2015年～2018年孕妇血型检测结果分析

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　　【摘 要】 目的：检测2015年～2018年建卡孕妇ABO血型及Rh血型，做好母婴血型不合孕妇的保健指导工作。方法：微柱凝胶法检测血型。结果：2567例孕妇：A+型765例，A-型1例;B+型715例，B.型4例;O+型824例，O-型4例;AB+型252例，AB-型2例;A型、B型、O型、AB型各占29.84%、28.01%、32.26%、9.89%。孕妇A型、B型、O型三种血型的分布率明显高于AB型（χ2=6.63，P<0.01）;孕妇A型、B型、O型三种血型分布率无显著差异（χ2=3.85，P>0.05）。孕妇Rh阳性血型检出率明显高于Rh阴性检出率（χ2=6.63，P<0.01）。结论：根据血型检测结果进行分析，及时地对孕妇进行血型知识的普及、健康教育和个体化指导，能够有效减少新生儿溶血症的发生率，保证母婴安全。
　　【关键词】
　　血型;新生儿溶血病（HDN）;血清IgG抗体;微柱凝胶法
　　为了进一步做好母婴血型不合的孕妇保健指导工作，做到早期预测新生儿溶血病（HDN）发生的可能性，对2015～2018年2567例建卡孕妇进行了ABO血型及Rh血型检查。
　　1 资料与方法
　　1.1 一般资料
　　使用EDTA抗凝管采集2015年～2018年2567例早孕建卡的孕妇静脉血2.0mL，年龄21～45岁。标本要求无血液稀释、细菌污染、离心后无溶血及明显乳糜。
　　1.2 仪器与试剂
　　卡式血型离心机（Dianafuge）：由北京佰利申科贸有限公司提供。
　　ABO.Rh血型检测卡：由Diagnostic Grifols，S.A.提供，有效期内使用。
　　1.3 方法
　　微柱凝胶法[1]。微柱凝胶法结果敏感、准确、重复性好，肉眼观察清晰明确，易于客观判定，可避免因经验不足对结果判定的影响。可拍照保留试验结果图像，较试管法保存时间更长。适用于大量标本检测，可单份标本多项指标一次离心检测，配套仪器将整个过程自动化标准化。微柱凝胶技术用于孕妇产前检测，操作方便简单，可为新生儿溶血疾病的提早预防提供更多理论依据[2.4]。
　　1.3.1 检验原理 红细胞抗原与相应抗体在凝胶介质中发生肉眼可见的凝集。将特定配比的葡萄糖凝胶颗粒分散装到特制的凝胶微柱中，制备成微柱凝胶卡。凝胶柱的上层为“反应池”（抗体抗原反应区），柱的下层为“分离池”。其原理是利用凝胶颗粒与凝胶颗粒之间的间隙形成的分子筛作用，在微柱凝胶介质中红细胞与相应抗体结合，经过低速离心，凝集成块的红细胞由于体积大被凝胶阻滞不能通过凝胶层，留在凝胶介质的上层或中间，即阳性反应;未凝集游离红细胞由于体积小而通过凝胶之间的间隙沉积在微柱凝胶检测管底部（管底尖部），形成细胞扣，即阴性反应。
　　1.3.2 操作 1）配制红细胞悬液：一次性试管中加入0.5mL 0.9%的氯化钠溶液;吸取全血25μL加入至有0.5mL 0.9%的氯化钠溶液的一次性试管中，配制为2%～3%的RBC混悬液，混匀后待用。2）标记、加红细胞悬液：用标记笔在微柱血型卡上标记标本号;按照试剂卡说明书要求，用微量加样器于标签为抗A、抗B的微柱反应孔中央加定量待检的红细胞悬液（正定型），在标签为A、B红细胞的微柱反应孔中央分别加定量的A1、B型红细胞悬液试剂（反定型），在质控管中加定量待检的红细胞悬液。3）加血浆、离心：按照试剂卡说明书要求，在标签为A、B红细胞的微柱反应孔中央加一定量的待检的血浆（反定型），按照试剂卡说明书要求在专用离心机上水平离心。4）观察结果：取出凝胶微柱卡，用肉眼观察。阳性：对照管的细胞沉淀在管底，检测管的凝集块在胶上或胶中;阴性：质控管和检测管的红细胞均沉淀在管底。5）判读结果见表1。准确报告后登记完善。
　　1.4 统计学分析
　　采用SPSS 19.0统计软件进行数据处理及统计学分析，计数资料以%表示，组间比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。
　　2 结果
　　2015年～2018年2567例孕妇ABO血型分布情况见表2。
　　2015年～2018年2567例孕妇Rh血型分布情况见表3。
　　3 讨论
　　奥地利维也纳大学的Landsteiner在1900年发现了人类第一个血型系统，即ABO血型系统。1924年Bernstein提出，ABO血型遗传的基因座上，有A、B、O三个等位基因，是常染色体显性遗传，每个子代均可从亲代各得到一个单倍体，子代从父母双方各获得一种基因，可有六种基因组合，有A型、B型、O型及AB型四种表现型[5]。1940年，Landsteiner和Wiener用恒河猴的红细胞免疫豚鼠和家兔，发现恒河猴和多数人体内的红细胞上存在一种同样的Rh血型抗原物质，就以恒河猴（Rhesus monkeys）外文名称的头两个字母Rh命名。Rh基因位于第1号染色体上由RHD和RHCE两个紧密连锁的基因构成。Rh血型共有五种抗原，即C、c、D、E、e，其中以D抗原的抗原性最强。由于D抗原最早被发现，故临床上凡是红细胞上D抗原阳性者称为Rh阳性，红细胞上无D抗原者称为Rh阴性。这样就使已发现的红细胞A、B、O及AB四种主要血型的人，又都分别一分为二地被划分为Rh阳性和Rh阴性两种。
　　 由表2可知，2015年～2018年2567例孕妇血型分布A型、B型、O型、AB型各占29.84%、28.01%、32.26%、9.89%。经统计学处理，孕妇A型、B型、O型三种血型的分布率均明显高于AB型（χ2=6.63，P<0.01）。孕妇A型、B型、O型三种血型分布率无差异（χ2=3.85，P>0.05）。由表3可知，2015年～2018年2567例孕妇Rh血型检查结果，Rh陽性血型检出率明显高于Rh阴性血型检出率，经统计学处理，χ2=6.63，P<0.01。11例Rh阴性血型：1例A-、4例B-、4例O-和2例AB-。 　　新生儿溶血病（hemolytic disease of the newborn，HDN）一般是指母婴血型不合而引起胎儿免疫性溶血性贫血。其中ABO和Rh血型系统引起的新生儿溶血病最常见[6]。O型血孕妇怀有的A型或B型胎儿，其母亲体内的抗-A、抗-B抗体为IgG类，能够通过胎盘屏障引起胎儿溶血，会造成新生儿溶血性黄疸、贫血、水肿、胆红素脑病、肝脾肿大，严重危害患儿健康及智力[7.8]，直接威胁新生儿安全[9]。
　　O型母亲血清中IgG抗A（B）效价较A型血清中的抗B和B型血清中的抗A为高，辛磊等[10]认为：O型血母亲抗A（B）抗体效价与ABO新生儿溶血检出率呈正相关，一定程度上可以对新生儿溶血率进行预测。符小玲等[11]认为：O型血孕妇HDN的发生率较高，与丈夫ABO血型和新生儿性别均无关，与孕妇产前血清IgG抗.A（B）效价有关，随抗体效价增高而升高。O型血孕妇抗体效价与新生儿溶血发病率之间存在明显联系[12]，因此，密切监测O型血孕妇抗体效价，可帮助预测新生儿溶血病发生率，并选择有效预防和治疗措施，降低新生儿溶血风险[13]。又因为胎儿红细胞上的A位点（抗原决定簇）较B位点为多，故发生ABO溶血病以A型婴儿比B型婴儿为多[14]。但是冯素芳等[15]认为：ABO.HDN中，A型HDN的发病率与B型HDN的发病率差异无显著性;红细胞抗体释放试验最敏感;IgG血型抗体效价与HDN的发病率呈正相关，随着IgG血型抗体效价的升高，HDN的发病率也随着升高。因AB血型物质广泛存在于自然界某些植物、寄生虫及细菌中，O型母亲通常在第一胎前即可受到自然界具有A、B血型物质的刺激而产生抗A、抗B抗体（IgG），故40%～50% ABO溶血病发生在第一胎。夫妇血型不合时，监测O型血孕母血清中IgG抗体效价，可预测新生儿溶血病发生的可能性，但不能判定新生儿溶血症的发生时间及严重程度[16.17]。
　　本文资料，2015年～2018年824例O+型血孕妇及其丈夫接受了详细的ABO血型知识普及和健康指导。O型孕妇ABO血型特殊抗体检测，抗体滴度越高，其发生新生儿溶血反应概率越大，且O型孕妇开展ABO血型特殊抗体检测对新生儿发生溶血反应有较高预测价值[18]。王宣力等[19.21]认为：孕妇分娩前IgG抗.A（B）抗体滴度的升高可显著增加新生儿溶血的发病率，对于夫妻ABO血型不合的孕妇应加强其IgG抗.A（B）抗体的检测。ABO溶血病的发病率随着孕妇血清抗体效价的增高而增加，O型孕妇产前抗体效价的检测对预防新生儿溶血病、降低患病风险具有重要意义[22]。对产前保健孕妇开展ABO血型抗体效价检测，并对探查到的异常情况开展及时有效的治疗，可使母婴血型不合导致的新生儿溶血症的发生得以有效减少[23]。孕母O型血清中IgG抗（A）B抗体效价与ABO.HDN高度相关，动态监测孕母O型血清中IgG抗（A）B抗体效价，对预防和治疗新生儿溶血疾病具有非常重要的临床价值[24]。当孕妇IgG抗体A（B）效价≥64，新生儿就有可能出现HDN[25];如果抗体滴度达到1∶512则高度怀疑胎儿溶血。但孕妇抗A或抗B滴度的高低并非都与胎儿溶血成正比，需要结合其他检测方法综合判断。
　　Rh血型抗体主要是IgG，且多数是IgG亚类，其能够通过胎盘，从而导致新生儿溶血病。其中引起新生儿溶血病的最主要和最常见的Rh血型抗体是抗D。通常发生于第二次或多次妊娠的孕妇，而且随着妊娠次数的增加，发生新生儿溶血病的机会也随之增多，Rh血型抗体引起的新生儿溶血病比ABO血型引起的溶血病要严重。本文11例Rh阴性孕妇及其丈夫在第一时间接受了有关Rh血型知识的健康教育和个体化指导。根据有关要求及孕妇本人的意愿转诊Rh阴性孕妇至上级妇产医院并在妊娠16周时检测Rh血型抗体作为基础值，以后每2～4周检测1次。定期监测RhD阴性孕妇的血型不规则抗体，对抗体阳性且效价较高者进行必要的产前治疗。加强对尚未生育过的Rh阴性年轻女性的血型知识宣教是预防HDN的重要措施[26]。Rh血型不合中，抗D抗体滴度自1∶2开始即有意义。抗D滴度达到1∶16时胎儿溶血情况加重。Rh母儿血型不合与ABO血型不合不同，抗体滴度与胎儿溶血程度成正比。因此对于IgG效价高的孕妇在产前进行效价的控制，对于降低新生儿溶血病的发病率具有重要的临床意义[27]。文艺[28]认为：溶血疾病的诊疗时间与疾病的严重程度呈正相关性，就诊时间越迟，疾病程度越严重。诊断方法也不能仅局限于单纯的溶血疾病本身，应对其潜在或正伴有的并发症进行联合治疗。而在治疗方法中，应注意光疗、补碱及给与丙种球蛋白等方法的综合应用。对孕妇进行产前的中药预防，可显著降低新生儿溶血疾病的发生率。新生儿溶血者在以丙种球蛋白、间断光疗治疗期间给予护理，患儿T.BIL水平明显降低，黄疸症状改善良好，患儿恢复快[29]。刘巧英等[30]认为：通过应用抗D免疫球蛋白治疗针对Rh血型不合孕妇来说，具有预防死产及孕妇死亡的价值;并且可以有力的减轻及减少新生儿溶血病的发生。
　　经随访：2015年～2018年建卡孕妇824例O+型血孕妇：血清中IgG抗A（B）效价≥64、分娩后的新生儿为A型或B型者及11例Rh阴性孕妇分别在不同的二级及以上医院根据出生后症状对因对症处理的均母子健康。
　　母胎血型不合溶血性疾病是一种与血型有关的同种免疫性疾病，主要影响胎儿，病变也可延续至早期新生儿。母胎血型不合时，进入母体血液循环的胎儿红细胞可诱导母体的免疫系统产生抗体，抗体通过胎盘进入胎儿血液循环系统，结合、破坏胎儿红细胞，导致胎儿和新生儿溶血性疾病。本研究中2015年～2018年先后接受了血型检测和血型知识的普及、健康教育及个体化细心指导后的孕妇在分娩后无1例新生儿溶血性疾病發生死亡，说明基层妇幼保健卫生机构做好一级预防工作非常重要，在妊娠期对母子血型不合孕妇进行指导干预，能够有效减少新生儿溶血症的发生率，保证母婴安全。 　　参考文献
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