VEGF、P53和CerbB-2蛋白在结肠癌及肝肺转移中的表达分析
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【摘 要】 目的：分析VEGF、P53和CerbB-2蛋白在结肠癌及肝肺转移中的表达。方法：选取2016年6月至2019年6月本院收治的结肠癌患者80例，采用免疫组织化学法对结肠癌及肝肺转移组织中的VEGF、P53和CerbB-2蛋白三者之间的表达进行分析，对三种蛋白的表达与结肠癌及肝肺转移之间的相关性展开讨论。结果：2个或2个以上的蛋白表达者肝转移率为53.49%、肺转移率为41.86%;<2个蛋白表达者肝转移率为48.65%、肺转移率为27.03%，2個或2个以上的蛋白表达者，肝肺转移率为62.79%，<2个蛋白表达肝肺转移率为48.65%，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：VEGF、P53和CerbB-2蛋白在结肠癌及肝肺转移之间的关系密切，三种蛋白在肝肺转移中起到一种协同效果，并且可以将其作为临床检测的重要指标。
【关键词】 VEGF;P53;CerbB-2;结肠癌;肝肺转移;表达
文章编号：WHR201908196
结肠癌是一种恶性肠胃道中肿瘤，在所有的恶性肿瘤中，其发病率占10%，仅次于胃癌、肺癌。人们生活习惯的变化导致结肠癌的发病率不断上升，对人们的健康是一种极大的威胁。结肠癌的预后因素较多[1]，本研究针对VEGF、P53和CerbB-2三种蛋白在结肠癌患者中的表达情况进行分析，讨论影响结肠癌及肝肺转移之间的相关因素，为临床医生提供准确的参考依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2016年6月至2019年6月经病理诊断证实为结肠癌患者80例。其中男性54例，女性26例，年龄30～80岁，平均年龄（54.85±6.5）岁。所有患者均无家族性遗传史;术前均没有进行任何关于肿瘤的化疗。肝转移患者35例，肺转移患者20例，肝肺转移患者25例。对患者进行超声检查、X线检查、CT检查，术前、术中、术后观察，只要其中一种方法检查出患者存在有肝、肺转移均被符合本次研究。
1.2 方法
1.2.1 研究设备及试剂 光学显微镜、切片机、微波炉、甲醛、苏木精、伊红、无水乙醇、丙酮、二甲苯、盐酸。免疫组化所用抗体：鼠抗血管内皮生长因子（VEGF）单克隆抗体;兔抗人CerB-2单克隆抗体;鼠抗人p53单克隆抗体。链霉素抗生物素蛋白—过氧化酶试剂盒、DAB酶底物显色试剂盒、AEC显色试剂盒、抗原修复液、防脱片粘附剂。
1.2.2 研究方法 石蜡切片H.E染色步骤：切片脱蜡至水—染胞核—分色—染胞浆—脱水—透明—封片。
免疫组织化学染色：1）玻片防脱处理：使用蒸馏水将多聚赖氨酸按稀释，将玻片放入稀释的多聚赖氨酸中。2）染色步骤：脱蜡至水—在3H2O2室温孵育10min—蒸馏水洗—室温孵育10min—滴加一抗、二抗、三抗-VEGF、P53用DAB显色，CerbB-2用AEC显色—封片。
1.3 结果判断
将染色设置成阳性与阴性，阳性采用抗体表达高的乳腺癌组织;阴性以PBS代替一抗[2]。
VEGF、P53和CerbB-2结果判断：VEGF阳性细胞为黄色;P53阳性细胞为棕黄色;CerbB-2阳性细胞为红色。采用半定量积分法，选择具有代表性的高倍镜，对每张切片根据阳性细胞染色强度及阳性细胞进行分级。0分：无色;1分：浅棕黄色;2分：棕黄色;3分：深棕黄色。
1.4 统计学分析
利用SPSS 18.0统计软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，两组间计量资料用t检验，计数资料用（%）表示，二者计数资料比较用χ2检验，P<0.05表示数据差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 VEGF、P53和CerbB-2联合表达在结肠癌肝转移及肺转移的关系
VEGF、P53和Cerb-2在结肠癌中，将只有1个蛋白表达，或者3个蛋白均不表达的情况分为一组，将2个或者2个以上的蛋白表达的情况分为一组，对两组的蛋白表达情况进行分析，如表1所示。2个或2个以上的蛋白表达者肝转移率为53.49%、肺转移率为41.86%;<2个蛋白表达者肝转移率为48.65%、肺转移率为27.03%，两组差异具有统计学意义（P<0.05）。
2.2 VEGF、P53和CerbB-2联合表达在结肠癌肝肺转移的关系
2个或2个以上的蛋白表达者，肝肺转移率为62.79%，<2个蛋白表达肝肺转移率为48.65%，差异具有统计学意义（P<0.05）。如表2所示。
3 讨论
肿瘤转移是一种较为复杂的病理现象[3]，在临床肿瘤治疗中是一项难题，血液转移是结肠癌中主要的转移方式，也是临床手术治疗失败的重要原因，肿瘤在生长和转移的过程中需要有新生血管的生长来提供营养，从而为肿瘤转移提供转移途径。在结肠癌组织中，肿瘤细胞可以通过旁分泌效应刺激VEGF表达病促进结肠癌新生血管生成，导致结肠癌进一步生长及远处转移。最常见的转移部位就是肝脏，此外还有肺部转移、骨头转移以及脑部转移等[4]。
在本研究中，80例结肠癌患者中，其转移率以肝转移居多，其次是肺。VEGF是促进血管生长的重要因素，相当于组胺50000倍[5]，会促进肿瘤新生血管的形成从而增加肿瘤的转移的风险;P53蛋白表达，是肿瘤发生的重要因素;CerbB-2在结肠癌转移中，与VEGF、P53协同，促进肿瘤的发生及转移。VEGF、P53和CerbB-2蛋白在结肠癌及肝肺转移之间的关系密切，三种蛋白在肝肺转移中起到一种协同效果，并且可以将其作为临床检测的重要指标。
综上所述，结肠癌的肝肺转移，是肿瘤细胞增殖和肿瘤血管生长共同作用的结果。三种蛋白会促进结肠癌细胞增殖及肿瘤血管生成，在结肠癌肝肺转移中发挥协同作用。
参考文献
[1] 王旭东，侯懿，陈静.结肠癌组织中血小板应答蛋白-1和血管内皮生长因子的表达及其预后分析[J].山西医药杂志，2017，46（16）：1932-1935.
[2] 嵇晓辉，李军，杨金花.SATB2和P53蛋白在结肠癌组织中的表达及临床意义[J].实用医学杂志，2017，33（23）：3945-3948.
[3] 武现生，唐云，陈志达，等.VEGF和p53蛋白在甲状腺肿瘤中的表达及在诊断甲状腺良、恶性肿瘤中的应用价值研究[J].癌症进展，2017，15（04）：428-431.
[4] 吴国栋.p53、c-erbB-2及血管内皮生长因子蛋白表达对非小细胞肺癌辅助化疗的临床预测[J].广州医学院学报，2017，45（06）：24-26.
[5] 尹培，刘浩，霍红旗，等.乳腺癌FDG摄取与VEGF、p53表达在淋巴结转移中的临床意义[J].河北医科大学学报，2017，38（04）：438-441.
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