矮牵牛组织培养的初步研究

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　　摘要：矮牵牛(Petuniahybrida)为茄科矮牵牛属多年生草本植物，通常都作为1～2年生草花栽培，原产于南非，由野生种杂交培育而成，现世界各地均有栽培，在园林中用途十分广泛。矮牵牛一般采用播种繁殖，种子多是从国外进口的杂交种，价格昂贵。本试验通过对矮牵牛组织培养的技术进行研究，以组织培养途径达到经济和快速繁殖的目的，实现矮牵牛的工业化生产。
　　关键词：矮牵牛、组织培养、栽培管理
　　1、品种、形态特征
　　1．1 形态特征与品种
　　矮牵牛为多年生草本。茎直立或匍匐。叶卵形，全缘，互生或对生。花单生，漏斗状，花瓣边缘变化大，有平瓣、波状、锯齿状瓣，花色有白、粉、红、紫、蓝、黄等，另外有双色、星状和脉纹等。常见品种有：
　　a、重瓣的小瀑布（Cascade）系列：早花种，可提前开花14～28天。其中红色葡萄酒（Burgundy），花深玫瑰红色，早开花21～28天。梅脉（PlumVein），花淡玫瑰红，具深色脉纹，可早开花14天。随想曲（Caprice），花玫瑰红色，花瓣紧凑。二重唱（Duet），为橙红／白双色品种。
　　b、的重瓣果馅饼（DoubleTart）系列：苹果馅（AppleTart）株高25～30厘米，花大红，花径6～7厘米。樱桃馅饼（CherryTart）花白色具不规则玫瑰红纵条纹。紫天堂（HeavenlyLavender）株高20厘米，花紫色，花径6～7厘米，早花种。
　　c、大花的阿拉廷（Aladdin）系列：株高30厘米，花色多种，其中蓝天（SkyBlue）花鲜蓝色，花径10厘米，更为突出。
　　d、（Dreams）系列：株高18～20厘米，抗病品种，其中玫瑰梦（RoseDreams）花玫瑰红，黄心，花径8～10厘米。鹰（Eagle），矮生种，株高10厘米，花径9厘米，花色多，其中红星（RedStar）鲜红／白双色呈星状。
　　e、（Magic）系列：其中超级魅力（SuperMagic）为超大型花，分株性强，株高10厘米，花径10厘米；黄魅力（YellowMagic）花黄色，最诱人。
　　 f、中蓝冰（BlueIce）花淡蓝色，具深色脉纹；夏冰（SummerIce）花橙红色具深色脉纹。
　　1．2 矮牵牛的生物学特征
　　矮牵牛原产南美。喜温暖和阳光充足环境。不耐寒，怕雨涝。 矮牵牛的生长适温为13～18℃，冬季温度在4～10℃，如低于4℃，植株生长停止，能经受－2℃低温。但夏季高温35℃时，矮牵牛仍能正常生长，对温度的适应性较强。
　　矮牵牛喜干怕湿，在生长过程中，需充足水分，特别夏季高温季节，应在早、晚浇水，保持盆土湿润。但梅雨季雨水多、对矮牵牛生长十分不利，盆土过湿，茎叶容易徒长，花期雨水多，花朵褪色，易腐烂，若遇阵雨，花瓣容易撕裂。如盆内长期积水，往往根部腐烂，整株萎蔫死亡。
　　 2、组织培养
　　2.1组织培养
　　植物的一些组织细胞，无论来自根、茎、叶，还是来自子房和花粉，只要接种在合适的人工培养基上，在一定的外界条件下，就能使它们长成一株完整的植物，这种技术称为组织培养。
　　3、研究计划
　　3.1研究品种：我选取了两个品种的矮牵牛：淡红色品系和深蓝色品系。通过组织培养来研究其无性繁殖。
　　3.2‘实验准备
　　3.2.1查阅相关资料，了解有关知识。
　　3.2.2实验器材：高压灭菌锅、超净工作台、无菌培养室等
　　3.2.3研究所需药剂：培养基的大量元素、微量元素、植物激素等
　　3.2.4实验设计与实验进程
　　附表 培养基的种类
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　　编号 培养基的组成（mg/L）编号 培养基的组成（mg/L）
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　　1MS+6-BA 3.0 7 MS+6-BA 3.0+2,4-D0.6
　　2MS+6-BA 2.0 8 MS+6-BA 2.0+2,4-D0.6
　　3MS+6-BA 1.0 9MS+6-BA 1.0+2,4-D0.6
　　4MS+6-BA 0.5 10 MS+2,4 D2.0
　　5MS+KT3.011 MS+2,4-D1.0
　　6MS+KT 2.0 12MS+2,4-D0.5
　　3.3外殖体的选取和灭菌
　　3.3.1牵牛叶片作为外植体，在无菌条件下，先用75%酒精浸泡30s，然后置于0.1%的升贡溶液中处理8―10min，最后用无菌水冲洗5―6次。以无菌吸水纸吸取材料表面的水，并将叶切成5-8mm的小块。
　　把经消毒灭菌后的外植体接种于ms培养基，填加不同浓度的6―BA、NAA、 IBA等，ph值调至5.8，培养过程中温度保持20―28℃，光照10―12h/d，光照1000―2000lx
　　4、结果与分析
　　 4.1愈伤组织的诱导： 本研究共选用了 12 种培养基， 通过对各配方中培养材料的分化和长势情况进行分析比较 和优化组合， 筛选出培养基 Ms+ 6-BA I．0， pH5．8 最适合愈伤组织的诱导。将叶片接种到诱导培养基中培养 1周后，切块开始萌动，继续培养 1个月后切块四周切 口处有 浅绿色的愈伤组织分化。
　　4.2丛生芽的分化及继代： 将愈伤组织切下后转入分化 培养基， 经过 3O 天的培养， 在愈伤组织上开始分化出芽,继而很快形成芽丛。芽丛分成小单株，分别转入相同培养基，约 2O天后左右， 又可分化成新芽丛。如此，芽丛块在相同成分的新鲜培养基上不断分切继代，短期内即可得到大量增殖苗。
　　4.3生根诱导：将培养 3O天左右，高 2~ 3em 的增殖芽从丛生芽块上单个切下， 转入生根培养基 1／ zMS+ NAA0．05 中，1周后瓶中的材料全部长出 1~ 2cm 的白色须根。
　　
　　5、矮牵牛的栽培管理
　　将瓶打开锻炼30天，然后将达到移栽标准的生根苗从培养苗中取出，洗去附着的培养基，由于在培养室内养分及光照温度湿度最佳，如果从室内直接转入到室外会对植株造成伤害， 所以正式移栽以前必须经过炼苗。将生根苗移入消毒过的含珍珠岩的基质中，套上塑料袋，以保持湿度。炼苗期间给以充足的光照和适宜的湿度，经过 15~ 20 天以后正式上盆,成活率可达90以上。
　　 5.1 矮牵牛宜用疏松、肥沃和排水良好的微酸性砂质壤土。春播苗待长出2片真叶后移植一次，移植后5～6个月可定植于露地或上盆。秋播苗也需经过一次移植上盆后再翻盆一次，才可在温室或冷床越冬。需摘心的品种，在苗高10厘米时进行，在摘心后10～15天用0．25％～0．5％比久喷洒叶面3～4次，来控制植株高度，促进分枝，效果十分显著。
　　5.2 生长期可使用"卉友"20－20－20通用肥或15－15－18无土栽培用肥。传统栽培，每半月施肥1次，以腐熟饼肥水为主。花期增施2～3次过磷酸钙。矮牵牛在无土栽培时，施用硝酸钾和硝酸铵的，对矮牵牛生长发育最为有利。如矮牵牛在幼苗期喷施0．25％～4％B9液可提早开花，使花朵紧密美观。矮牵牛在夏季高温多湿条件下，植株易倒伏，注意修剪整枝，摘除残花，达到花繁叶茂。
　　6、矮牵牛常见的病虫害防治
　　6.1矮牵牛常见的病害
　　 矮牵牛的病害主要是：苗期猝倒病（采用百菌清、甲基托布津800－1000倍），生长期茎腐病；
　　6.1.1叶斑病。尽量避免碰伤叶片并注意防止风害、日灼及冻害；及时摘除病叶并烧毁，注意清除落叶；喷洒50%代森铵1000倍液。
　　6.1.2白霉病。发病后及时摘除病叶，发病初期喷洒75%百菌清600-800倍液。
　　6.1.3病毒病。间接的防治方法是喷杀虫剂防治蚜虫，喷洒40%氧化乐果1000倍液；在栽培作业中，接触过病株的工具和手都要进行消毒。
　　 6．2矮牵牛常见的虫害
　　主要虫害有菜蛾、蚜虫、红蜘蛛、青虫、卷叶蛾等，尤其在国庆花卉生产较为常见。虫害防治：生长期内发生的蚜虫、红蜘蛛等虫害可用40％乐果乳剂1 000―1 500倍液喷雾或三氯杀螨醇乳剂1500-2000倍液喷施或用杀螨菊酯1 500倍液进行叶面喷雾，喷药时间一般在上午9点之前或下午3点之后进行，两次喷药的间隔期以7 10天为宜，风天、阴雨天禁用药。
　　7、小结：
　　长期以来，我国矮牵牛大量用种都主要依赖进口，因此开辟育种新途径，加速新品种选育，培育具有自主知识产权的矮牵牛新品种，显得尤为迫切。因此利用组织培养手段，达到经济和快速繁殖的目的，实现矮牵牛的工业化生产。
　　
　　
　　参 考 文 献
　　
　　1朴 日子．矮牵牛的快速繁殖技术．延边大学农学学报 。999，21( 4) ：3 13～ 3 16．
　　2杨增海． 园艺植物组织培养． 北京 ： 农业出版社，1987． 2．
　　 参考文献：
　　3、 矮牵牛的繁殖栽培技术----山东省临沂师范学院 赵新玲
　　 4、 矮牵牛的栽培技术----吉林省大安市园林管理处于雅静 闫丽宏 张君和
　　 5、 矮牵牛盆花培育技术---广东省东莞市农业种子研究 黄子锋刘远星
　　
　　注：文章内所有公式及图表请以PDF形式查看。

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