不育症男性精子DNA损伤与精液参数相关性分析
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【摘要】 目的 探讨不育症男性精子DNA损伤与精液参数的相关性。方法 选取359例男性不育症患者作为研究对象， 检测其精子DNA损伤指数及精液参数， 按照DNA碎片指数（DFI）分为Ⅰ组（DFI≤15%， 176例）、Ⅱ组（15%<DFI<30%， 98例）、Ⅲ组（DFI≥30%， 85例）。比较三组患者的精子浓度、精子活动率和精子前向运动率（PR）， 分析DFI与各精液参数的相关性。结果 Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组组间精子浓度比较， 差异无统计学意义（P>0.05）;Ⅰ组精子总活力、精子前向运动率分别为（55.1±13.6）%、（58.6±17.2）%， Ⅱ组精子总活力、精子前向运动率分别为（51.5±12.0）%、（53.1±15.7）%， Ⅲ组精子总活力、精子前向运动率分别为（47.7±11.3）%、（48.7±11.3）%;Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组组间精子总活力和精子前向运动率比较， 差异有统计学意义（P<0.05）。精子总活力和精子前向运动率与DFI呈负相关（P<0.05）。结论 检测精子DNA损伤指数有助于临床医生对男性生育能力的评估。
【关键词】 不育症;精子DNA损伤指数;精子浓度;精子活动率;精子前向运动率
DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.02.034
男性不育症是夫妻不孕不育的重要因素之一。精液常规分析是评估男性生育能力的基本检测方法， 包括精子浓度、精液体积、pH、精子存活率、精子总活力、精子前向运动率等参数， 但精液常规分析有一定的局限性， 同一个体不同时间的各参数差异较大， 而且约有15%男性精液常规分析结果正常仍不育[1， 2]。精子DNA损伤检测从细胞和分子遗传层面分析精子DNA及其在受精过程、胚胎发育等方面的作用， 是目前生殖医学的研究热点[3]。本文分析了精子DNA损伤与精液常规参数的相关性， 旨在研究精子DNA损伤在评估男性生育能力的应用价值。现报告如下。
1 资料与方法
1. 1 一般资料 回顾性分析2016年1月～2017年5月在本院生殖健康科就诊的359例男性不育症患者的临床资料， 患者年龄25～48岁， 均无遗传性疾病家族史和性功能障碍史， 其他检查均未见异常。对359例患者检测其精子DNA损伤指数及精子参数， 按照DFI进行分组， 分为Ⅰ组（DFI≤15%， 176例）、Ⅱ组（15%<DFI<30%， 98例）、Ⅲ组（DFI≥30%， 85例）。
1. 2 方法
1. 2. 1 精液标本采集及常规分析 按照WHO《人类精液及精子宫颈粘液相互作用实验室检验手册》（第5版）规定， 研究对象应禁欲2～7 d， 手淫取全部精液于干净容器中， 立即保温送检， 于37℃温育至液化后检测。使用清华同方精子动静态图像检测系统进行精液常规分析。
1. 2. 2 精子DNA损伤检测 精子DNA损伤使用深圳华康生物有限公司生产的试剂盒， 采用精子染色质扩散法进行检测。具体方法参照试剂盒说明书。精子DNA判断标准：根据晕环（b）与精子头部横径（a）比例， 分为大、中、小、无晕环和退化5个等级。其中， b/a≥2/3为大晕环;b/a >1/4且b/a≤2/3为中晕环;b/a≤1/4小晕环;观察不到晕环的精子为无晕环;观察不到晕环且精子核区染色较浅的精子为退化。大晕环和中晕环表示精子核DNA完整， 小晕环、无晕环和退化表示精子核DNA损伤。高倍镜观察400个精子， 计算存在DNA损伤的精子数量。DFI=（存在DNA损伤的精子数量/计数的精子总数） ×100%。
1. 3 观察指标 比较三组患者的精子浓度、精子活动率和精子前向运动率， 分析DFI与各精液参数的相关性。
1. 4 统计学方法 采用SPSS22.0统计学软件进行数据统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验;相关性采用Pearson回归分析。P<0.05表示差异具有统计学意义。
2 结果
2. 1 三组精液常规参数比较 Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组组间精子浓度比较， 差异无统计学意义（P>0.05）;Ⅰ组精子总活力、精子前向运动率分别为（55.1±13.6）%、（58.6±17.2）%， Ⅱ组精子总活力、精子前向运动率分别为（51.5±12.0）%、（53.1±15.7）%， Ⅲ组精子总活力、精子前向运动率分别为（47.7±11.3）%、（48.7±11.3）%;Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组组间精子总活力和精子前向运动率比较， 差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。2. 2 DFI与各精液参数相关性分析 精子总活力和精子前向运动率与DFI呈负相关（P<0.05）。见表2。
3 讨论
精子DNA是父方遗传信息的载体， 其完整性决定遗传物质能否正确传递给子代， 精子DNA损伤会影响人类的自然受孕能力和胚胎发育能力。过量的生物活性氧类物质、精子发育过程中的染色质组装异常、细胞的异常凋亡均可造成精子DNA损伤。也有研究表明， 空气污染、吸烟都会导致精子细胞异常凋亡和DNA损伤[4， 5]。针对不同的损伤机制， 其检测方法也多种多样， 常见的检测方法有“彗星”实验（comet assay）、精子染色质结构分析试验（SCSA）、精子染色质扩散试验（SCD）、末端转移酶介导的dUTP末端标记法（TUNEL）等[6]。本研究采用精子染色质扩散法。近年来， 精子DNA损伤的研究是生殖医学的热点之一。众研究表明， 精子DNA损伤与精液量、精子总数、精子浓度、精子形态、精子活动率、精子前向运动率、男性年龄、禁欲天数等因素均有一定的相关性。本次研究结果显示， Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组组间精子浓度比较， 差异无统计学意义（P>0.05）;Ⅰ组精子总活力、精子前向运动率分别为（55.1±13.6）%、（58.6±17.2）%， Ⅱ组精子总活力、精子前向运动率分别为（51.5±12.0）%、（53.1±15.7）%， Ⅲ组精子总活力、精子前向运动率分别为（47.7±11.3）%、（48.7±11.3）%;Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组组间精子总活力和精子前向运动率比较， 差异有统计学意义（P<0.05）。这与季兴哲等[7]、范烺[8]和麦选诚等[9]研究结果一致。此外， 本研究中， 精子总活力和精子前向运动率与DFI呈负相关（P<0.05）。精子的运动主要由精子头部控制， 受鞭毛摆动方式的影响， 形成直线或曲线运动。精子线粒体为精子运动提供能量， 调节精子运动。精子DNA损伤可导致精子线粒体功能及结构的异常， 导致精子活动能力的下降。李非凡等[10]也認为精子浓度与DFI值无明显关系， 而精液量、精子总活力、精子活动率和精子前向运动率、精子总数和DFI有明显关系（r=0.078、-0.447、-0.444、0.069， P<0.05）。综上所述， 精子DNA损伤与精子总活力、精子前向运动率有一定的相关性， 对受孕能力和胚胎发育均有影响。研究精子DNA损伤对于男性的生育能力的评估有重要作用。 参考文献
[1] 曾玖芝， 龚衍， 梁梅玉， 等. 不育男性精子DNA损伤与年龄和精液常规参数的相关性研究. 四川医学， 2015（36）：659-661.
[2] 郑九嘉， 杨旭， 张李雅， 等. 精子DNA损伤、核蛋白组型转换与顶体酶活性及精液参数的相关性分析. 中华男科学杂志， 2012（18）：925-929.
[3] Gomes M， Gon?alves A， Rocha E， et al. Effect of in vitro exposure to lead chloride on semen quality and sperm DNA fragmentation. Zygote， 2015， 23（3）：384-393.
[4] 曾兰， 叶飞， 李运星， 等. 精子DNA完整性与精液常规参数相关性分析. 中国计划生育和妇产科， 2014（6）：47-50.
[5] Sim?es R， Feitosa WB， Siqueira AF， et al. Influence of bovine sperm DNA fragmentation and oxidative stress on early embryo in vitro development outcome. Reproduction， 2013， 146（5）：433-441.
[6] Oleszczuk K， Giwercman A， Bungum M. Intra-individua1 variation of the sperm chromatin structure assay DNA fragmentation index in men from infertile couples. Hum Reprod， 2011， 26（12）：3244-3248.
[7] 季興哲， 杨杰， 宋娟， 等. 334例男性不育症患者精子DNA完整性与精液常规参数间的相关性分析. 生殖医学杂志， 2007， 26（12）：1233-1237.
[8] 范烺. 237例意向生育二孩男性精液常规与精子DNA损伤的相关性分析. 生殖医学杂志， 2007， 26（8）：831-834.
[9] 麦选诚， 董云华， 陈斌， 等. 不育患者精子DNA损伤和精液常规参数关系分析. 中国男科学杂志， 2016， 30（4）：19-22.
[10] 李非凡， 杨昊， 肖佳云， 等. 精子DNA碎片指数与精液参数相关性的初步研究. 中国男科学杂志， 2018， 32（1）：33-36.
[收稿日期：2018-10-11]
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