粉葛组培苗繁育技术及粉葛组培苗种植技术
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摘 要：粉葛是甘葛藤的干燥根，粉葛综合利用价值日益提高，本实验对粉葛快速繁殖体系进行了研究，以粉葛顶芽为材料进行无菌系的建立，生根等实验，探讨粉葛组培成苗技术，获得无菌苗生长健壮，成苗培养的最适培养基。低浓度的NAA能有效促进不定根数量的增多，为粉葛的繁殖提供重要的研究基础。
关键词：粉葛;组织培养;技术推广
目前，粉葛的组织培养工作已有初步进展，科研人员通过不同外植体诱导粉葛愈伤组织培育粉葛再生植株，粉葛已成为食用和药用植物，粉葛产业化生产进程加快，传统无性繁殖方式存在繁殖系数低、速度慢，且有带病、带毒风险等问题严重影响我国粉葛产业的快速发展，离体培养具有脱除了病毒等优点，是粉葛快速繁育的优选手段。系统开发粉葛快速繁殖途径，繁育大量组培苗，满足粉葛生产用种，推广粉葛快速繁育技术对粉葛规模化生产具有重要的意义。
一、粉葛组织培苗繁育技术研究
1.粉葛简介。粉葛是豆科葛属植物，粉葛植物的块根含黄豆苷元，葛根素等，科研资料报道有金雀异黄素，葛根皂苷元ABC等。粉葛又称葛根，藤本，根肥大，可食用，也作药用，花也可入药，解酒，用于酒醉。长江以南大部分省份都有野生分布或栽培。粉葛2014年被国家卫计委列入药食同源植物。
葛根是常用中药，性甘，具有解热生津，升阳止泻的功用，用于外感发热头痛，消渴，高血压劲项强痛。粉葛黄酮能改善冠脉，使冠脉血流量明显增加。也具有一定抗癌等作用。
粉葛块根加工成葛粉，含多种维生素，膳食纤维，为优良淀粉原料，葛粉已成为人们青睐的保健食品。
2.植物组织培养技术。植物组织培养是植物无菌培养技术，是根据植物的细胞全能性力量，利用植物的离体器官或细胞，在无菌的人工培养基条件下，诱导出愈伤组织，不定根，分化形成完整植株的过程。
将植物的一部分从母体分离，在无菌条件下培养发育成与母体相同的新植物体的技术。
植物细胞全能性是组织培养的理论基础，高等植物器官可不断分割，每个细胞具有分裂繁殖的潜能。
利用植物组织培养技术进行快速繁殖时，植物的根茎叶等可作为外植体进行立体培养，通过器官型，器官发生型诱导分化产生小植株。
3.组织培养技术的影响因素组织培养是跨世纪的生物技术，同常规的无性繁殖方法相比，其具有繁殖速度快，不受季节限制，经济效益高，组织培养结合超低温保持技术有效的保存植物种植资源。将植物部分细胞放在培养基上离体培养，产生出完整小植株是较复杂的培养过程。受很多因素影响、制约。
植物组织培养能否成功与选取的外植体基因型，种类，取材时间及外植体大小等有很大的关系。培养基是从无土栽培的营养液发展而来，人工合成培养基通常包括大量微量元素、支持物等。不同培养基由于其组织成分不同，培养效果有差异。
组织培养中常遇到一些问题导致实验的失败，如培养中的污染，玻璃化等是组织培养中的难题。
植物组织培养材料多取自室外，带入培养基会迅速分生滋长微生物病菌，导致培养失败，首先要进行表面消毒，用流水冲洗，然后进行深度消毒，选用合适的消毒剂及消毒剂浓度，才能达到消毒的目的。
二、粉葛组织培养
1.实验方法。采用田间当年生的枝条顶芽为外植体，培基为MS基本培养基，用0.7%的琼脂固化。取外植体用自来水加洗涤剂浸泡30min，转入超净工作台内，无菌冲洗3次。取已消毒外植体直接培养MS+NAA0.1mg/L，+6-BA0.2，进行无菌苗培养，30-40d后获得无菌苗。
将无菌苗切下径长0.5cm带芽茎段。将成苗培养获得幼苗切除愈伤组织后接入根生培养基中进行生根培养。
2.不同植物生长调节剂对成苗的影响。在只添有梯度浓度的NAA培基处理中，低浓度NAA促进芽的萌发，苗矮小健壮。NAA浓度达到0.5以上时出现生根。分析NAA与6-BA组合能很好的促进芽的萌发。10d后，萌芽发成小叶，20d后，枝叶伸长。在NAA/6-BA培养基中的苗明显增高，茎节增长，低浓度NAA与6BA组合促进成苗。
在成苗培養中应使用低浓度NAA与6BA搭配，6BA浓度不宜超0.3，两者组合效果优于单加NAA。在MS+NAA0.1mg/L+6-BA 0.3mg培养基中做成苗培养，可获得枝叶茂盛的无菌苗。
3.不同植物生长调节剂对粉葛试管苗生根的影响。生根培养基中高浓度的NAA加入，根的生长状况，较低浓度NAA促进不定根的生长主根增长。低浓度的NAA与IBA组合的NAA0.3mg/L+IBA0.3mg/L是粉葛无菌苗诱导生根适宜培养基条件。
三、实验结论
成苗首先要促进芽的萌发，然后促枝叶的伸长，让苗健壮生长。培养基激素的组合选取是决定植物组织培养成败的关键因素。细胞分裂素可延迟组织衰老，促进细胞的分裂分化，促进侧芽生长，生长速影响到茎的伸长，顶端优势与生根等现象，一般采用较低的生长素浓度比例，促进芽萌发，茎枝叶旺盛生长。MS+NAA0.1mg/L+BAO0.3mg/L是粉葛成苗的最好培养基。
根的形成分为根原基生长与不定根原基形成两个阶段，没有添加激素的培养基中没有根生长，加入低浓度的NAA与IBA的培养基中，主根根长增加。
四、粉葛组培苗种植技术
从主栽品种中选择农艺性状较好的优良单株，进行组织培养、繁育组培苗，其组培苗种植表现比当地栽培品种品质有明显优势，葛薯块大，产量高，纺锤形，皮薄，纤维少，无渣，味甘，口感好。农艺性状优点突出，每亩节省阉根工作量2天。每亩可节约人工费200元。蔓藤柔软下垂，可适当增加种植密度，亩产增600斤，单项增收约900元，经济效益可观。粉葛组培苗比当地栽培品种具有明显优势，因此生产用种不断增长，种植粉葛组培苗面积不断扩大。
粉葛组培苗种植管理，选择向阳，土层深厚的红壤土种植，单行种植，平地按1.5m开沟起垄，沟深、宽各50cm以上，双行双株种植，平地按3m开沟起垄，沟深、宽各50cm以上。每年2月中旬至4月下旬种植，亩种植600-800株。
移植5天后可适当稀释人畜粪水定根，发现死苗及时补栽，两行距间插1.8m的竹篱，将两条粗苗引上竹篱，并将距离地面1.2m以下的腋芽摘除，主茎长至1.5m高时，打顶控高，进行露根阉根，株保留2—3条根作为长薯根，其余割除。
肥水管理是保证粉葛高产的关键，种后20天首次追肥，此后1月穴施三元复合肥25-50g，晴天要冲水淋施，6月份后，葛根进入膨大高峰期。每穴施复合肥100g，20天施放一次，粉葛耐旱，切勿过湿。10月份后以保叶为主，连喷3次高钾叶面肥。
采收：葛叶转黄或落叶，时间12月至次年2月之间即可进行采收、出售或贮藏保鲜。
五、结语
本实验取芽茎为外植体，选择适当的生长调节剂和培养基，初步建立了粉葛试管成苗发生体系，试管苗培养基为MS+NAA0.1mg/L+-BA0.3mg/L，用低浓度的NAA与6-BA有利于试管苗的芽萌芽，试管苗生根培养基为MS+NAA0.3mg/L+IBA0.3mg/L。推广粉葛组培苗种植技术，促进粉葛产业发展。
参考文献：
[1]华晓琴，刘高亮，张庆辉，张鲁，章婷，钟宇.大巴山粉葛组织培养技术[J].浙江农业学报，2016，28（07）：1108-1114.
[2]朱丹青. 整枝和修根对粉葛产量和品质影响的研究[D].广西大学，2014.
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