超高效液相色谱-串联质谱法同时测定包菜中31种农药残留
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一、材料与方法
（一）材料与试剂
蔬菜和水果购于河南省郑州市农贸市场;乙腈、甲醇、二氯甲烷（色谱纯，默克股份两合公司）;氯化钠（分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司）;SupelcleanTM LC-NH2 SPE柱（美国Supelco公司）。
30种农药标准品质量浓度均为1000μg/mL，多菌灵农药标准品质量浓度为 500μg/mL，均购于农业农村部环境保护科研监测所 （天津），取各标准品体积800μL，分别置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容，于-18 ℃冰箱内避光保存。
混合标准储备溶液质量体积浓度8μg/mL，分别移取一定量的各标准储备溶液，用甲醇稀释配制而成，于4 ℃冰箱内避光保存。试验时用空白基质溶液配制标准溶液，现配现用。
（二）仪器与设备
Agilent 1290-6495超高效液相-三重四极杆质谱联用仪;CLXXUVFM2超纯水器;TTL-DCII氮吹仪;Silent crusher M高速分散均质机;QL-861旋涡混合器;HC-3018R高速冷冻离心机;1%电子天平;固相萃取装置。
（三）试验方法
准确称取（10.00±0.10） g样品于50.0 mL离心管中，向其中加入3 g氯化钠、20.0 mL乙腈，高速匀浆2 min后，5000 r/min离心5 min，准确移取10.0 mL上层乙腈溶液，置于10.0 mL具塞玻璃离心管中，氮吹蒸发至近干，加入2.0 mL甲醇+二氯甲烷溶解残渣，待净化。将SPE柱用5.0 mL甲醇+二氯甲烷预淋洗，倒入上述待净化溶液中，然后用15.0 mL刻度离心管收集洗脱液，用5.0 mL甲醇+二氯甲烷洗刻度离心管后过柱，并重复2次。氮吹蒸发至近干，用乙腈+水准确定容至5.0 mL，混匀过0.22 μm滤膜，待测。
二、结果与讨论
（一）质谱条件的优化
对31种农药的混合标准溶液进行分析，通过Agilent MassHunter Optimizer 软件进行优化，获得DMRM采集参数，包括1个母离子和2个碎片离子信息及其对应的最佳碰撞能量，选择响应值最高的子离子作为定量离子，另一个作为定性离子。优化后的采集参数见表1，其中“*”为定量离子。利用优化后的采集参数对包菜基质中31种农药进行分离。
（二）色谱条件的优化
试验采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱（1.8μm，3.0 mm×50 mm）对31种农药进行分离，考察了不同流动相对31种农药测定的影响。结果表明：5 mmol/L乙酸铵+0.10%甲酸水溶液，水作为流动相A，乙腈、甲醇作为流动相B，乙腈分离效果明显优于甲醇;乙酸铵能够得到较好的峰形，同时加入甲酸能够提高目标物的响应值。试验进一步考察了乙酸铵溶液中甲酸体积分数（0.00%、0.05%、0.10%、0.15%、0.20%、0.25%）对色谱峰的影响。试验结果表明： 5 mmol/L乙酸铵+0.10%甲酸水溶液和乙腈为最佳流动相。
（三）基质效应
由于果蔬样品基质复杂，进行前处理时提取液中的无机物和有机物会对目标化合物的离子化程度产生很大影响。因此，本试验通过比对基质匹配标准曲线斜率和溶剂匹配标准曲线斜率来考察基质效应。由表2可以看出，灭蝇胺、啶虫脒、阿维菌素基质效应<0.8，为基质抑制效应;灭多威、氯吡脲基质效应>1.2，为基质增强效应;其余26种农药的基质效应在0.8～1.2，基质效应可忽略。因此，应采用基质匹配标准曲线进行实际样品的定量测定。
（四）工作曲线与检出限
试验选用空白包菜样品的提取液配制标准溶液，以消除基质效应的影响。以各化合物的质量浓度为横坐标，定量离子的峰面积为纵坐标绘制工作曲线，计算其线性回归方程和相关系数，在5～500μg/L质量浓度范围内，各目标化合物的线性关系良好，线性回归相关系数结果见表2。以3倍信噪比和10倍信噪比计算各化合物在基质中的检出限（3S/N）和定量限（10S/N）。如表2所示，31种农药的检出限和定量限分别为0.015 4～0.237 1 μg/kg和0.051 4～0.790 4 μg/kg，其中定量限均低于我國相关规定中最高残留限量标准。
（五）精密度和回收试验
按试验方法对包菜空白样品进行加标回收试验，添加3个水平（0.02 mg/kg、0.08 mg/kg和0.4 mg/kg），每个水平做6个平行样品。其平均回收率和测定值的相对标准偏差（RSD）见表3。由表3可知，31种农药平均回收率为62%～120%，RSD为1.2%～12.6%，表明本方法准确度高、稳定性好，能够满足日常检测需求。
三、结论
本试验采用固相萃取装置净化，经氮气吹干后用超高效液相色谱-串联质谱法进行测定，优化了不同提取溶剂、混匀方式、流动相对回收率的影响。该方法灵敏度高、稳定性好，在13 min内能够快速对31种农药进行定量，适用于果蔬中多种农药残留的同时检测分析。
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