酶联免疫斑点检测技术对结核性脑膜炎的诊断分析
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【摘要】 目的 分析酶联免疫斑点检测技术对结核性脑膜炎的诊断价值。方法 118例疑似结核性脑膜炎患者， 根据实际治疗和回访结果将患者分为实验组（结核性脑膜炎患者， 62例）和对照组（非结核性脑膜炎患者， 56例）。两组患者均进行酶联免疫斑点检测技术， 比较两组患者脑脊液、外周血的诊断阳性率。结果 实验组患者中脑脊液指标呈阳性60例（96.8%）， 对照组患者中脑脊液指标呈阳性2例（3.6%）。实验组患者脑脊液诊断阳性率高于对照组， 差异具有统计学意义（χ2=102.504， P=0.000<0.05）。实验组患者中外周血指标呈阳性56例（90.3%）， 对照组患者中外周血指标呈阳性0例（0）。实验组患者外周血诊断阳性率高于对照组， 差异具有统计学意义（χ2=96.266， P=0.000<0.05）。结论 采用酶联免疫斑点检测技术诊断结核性脑膜炎效果良好， 提高了患者脑脊液和外周血的诊断阳性率， 值得在临床诊断中应用。
【关键词】 酶联免疫斑点检测技术;诊断阳性率;结核性脑膜炎
医学上定义的结核性脑膜炎属于炎症性疾病， 形式上为非化脓， 主要是由结核杆菌引起的， 发病率与死亡率高。据研究发现， 结核杆菌会发生基因突变的情况导致病症加重， 加之抗结核药物疗效有限， 该疾病患者的发病率和死亡率逐年上升[1]。所以结核性脑膜炎的早期诊断尤为重要， 及早发现及早治疗， 预后效果更好。一些结核性脑膜炎患者早期难以发现典型症状， 导致诊断错误， 错失治疗良机， 酶联免疫斑点检测技术是通过探测结核性感染患者的特异性T细胞进行诊断的， 据以往研究证明其可靠科学、安全性高。本文主要是研究酶联免疫斑点检测技术对结核性脑膜炎的诊断应用， 旨在提高结核性脑膜炎的诊断阳性率， 及早诊断患者病情， 使得患者能够在最佳时期内治疗， 从而避免患者病情加重甚至死亡。现报告如下。
1 资料与方法
1. 1 一般资料 选择2017年1月～2018年1月本院收治的118例疑似结核性脑膜炎患者作为研究对象， 纳入标准：有头疼发热、脑膜刺激征等临床现象， 通过影像分析高度疑似结核性脑膜炎的初治患者， 所有患者均为初治病例， 均自愿参加本次研究;排除标准：排除妊娠、严重脏器疾病、人类免疫缺陷病毒（HIV）合并感染的患者。根据最终治疗和回访结果分为研究组（62例）和对照组（56例）。研究组患者中， 男33例， 女29例;平均年龄（45.3±7.8）岁。对照组患者中， 男30例， 女26例;平均年龄（44.1±8.9）岁。两组患者性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）， 具有可比性。本院伦理委员会批准了此次研究。
1. 2 方法 两组患者均采用酶联免疫斑点检测技术进行检测。具体如下：①采集制作细胞工作液。首先采集患者的脑脊髓6 ml和外周血8 ml， 将液体注入试管里， 注意在试管里添加肝素抗凝剂， 使用专用的检测试剂盒， 保障操作在二级生物安全柜里进行， 再加入定量的细胞培养液， 使离心混合， 约10 min， 把中层的白细胞移至规格为15 ml的离心管里。调整细胞密度时加入无血清培养液， 达到合格标准时开始检测;②进行酶联免疫斑点检测。检测的每个标本都只用2个检测孔， 均注射入靶向抗原， 把细胞培养液（无抗原）注射到阴性对照孔里， 把植物血凝素注射到阳性对照孔里， 均加入制作好的细胞工作液， 严格操作， 最后统计斑点数， 得出结果。所有反应孔里斑点数目去掉阴性孔里斑点数目为结果， 最终斑点数≥40个为阳性。
1. 3 观察指标 比较两组患者的酶联免疫斑点检测结果， 包括脑脊液、外周血的诊断阳性率。
1. 4 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件对研究数据进行统计分析。计量资料以均数 ± 标准差（ x-±s）表示， 采用t检验;计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。
2 结果
2. 1 两组患者脑脊液诊断阳性率比较 实验组患者中脑脊液指标呈阳性60例（96.8%）， 对照组患者中脑脊液指标呈阳性2例（3.6%）。实验组患者脑脊液诊断阳性率高于对照组， 差异具有统计学意义（χ2=102.504， P=0.000<0.05）。
2. 2 两组患者外周血诊断阳性率比较 实验组患者中外周血指标呈阳性56例（90.3%）， 对照组患者中外周血指标呈阳性0例（0）。实验组患者外周血诊断阳性率高于对照组， 差异具有统计学意义（χ2=96.266， P=0.000<0.05）。
3 讨论
我国是一个结核菌感染率较高的国家， 结核性脑膜炎作为一种传染性疾病， 发病率高， 死亡率高， 常見于青壮年， 在临床上会出现发热、头疼、脑积水等症状， 受结核杆菌的感染会影响到神经系统， 对患者的危害不容小视。需要说明的是近年来滥用抗生素得现象越来越重要， 而滥用抗生素会导致结核杆菌基因突变， 成为一种对人体危害更大、更难治疗的传染病。目前医学界也没有完全掌握治疗该疾病的办法， 加之患者的早期诊断比较困难， 所以导致了结核性脑膜炎的发病率和死亡率逐年升高。
传统诊断结核性脑膜炎的方法是涂片镜和聚合酶链式反应（PCR）法， 涂镜片检测结合性脑膜炎的方式不仅诊断阳性率低， 而且培养周期过长， 总的来说这种方式不利于及早诊断患者， 容易延误了患者的病情， 让患者错过治疗的黄金时期， 进而使患者加重病情， 甚至面临死亡的危险。PCR法检测结核性脑膜炎的方式虽然诊断阳性率较高， 但是由于辅助手段缺乏特异性， 容易加大临床治疗的困难性， 更有可能造成患者颅脑不可逆的创伤， 对患者的危害过大。所以这两种检测方法应该随着医疗水平的提高被淘汰或者优化。
酶联免疫斑点检测技术是一种新型的检测技术， 其既能诊断活动性的结核感染， 也能诊断非活动性的结核感染， 其可以从单细胞水平来检测分泌抗体和细胞因子的细胞， 此外， 其还能够准确检测到免疫细胞被结核杆菌致敏的情况， 检测指标为脑脊液和外周血的阳性率， 统计斑点数确定结果， 从而诊断出患者是否属于结核性脑膜炎患者[2]。相比较传统的涂片镜和PCR法等检测方法而言， 酶联免疫斑点检测技术能够提高脑脊液、外周血的诊断阳性率， 精确度更高， 方便简单， 培养周期短， 安全性高[3]。需注意的是在检测过程中对工作人员的技术要求较高， 医护人员应该严格十分熟练流程操作， 按照酶联免疫斑点检测技术的程序进行操作， 整个检测过程医护人员要佩戴专业服装， 手部消毒， 戴上无菌手套， 实现无菌操作[4-6]。此外， 在采集脑脊液和外周血的过程中注意严格按照医院的采血规定， 最后准确地计算结果， 有利于提高检测的精确度， 及早发现患者病情， 及早进行治疗[7， 8]。
综上所述， 酶联免疫斑点检测技术对结核性脑膜炎的诊断应用价值大， 诊断阳性率高， 且安全性高， 科学性强， 能够让结核性脑膜炎患者在早期就及时发现病情， 并且及时干预治疗， 降低了结核性脑膜炎的死亡率， 在临床诊断上值得推广应用。
参考文献
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[收稿日期：2018-11-07]
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