刺五加提取物有效成分含量及改善睡眠功能研究
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摘要:刺五加又名刺拐棒、老虎镣子,为多年生草本植物,富含丰富的有效药用成份,比如总黄酮类、原儿茶酸及苯丙素类等,具有数十种药理作用。近年来,刺五加提取物作为保健食品原料,具有广泛的市场开发前景。本文是针对刺五加提取物(紫丁香苷为0.5%),研究其是否具有改善睡眠作用。
关键词:刺五加提取物:三种有效成份含量;改善睡眠功能
本文的目的是研究刺五加提取物有效成分含量,及刺五加提取物对小鼠睡眠是否具有改善。方法是:采用中国药典一部刺五加浸膏项下梯度的方法测定含量。睡眠研究在安静、恒温、恒湿的条件下,通过刺五加醇提物对小鼠直接睡眠实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验、巴比妥钠睡眠潜伏期实验来检测是否具有改善睡眠作用。结果显示:刺五加提取物中紫丁香苷、刺五加皂苷E高达0.5%、异嗪皮啶高达1.6%,刺五加提取物通过四项动物实验证明其对小鼠睡眠具用改善作用。
一、紫丁香苷、异嗪皮啶、刺五加皂苷E有效成分含量测定
实验材料及仪器。刺五加皂苷B、E及异嗪皮啶标准品,均来源于中检院。高效液相色谱仪:Agilent1260。分析天平:梅特乐托力多XSE205。
供试品处理。称取刺五加提取物0.2g置50mL容量瓶中,加甲醇超声处理30min,定容,摇匀,过0.22“m滤膜,弃去初滤液,取续滤液即为供试品溶液。
刺五加提取物含量测定结果:紫丁香苷为0.5%、刺五加皂苷E为0.5%、异嗪皮啶为1.6%。
二、刺五加提取物改善睡眠研究
受试样品。刺五加提取物(紫丁香苷0.5%),灰分9.0%,水分6.1%,性状为棕黄色粉末,置干燥、通风、阴凉处保存。人体日食用推荐量为0.3g(以60kg体重计)。
实验动物。SPF级雄性健康成年小鼠,体重18-22g。将实验动物分成三组,第一组进行直接睡眠实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验;第二组进行戊巴比妥钠(或巴比妥钠)阈下剂量催眠实验;第三组进行巴比妥钠睡眠潜伏期实验。将160只小鼠随机分配,分成四组,每组40只,再按体重随机分成4小组,每个小组10只动物,命名为高、中、低三个剂量小组和阴性对照小组。高到低三个剂量小组分别为人体日食用量的5倍、10倍、30倍,受试样品经口腔给药,周期为30天。
实验方法及结果。直接睡眠实验。小鼠末次给药后,是否有睡眠现象出现,如果30-60秒内翻正反射消失,即为小鼠进入睡眠状态。记录不同剂量小组与阴性对照小组入睡的动物数量及入睡时间。
延长戊巴比妥钠睡眠时间实验:在戊巴比妥钠催眠的基础上,观察受试样品是否能够延长动物睡眠时间。 (注戊比妥钠现用现配)
戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验:各剂量组动物连续灌胃一个月,在末次给药15min后,各組动物按3Smg/kg'bw剂量腹腔注射戊巴比妥钠,注射量为lOmL/kg'bw,以小鼠翻正消失1min为睡眠指标,记录给戊巴比妥钠30min内各组入睡动物数。
巴比妥钠睡眠潜伏期的影响:经口给予小鼠不同剂量的刺五加提取物一个月,腹腔注射巴比妥钠,观察小鼠的睡眠潜伏期。
结论。刺五加提取物对小鼠直接睡眠无影响,0.15g/kg.bw/d组小鼠睡眠时间显著长于Og/kg'bw/d组(P<0.05)。对戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验无统计学意义。0.15g/kg.bw/d组小鼠睡眠潜伏期明显短于Og/kg'bw/d组(P<0.05)。刺五加提取物(紫丁香苷0.5%)具有改善小鼠睡眠作用。
现代人由于各方面压力导致睡眠质量较差,严重影响日常生活和工作,国家中医药管理局、科技部重点鼓励四类功能保健食品加速研发申报,其中一个功能就是改善睡眠。本文针对刺五加提取物改善睡眠的研究,希望可以用到保健食品研发中,提高人们的睡眠质量。
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