超微技术对铁皮石斛粗多糖浸出的影响
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摘要 通过苯酚-硫酸法测定铁皮石斛超微粉与铁皮石斛常规粉水溶性粗多糖的含量，探讨超微技术对铁皮石斛粗多糖浸出的影响。结果表明，铁皮石斛超微粉中水溶性粗多糖含量为484.6 mg/g，常规粉水溶性粗多糖含量为370.2 mg/g，铁皮石斛超微粉水溶性粗多糖含量比常规粉水溶性粗多糖含量高30.9 %，二者的差异具有统计学意义（P<0.05）。超微技术有助于铁皮石斛粗多糖的浸出。
关键词 铁皮石斛;超微中药;粗多糖
中图分类号 R282 文献标识码 A
文章编号 1007-5739（2020）04-0214-02 开放科学（资源服务）标识码（OSID）
Abstract The phenol-sulfuric acid method was used to determine the water-soluble crude polysaccharide content of Dendrobium candidum ultrafine powder and regular powder，and the effect of ultramicrotechnique on the extraction of polysaccharides from Dendrobium candidum was investigated.The results showed that the content of water-soluble crude polysaccharide of Dendrobium candidum ultrafine powder was 484.6 mg/g，and the content of water-soluble crude polysaccharide of regular powder was 370.2 mg/g，the former was 30.9% higher than that of the later，there was a signficant difference between the two（P<0.05）.The ultra-microtechnique is helpful for the extraction of crude polysaccharides from D.officinale.
Key words Dendrobium officinale;ultra-micro Chinese medicine;crude polysaccharide
铁皮石斛（Dendrobium officinale）在《神農本草经》中被列为上品，“味甘，平。主伤中，除痹，下气，补五脏虚劳羸弱，强阴，久服厚肠胃”。《本草纲目》也有详细记载，《道藏》将铁皮石斛列为“九大仙草”之首，民间称其为“救命仙草”，拥有“药中黄金”之美誉[1]。研究表明，多糖是铁皮石斛的主要成分[2]，铁皮石斛对治疗胃肠道疾病、白内障、关节炎、血栓闭塞性脉管炎及慢性咽炎等疾病有很好的疗效[3]。石斛多糖对肠道中乳酸菌和双歧杆菌有明显的增殖作用，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和肺炎球菌都有很好的抑制作用[4]，石斛多糖同时具有增强免疫力的作用，对超氧阴离子自由基、羟基自由基的清除作用效果好[5]，从而对相关的肠道病原菌有很好的抑制作用。为了体现铁皮石斛超微制剂的优越性，本文对铁皮石斛超微细粉与传统细粉的粗多糖含量进行了研究。
1 材料与方法
1.1 试验材料
葡糖糖（西陇科学股份有限公司）、无水乙醇（天津市富宇精细化工有限公司）、苯酚（成都市科隆化学品有限公司）、浓硫酸（国药集团化学试剂有限公司）;铁皮石斛常规细粉和超微粉，由湖南龙石山铁皮石斛基地有限公司提供。
1.2 试验方法
1.2.1 铁皮石斛粗多糖的提取。参照《中华人民共和国药典》2015年一部中介绍的方法进行。设铁皮石斛常规粉和超微粉2个处理，即分别称取1 g铁皮石斛常规细粉和超微粉，加水200 mL，沸水煎煮2 h，放冷，转移至250 mL量瓶中，用少量水分次洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加水至刻度，摇匀、过滤，置于4 ℃冰箱保持，备用。
1.2.2 铁皮石斛中粗多糖含量的测定。
（1）葡萄糖标准曲线绘制[6]。准确称取在105 ℃干燥至恒重的葡萄糖100 mg，置于100 mL烧杯中，加水80 mL溶解，转移至100 mL容量瓶中，烧杯与玻璃棒反复润洗3次，润洗液均需移入容量瓶中，最后加水定容至刻度线，配成浓度为1 mg/mL葡萄糖标准液，选取部分葡萄糖标准液稀释为0.1 mg/mL置于4 ℃冰箱备用。葡萄糖标准曲线按表1进行制作。 （2）铁皮石斛粗多糖含量的测定。准确量取“1.2.1”项中的滤液2 mL，置于15 mL离心管中，加入无水乙醇8 mL，摇匀，冷藏过夜，取出，4 000 r/min离心20 min，弃去上清液，沉淀加80%乙醇洗涤2次，每次8 mL，离心，弃上清液，沉淀加热水溶解，转移至25 mL量瓶中，放冷，加水至刻度，摇匀，即得待测液。准确量取1 mL待测液（设3个平行，以蒸馏水作为空白对照），加入1 mL 5%苯酚溶液，摇匀，再加入浓硫酸5 mL，摇匀，置于沸水浴中加热20 min，置于冰浴中冷却5 min，在488 nm处测吸光度值，根据平均吸光度值计算铁皮石斛粗多糖的含量。
1.3 统计学分析
用SPSS 19.0软件处理数据，各分组所得计量数据采用平均值±标准差（x±s）表示，2组间均数符合正态性、方差齐性用t检验进行比较，否则运用非参数检验进行比较。
2 结果与分析
2.1 葡萄糖标准曲线
由图1可以看出，不同葡萄糖含量在488 nm处的吸收值均匀分布在标准曲线的两侧或其上，反映出此次试验葡萄糖标准曲线的线性极好，运用标准曲线能很好地计算各个吸光值下的葡萄糖含量。通过线性方程拟合发现吸光度与糖含量之间的关系方程式为Y=1.438X。
2.2 超微对铁皮石斛粗多糖浸出的影响
由图2可知，运用苯酚-硫酸法测得铁皮石斛常规粉中粗多糖的含量为370.2 mg/g，而铁皮石斛超微粉中粗多糖的含量为484.6 mg/g，结果表明，铁皮石斛超微粉粗多糖浸出量显著高于铁皮石斛常规粉（P<0.05）。进一步比较发现，铁皮石斛超微粉粗多糖浸出含量比铁皮石斛常规粉粗多糖浸出含量增加30.9%，促进了铁皮石斛的利用。综上可知，超微技术有助于铁皮石斛水溶性粗多糖的浸出。
3 结论与讨论
中药饮片经历了传统中药、配方颗粒、纳米中药、超微中药等发展历程[7]。传统中药饮片显示了极强的生命力，但是传统中药饮片服用前需临时煎煮，使用和携带不方便。超微中药采用现代科学技术与传统的中药炮制技术相结合，将传统饮片加工成一种粒径为微米级的新型中药饮片，服用方便。超微技术增加了药材成分与溶剂的接触面积，使中药有效成分在水中的溶出明显高于传统中药饮片，显著提高了药材利用率，节省了资源;同时超微粉碎能促进药物在体内的吸收，提高生物利用度[8]。陈 熹等[9]采用高效液相色谱法分别测定肉苁蓉常规粉和肉苁蓉超微粉中有效成分的含量，结果发现，肉苁蓉常规粉中松果菊苷、毛蕊花糖苷的含量明显低于超微粉（P<0.01）。何春龙等[10]通过比较灵芝超微粉、普通粉以及其提取物三萜类成分之间指纹图谱的差异，发现灵芝药材超微粉碎后，三萜类成分种类数目并未改变但单位质量相对峰面积积分值均明显提高。本研究通过苯酚-硫酸测定法发现超微铁皮石斛能够显著提高粗多糖浸出量，对铁皮石斛的临床应用和产品研发具有重要的指导意义。
4 参考文献
[1] 罗迪，庞璐，赵兴兵，等.浅析《本草纲目》中铁皮石斛的功能主治[J].中国中医杂志，2013，29（3）：108-109.
[2] 鹿伟，陈玉满，徐彩菊，等.铁皮石斛抗疲劳作用研究[J].中医卫生检验杂志，2010，20（10）：2488-2490.
[3] 李玲，邓晓兰，赵兴兵，等.铁皮石斛化学成分及药理作用研究进展[J].肿瘤药学，2011，1（2）：90-93.
[4] 张周英，杨成密，蓝忠，等.石斛多糖的抗菌作用研究[J].中国医药指南，2012，10（33）：439-440.
[5] 查学强，王军辉，潘利华，等.石斛多糖体外抗氧化活性的研究[J].食品科学，2007，10（28）：92-93.
[6] 中华人民共和国药典委员会.《中华人民共和国药典》（一部）[S].北京：中国医药科技出版社，2010：266.
[7] 张爱霞，辛二旦，边甜甜，等.新型中药饮片的发展与趋势[J].中华中医药杂志，2019，34（2）：44-46.
[8] 钱珊珊，桂双英，杨满琴，等.中药超微粉碎技术的研究进展[J].陕西中医药大学学报，2019，42（3）：136-140.
[9] 陈熹.超微粉碎技术对肉苁蓉的粉碎效果及有效成分含量的影响[J].临床合理用药杂志，2017，10（5）：86-87.
[10] 何春龍，张屏，鞠爱华，等.灵芝超微粉、普通粉和灵芝提取物高效液相色谱指纹图谱的比较研究[J].中华中医药杂志，2017，32（2）：575-578.
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