中药检验中色谱技术的应用实践及研究进展探析

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　　【摘 要】在新医改形势下，如何保证中药材安全有效应用值得药学工作者和临床医师共同关注。为了推进现代技术在中药检验领域的应用，综述近年来现代技术在中药检验领域的运用及发展，分析常见现代色谱技术在中药检验、质量控制领域的应用优势。
　　【關键词】中药检验；色谱技术；应用前景；研究进展
　　随着现代检验技术的逐步发展，各种先进仪器和技术不断引进并应用于中药检验、中药质量监控等领域，现代技术在中药检验技术的应用已取得一些进展。在药学工作者的不断努力下，现在仪器分析技术广泛应用于中药检验中，对中药质量控制起到至关重要的作用。由于新仪器、新技术的引入，拓宽了中药检验的范围与深度，在检测手段及分离模式方面均表现出一定的优越性，在一定程度上提升了中药检验的准确性、灵敏度与选择性[1]。
　　1薄层色谱法
　　2000年版中国药典中收载记录的中药材、中药成方制剂共计992种，其中采用色谱方法检验的制剂品种占收载品种总数的49%，表明色谱技术在中药检验中的重要地位[2]。在中药检验鉴定中，色谱法已经成为不可缺少的常规有效方法，对于一些成分复杂的中药、天然药物等，存在分离与分析鉴定的双重优势。例如对熊胆和其他胆汁混合伪造的伪品、西洋参与生晒参伪造的伪品，应用传统理化方法鉴别难度较大，应用薄层色谱法可以快速简单进行鉴别，其分离快、灵敏度高、分辨率高、专属性好等优势决定了未来在中药检验领域的应用前景[3]。张丽艳等[4]采用薄层色谱法12批余庆吴茱萸药材及9批其他不同产地的吴茱萸和2种伪品进行薄层色谱比较，分析了不同产地吴茱萸所含化学成分在含量的差别，为评价吴茱萸品质优劣、GAP规范化种植及质量监控提供了有力的依据。
　　2气相色谱法
　　气相色谱法适用于挥发性成分或通过衍生化后能够气化的成分的定性与定量分析，灵敏度较高且分离效率高。在含挥发油成分中药材鉴定分析中，气相色谱法已经成为一种首选的色谱技术。对于不挥发成分的定量与定性，可以应用裂解气相色谱法进行鉴定。如龙脑、柠檬烯、芳樟醇的测定，以及经衍生化反应后用于分析生物碱类、内酯类、脂肪类、酚类、糖类等其他成分，也可用于中药残留溶剂的检验。陆继伟等[5]应用固相萃取-气象色谱双塔双柱法测定白果、肉桂、人参、红花、广藿香、银杏叶等中药样品的有机磷类农药残留量，在中药样品基质、三水平添加条件下，农药回收率多在70.0%～120.0%，检测限大多地域0.01 mg/kg，符合农药多残留检测要求。进一步证实气相色谱法在中药材样品有机磷类农药残留检测中的应用，具有基质干扰小、灵敏度高、重现性好等多重优势。
　　3高效液相色谱法
　　高效液相色谱法在中药检验中的应用，具有柱效高、分离度好、重现性好等优点，可以对中药材成分进行分析。高效液相色谱法适用于具有紫外吸收的化合物的分析，可进行含量测定或定性分析。伴随样品纯化技术的提高，采用液液萃取、超临界萃取、液固萃取，使分离效率高的HPLC法能够对中药成分进行准确定量。李文博等[6]采用变换波长检测法建立了养血清脑颗粒HPLC指纹图谱，确定了35个共有色谱峰在药材中的归属。应用液相色谱-质谱联用法鉴定部分化学成分，并对制剂中的4种指标性成分进行定量检测。研究解决表明制剂与药材具有良好的色谱峰相关性，且指标性成分在各自浓度范围内线性关系良好。
　　4毛细管电泳法
　　毛细管电泳（CE）是近年来迅速发展的新技术，在药物分析尤其是中药检验领域均有研究报道。例如阿魏酸的测定通常采用薄层色谱法和高效液相色谱法，应用毛细管区带电泳法相较于上述两种色谱技术，表现出高效、经济、回收率好、重现性好等明显优势。高效毛细管电泳（HPCE）将电泳技术与色谱技术相结合，具有分离效率高、样品用量少、灵敏度高等特点，显露出电泳与色谱技术的双重优势，是目前中药检验领域十分重要分离、分析技术。
　　李绍平等[7]应用高效毛细管电泳法测定天然与人工冬虫夏草和苷类成分含量，得出湿热能增加天然冬虫夏草核苷类物质含量这一结论。陈志良等[8]应用高效毛细管电泳法对宁夏枸杞和枸杞果实蛋白多肽进行测定，结果两者高效毛细管电泳图谱差异明显。此法在三七及菊叶三七、紫苏子及其混淆品的鉴别中均收到良好鉴别效果，结果满意。车磊等[9]建立了桂附地黄丸毛细管区带电泳指纹图谱，对12批桂附地黄丸的质量进行鉴别，此法具有较好的精密度与重现性，为全面控制和评价桂附地黄丸提供了新的方法。
　　5超临界流体萃取及色谱
　　超临界流体萃取技术是在超临界流体基础上产生的色谱技术，利用超临界流体的低粘度性质，运用二氧化碳作为流动相，分离色谱柱一般采用固定相填充柱，对中药材样品或固体中药制剂中的化学成分进行分析，质量好、速度快、分析效率快，适用于酚类、有机酸、挥发油等中药复杂成分的分析。超临界流体萃取技术可在低温下操作，兼具HPLC和GC的优点，适合对不稳定、挥发性强、易氧化成分进行提取，在中药检测与提取中具有独特的优势。常忆凌等[10]应用夹带甲醇（流速0.4 mL·min-1）的超临界CO2萃取六味地黄丸中的丹皮酚，此法操作简便快速，准确性好，适用于中药复方制剂中有效成分的提取分离。
　　参考文献：
　　[1]郑清瑗，陈炜璇，钱浩泉.中药栓剂中有机氯农药残留量测定方法的探索（Ⅰ）[J].中药新药与临床药理，2008，14（02）：224.
　　[2]朱妙琴.天麻等中药材的裂解-气相色谱指纹鉴别[J].中国现代应用药学，2005，14（04）：191.
　　[3]唐涛，张维冰，李彤，等.六味地黄丸组分的二维液相色谱分离[J].分析化学，2007，22（12）：47.
　　[4]张丽艳，罗君，李健，等.吴茱萸药材薄层色谱指纹图谱研究[J].中国实验方剂学杂志，2011，12（12）：176.
　　[5]陆继伟，苗水，毛秀红，等.固相萃取-气相色谱双塔双柱法同时测定中药材中53种有机磷类农药残留量[J].中成药，2010，09（01）：149.
　　[6]李文博，韩建平，高钧，等.养血清脑颗粒的高效液相色谱指纹图谱研究[J].分析化学，2011（03）：122.
　　[7]李绍平，李萍，季晖，等.天然与发酵培养冬虫夏草中核苷类成分的含量及其变化[J].药学学报，2001，36（6）：436.
　　[8]陈志良，陈振德，侯连兵，等.枸杞子蛋白多肽的高效毛细管电泳法鉴别[J].中国药学杂志，2001，36（3）：79-81.
　　[9]车磊，孙国祥，李闫飞.桂附地黄丸的毛细管电泳指纹图谱研究[J].中南药学，2011（06）.
　　[10]常忆凌，刘本.超临界流体萃取六味地黄丸中的丹皮酚[J].中国中药杂志，2006，31（8）：172.
　　（作者单位：菏泽市食品药品检验检测研究院）
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