膀胱尿路上皮癌组织中生存素基因的表达及临床意义

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　　[摘要] 目的 探討膀胱尿路上皮癌组织（BUC）中生存素（Survivin）基因的表达及临床意义。 方法 选取2010年7月～2018年12月病理科存档的BUC标本60例，采用En Vision二步法免疫组化检测Survivin基因的表达。另选取其他手术切下的正常膀胱黏膜标本20例作对照。分析BUC组织与正常膀胱黏膜组织中Survivin基因表达的差异。 结果 60例BUC中Survivin基因的表达阳性43例（71.67%）。20例正常膀胱黏膜组织中Survivin基因表达均为阴性。BUC组织中Survivin基因的表达阳性率较正常膀胱黏膜组织更高（χ2=30.99，P<0.01）。BUC组织中Survivin基因表达与患者的性别和年龄无关（P>0.05），与肿瘤是否复发、浸润深度和病理分级等密切相关（P<0.05）。结论 BUC组织中Survivin基因的表达存在明显上升趋势，Survivin基因的高表达极有可能促进BUC的发生和发展;且其表达与肿瘤的复发情况、恶性程度及病理浸润深度存在一定的相关性，可能参与BUC病情的转移和浸润的过程。
　　[关键词] 膀胱尿路上皮癌组织;免疫组化;生存素;生物学行为
　　[中图分类号] R737.1          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-9701（2020）08-0015-04
　　Expression and clinical significance of survivin gene in bladder urothelial carcinoma
　　LUO Chao1   KE Mang1   HAN Zihua2
　　1.Department of Urology， Taizhou Hospital of Taizhou Enze Medical Center （Group） in Zhejiang Province， Linhai   317000， China; 2.Department of Urology， Enze Hospital of Taizhou Enze Medical Center （Group） in Zhejiang Province， Taizhou 318050， China
　　[Abstract] Objective To investigate the expression and clinical significance of survivin gene in bladder urothelial carcinoma （BUC）. Methods 60 cases of BUC specimens archived in the pathology department from July 2010 to December 2018 were selected. En Vision two-step immunohistochemistry was used to detect the expression of Survivin gene. Another 20 cases of normal bladder mucosa cut from other operations were selected as controls. The difference of Survivin gene expression between BUC tissue and normal bladder mucosa was analyzed. Results There were 43 cases （71.67%） of positive expression of Survivin gene in 60 cases of BUC. Survivin gene expression was negative in 20 normal bladder mucosa tissues.The positive rate of Survivin gene expression in BUC tissues was higher than that in normal bladder mucosa tissues（χ2=30.99， P<0.01）. The expression of Survivin gene in BUC tissues was not related to gender and age of patients （P>0.05）， and was closely related to tumor recurrence， depth of invasion and pathological grade（P<0.05）. Conclusion The expression of Survivin gene in BUC tissue has a clear upward trend. The high expression of Survivin gene may promote the occurrence and development of BUC. The expression of Survivin gene is related to the recurrence， malignancy degree and depth of pathological invasion， and may be involved in the transfer and invasion of the BUC condition. 　　[Key words] Bladder urothelial carcinoma tissue; Immunohistochemistry; Survivin; Biological behavior
　　膀胱尿路上皮癌（Bladder urothelial carcinoma，BUC）是我国泌尿科最常见的恶性肿瘤之一，具有多发性及高复发性的生物学特征。肿瘤的发生受多种基因与多种因素的影响与调控，尤其与细胞凋亡密切相关，是目前肿瘤发生机制的研究热点之一[1，2]。生存素（Survivin）是一种凋亡抑制基因，在正常的成人组织中表达较弱或无明显表达，在大多数肿瘤组织中呈高表达，但国内有关Survivin在BUC中的表达鲜有报道[3-5]。本文旨在探讨凋亡抑制基因Survivin基因在BUC中的表达及临床意义，探讨其在BUC发生、发展中起的作用，现报道如下。
　　1 资料与方法
　　1.1 一般资料
　　选取我院2010年7月～2018年12月病理科存档的BUC标本60例。纳入标准：临床资料完整，且经术后病理确诊为BUC。排除标准：术前有膀胱灌注或全身化疗或放疗者。其中男52例，女8例;年龄38～84岁，平均（60.41±6.13）岁。另选取其他手术切下的正常膀胱黏膜标本20例作对照，其中男18例，女2例;年龄34～78岁，平均（58.94±5.42）岁。两组的性别构成和年龄分布均衡可比（P>0.05）。
　　1.2 免疫组化测定
　　采用En Vision二步法测定BUC组织与正常膀胱黏膜组织中Srvivin蛋白的表达。兔抗人Survivin多克隆抗体、En Vision二步法免疫组化试剂盒由北京中杉生物公司提供。
　　1.3 观察指标
　　观察并比较BUC组织与正常膀胱黏膜组织中Survivin基因表达的差异，并分析BUC中Survivin基因的表达与生物学行为的关系。
　　1.3.1 免疫组化结果判断  以细胞质出现棕黄色颗粒可判断为Survivin阳性细胞。高倍镜视野下根据癌细胞染色强度以及阳性细胞率乘积进行评分，其中染色强度为无色、浅黄色、棕黄色和棕褐色计为0、1、2和3分;阳性细胞率：比例≤10%、比例11%～30%、比例31%～60%和比例≥61%计0、1、2和3分。上述两项乘积≥2分即可判定Survivin表达阳性，否则阴性。
　　1.3.2 Survivin基因的表达与生物学行为的关系  包括性别、年龄、肿瘤是否复发、浸润深度和病理分级等。
　　1.4 统计学处理
　　应用SPSS20.0 for window软件进行统计学分析处理，计数资料以[n（%）]表示，采用χ2检验，检验水准α定为0.05，P<0.05为差异有统计学意义。
　　2 结果
　　2.1 BUC组织与正常膀胱黏膜组织中Survivin基因的表达比较
　　60例BUC中Survivin基因的表达阳性43例（71.67%）。20例正常膀胱黏膜组织中Survivin基因的表达均阴性。BUC组织中Survivin基因的表达阳性率明显高于正常膀胱黏膜组织，差异有统计学意义（χ2=30.99，P<0.01）。
　　2.2 BUC组织中Survivin基因的表达与生物学行为的关系
　　BUC组织中Survivin基因的表达与患者的性别和年龄无关（P>0.05），与肿瘤是否复发、浸润深度和病理分级等密切相关，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。
　　3 讨论
　　Survivin基因是1997年由国外学者首先报道的一种凋亡抑制基因，定位于人染色体17q25上，其表达具有细胞周期性，是目前为止克隆出的最小的凋亡抑制蛋白家族成员[6-8]。大量的报道显示，Survivin在抑制凋亡蛋白的作用上具有双重作用：即阻止细胞凋亡和调节细胞的有丝分裂。研究发现，Survivin基因与癌细胞分裂周期中G2/M期存在较密切关系，直接通过拮抗Caspase-3和Caspase-7的结合抑制Caspase家族活化，抑制癌细胞凋亡引起癌变;同时可间接地与周期蛋白激酶CDK4、p34、cdc2相互作用阻断凋亡信号转导通路，引起癌细胞的凋亡产生抗凋亡作用[9-11]。Survivin基因表达分布具有明显的组织细胞选择性，在胃肠癌、肝癌、肾癌、前列腺瘤、脑癌、乳腺癌等癌中高表达，在正常的人体组织（除胸腺、生殖腺）中表达较弱或无明显表达，Survivin基在大多数肿瘤发生发展、浸润和转移中起一定的作用[12-17]。
　　膀胱癌是临床上较常见的泌尿系统恶性肿瘤，其中绝大部分是BUC，术后易出现肿瘤复发和浸润转移，治疗效果欠理想。寻找新的可用于评估BUC的早期诊断及治疗效果的基因，可以为BUC的预后提供科学依据。葛波等[18]研究发现Survivin在膀胱移行细胞癌中异常高表达，在正常膀胱组织中无明显表达;且Survivin的表达随BTCC临床分期、病理分级的增高而显著增强，与年龄、性别无明显相关。孙友文等[19]研究发现Survivin的异常表达在膀胱移行细胞癌的病情进展中起重要作用，且Survivin表达的检测对判断膀胱移行细胞癌的发生发展、转移、复发及预后有一定帮助。本研究通过采用免疫组织化学法检测了BUC组织与正常膀胱黏膜组织中Survivin基因表达的差异，研究发现BUC组织中Survivin基因的表达阳性率明显高于正常膀胱黏膜組织，提示BUC组织中Survivin基因的表达较正常膀胱黏膜组织存在明显上升趋势，Survivin基因的高表达极有可能促进BUC的发生和发展。同时研究发现BUC组织中Survivin基因的表达与肿瘤是否复发、浸润深度和病理分级等生物学行为明显相关，提示BUC组织中Survivin基因的表达与肿瘤的复发情况、恶性的程度以及病理浸润深度存在一定的相关性，在BUC的转移和浸润的过程中起重要作用，促使肿瘤的发展，有望成为BUC早期诊断以及预后评估的靶分子，临床上需进一步探讨Survivin基因的表达与BUC患者其他生物学行为以及病理特征的相关性及可能的相互作用机制，有助于了解BUC患者发病的分子机制，以期为BUC的基因诊断及靶向治疗提供新的理论依据[20-29]。Survivin基因在膀胱癌BUC的发病中起重要作用，深入研究对BUC的诊断和治疗及判断预后有一定的临床意义[30-34]。 　　总之，BUC组织中Survivin基因的表达存在明显上升趋势，Survivin基因的高表达极有可能促进BUC的发生和发展;且其表达与与肿瘤的复发情况、恶性程度以及病理浸润深度存在一定的相关性，可能参与BUC病情的转移和浸润的过程。Survivin基因可作为评估术后复发风险和预后的独立指标，有望成为Survivin基因诊断及靶向治疗的新靶点，通过分子靶向治疗手段抑制BUC组织中Survivin基因而促使肿瘤细胞凋亡可能是临床治疗BUC的新途径。
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　　（收稿日期：2019-06-17）
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