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌在前2位，大肠埃希菌对氨苄西林的耐药率最高，对复方新诺明和头孢唑啉耐药率>50%。肺炎克雷伯菌对氨苄西林的耐药率最高，其次是对哌拉西林及呋喃妥因。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢替坦、阿米卡星、美罗培南及亚胺培南较敏感，其中未发现对头孢替坦耐药的肺炎克雷伯菌株，见表3。
　　3讨论
　　血流感染所导致的菌血症和败血症是引起患者急性死亡的原因之一[4]。血培养是血流感染最直接的诊断方法，对患者后续治疗、病情监测及预后都具有重要作用。及时准确的血培养鉴定及药敏结果有助于临床有效的控制感染，减少患者的死亡率。同时，对血流感染中检出的病原菌的分布和耐药情况进行定期监测，可以指导临床经验用药，以达到及时有效控制感染的目的。
　　本研究从7905例血培養中检出768株菌株，革兰氏阴性菌仍是血流感染主要菌株，占54.82%，与陈俊等[3]及唐洪影等[5]报道的血培养结果一致。但与杨士华[6]报道的结果不同，可能是因为病原菌的分布与地域有一定的关系。革兰氏阴性菌中以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出最多，革兰氏阳性菌中检出最多的为人葡萄球菌人亚种，其次为表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌。大肠埃希菌对阿米卡星、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦及头孢替坦具有较高的敏感性;肺炎克雷伯菌对头孢替坦、阿米卡星、亚胺培南及美罗培南具有较高的敏感性，其中未发现对头孢替坦耐药的肺炎克雷伯菌株。人葡萄球菌人亚种、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌及溶血葡萄球菌对替加环素、利奈唑胺均未发现耐药。
　　本研究中发现表皮葡萄球菌检出率高于金黄色葡萄球菌，这与陈俊玲[7]、高壁如等[8]报道相一致。表皮葡萄球菌是存在于人皮肤黏膜的正常菌群，如在创伤性诊疗过程中未严格遵守无菌操作，对皮肤消毒不彻底，就会使表皮葡萄球菌进入血液并引发感染，表皮葡萄球菌的高检出率提示临床在进行有创诊疗时，应加强消毒意识，严格无菌操作，避免不必要的感染产生。此外，马耳他布鲁菌检出率也较高，人布鲁式杆菌病是一种人蓄共患病，传播途径主要为直接接触皮肤传播，也可通过消化道传播，如未经高温消毒的奶制品，牛羊肉等，对布鲁氏杆菌及时的检出有助于临床诊断。布鲁氏杆菌也可以通过气溶胶吸入感染，提示实验人员一定要做好防护工作。本研究中共检出10株真菌，其中一半为新生隐球菌，这可能与我院患者构成有关，因其感染常见于免疫功能受损的人群，如艾滋病等，及时准确对血流感染中真菌的检出有助于更合理的使用抗真菌药物。
　　综上所述，血流感染的病原菌复杂多变，不同病原菌间的耐药性差异也较大。由于有创诊疗的广泛开展及抗菌药物的不合理应用，导致血流感染的发病率不断增加，病原菌的耐药情况日渐严重，且随时间的推移病原菌的分布和耐药性都会产生变化。这就使医院对血流感染病原菌的的监测显得至关重要，实时了解病原菌的分布和耐药情况，对帮助临床合理使用抗菌药物，提高患者治愈率具有重要意义。
　　参考文献：
　　[1]Musicha P，Cornick JE，Bar-Zeev N，et al.Trends in antimicrobial resistance in bloodstream infection isolates at a large urban hospital in Malawi（1998-2016）：a surveillance study[J].Lancet Infect Dis，2017，17（10）：1042-1052.
　　[2]Fleischmann C，Scherag A，Adhikari NK，et al.Assessment of Global Incidence and Mortality of Hospital-treated Sepsis. Current Estimates and Limitations[J].Am J Respir Crit Care Med，2016，193（3）：259-272.
　　[3]陈俊，王燕，钱耀先，等.某院血流感染常见病原菌分布特征及耐药性分析[J].检验医学与临床，2019，16（2）：200-203.
　　[4]吕媛，李耘，薛峰，等.卫生部全国细菌耐药监测网（Mohnarin）2011-2012年度血流感染细菌耐药监测报告[J].中国临床药理学杂志，2014，30（3）：278-288.
　　[5]唐洪影，胡志东，李静，等.2014-2017年血培养常见病原菌的菌群分布及其耐药性变迁[J].中国抗生素杂志，2018，43（5）：566-571.
　　[6]杨士华.血液培养的病原菌分布及耐药性分析[J].医学理论与实践，2018，31（3）：329-331.
　　[7]陈俊玲.表皮葡萄球菌与金黄色葡萄球菌在血流感染患者中分布及耐药性分析[J].实用医技杂志，2019，26（6）：713-714.
　　[8]高壁如，王梦梦，杨湘越.血培养分离表皮葡萄球菌的分布及耐药性分析[J].现代检验医学杂志，2019，34（2）：76-78.
　　编辑/冯清亮
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